一种濒危植物疏花水柏枝野生种质高效繁育方法技术

本发明专利技术提供了一种濒危植物疏花水柏枝野生种质高效繁育方法，通过植物组织培养技术，选取野生居群疏花水柏枝健壮无病虫害幼嫩的带芽茎段为外植体，用一种特制的培养基进行快速高效的繁育无菌苗及其炼苗，诱导培养基配方为1/2MS+6

【技术实现步骤摘要】
一种濒危植物疏花水柏枝野生种质高效繁育方法


[0001]本专利技术涉及一种濒危植物疏花水柏枝野生种质高效繁育方法，涉及生物繁育


技术介绍

[0002]疏花水柏枝(Myricaria laxiflora(Franch.)P.Y.Zhang et Y.J.Zhang)是三峡库区特有濒危珍稀植物，属于柽柳科水柏枝属的多年生直立灌木。汛期，疏花水柏枝在江水中休眠；枯水期，它又迅速生长繁殖。它的根系可以深达2米，枝条韧性强，根系发达，具有较强的耐淹性和抗冲刷能力，非常适宜于长江流域滩涂边坡栽植，是一种用于固坡护沙治理消落带的优势树种。但因其原生境丧失，种群数量锐减，种质资源破坏严重，物种遗传多样性降低，难以自然繁育更新。基于珍稀植物资源的抢救性保护和消落带治理，其高效的繁育方法具有重要的理论与实践意义。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的是提供一种濒危植物疏花水柏枝野生种质高效繁育方法，通过最适配方和方法实现植株在短时间快速高效地增殖，相较于扦插和播种等传统繁育方法对野生母本的大量破坏和成苗率低，本繁育方法配方简单，取材容易，培养周期短，成活率高，成苗率高达85％，对野生植株破坏小，保存了野外疏花水柏枝的遗传多样性及其优良性状。
[0004]为了实现上述的方法特征，本专利技术的目的是这样实现的：一种濒危植物疏花水柏枝野生种质高效繁育方法，它包括如下步骤：(1)采集带芽茎段为外植体浸入清水中保存，取出后剪成带芽小段，洗衣粉溶液浸泡后再用清水清洗，冲净凉干后待用；(2)将步骤(1)中处理后的外植体置于培养基中，密闭后进行室内培养，经诱导不定芽萌发后得到无菌苗；(3)将含培养基的无菌苗在密闭环境下温室静置一段时间后，置于室外空气环境下放置一段时间，再在室外密闭环境下静置一段时间后取出移栽至沙河基质中。
[0005]2.根据权利要求1所述的濒危植物疏花水柏枝野外种质高效繁育方法，其特征在于，步骤(2)中培养基为1/2MS+6
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BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖20mg/L+琼脂5.0g/L+Ac200mg/L+5
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20mg/L的可溶性淀粉，pH值6.0～7.3。
[0006]3.根据权利要求2所述的濒危植物疏花水柏枝野外种质高效繁育方法，其特征在于，步骤(2)中培养基为1/2MS+6
‑
BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖20mg/L+琼脂5.0g/L+Ac200mg/L+10
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15mg/L的可溶性淀粉，pH值6.5～7.0，弱碱性。
[0007]4.根据权利要求3所述的濒危植物疏花水柏枝野外种质高效繁育方法，其特征在于，步骤(2)中培养室内培养，温度为19～25℃、湿度为70％、光照强度为1400～1800lx、光照时间为14～16h。
[0008]5.根据权利要求4所述的濒危植物疏花水柏枝野外种质高效繁育方法，其特征在
于，步骤(2)中培养室内培养，先在温度为20℃培养室培养至茎段木质化并长出嫩叶，再在温度为25℃的培养室培养至产生二级根。
[0009]6.根据权利要求1所述的濒危植物疏花水柏枝野外种质高效繁育方法，其特征在于，步骤(3)中含培养基的无菌苗在密闭环境下温度为30℃的温室静置3
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5d，再在室外空气环境下放置2
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3d，再在室外密闭环境下静置3
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5d后取出移栽至沙河基质中。
[0010]7.根据权利要求1所述的濒危植物疏花水柏枝野外种质高效繁育方法，其特征在于，所述的密闭环境是指将带芽小段接种于步骤3配制好的培养基上后，拧紧瓶盖，避免环境空气侵入；空气环境是指培养瓶的瓶盖以全打开或未拧紧的方式对无菌苗进行培养；所述的培养瓶为450ml带透气覆膜瓶盖国产塑料材质的培养瓶。
[0011]移栽后浇透水，前期适当遮荫，后期逐渐增加光照，4～6d后喷施聚磷酸铵等水溶性肥料，每周喷施一次，连续喷施3～5次可完成疏花水柏枝繁育。
[0012]本专利技术有如下有益效果：本专利技术通过植物组织培养技术，选取野生居群疏花水柏枝健壮无病虫害幼嫩的带芽茎段为外植体，用一种特制的培养基进行快速高效的繁育，保存了野外疏花水柏枝的遗传多样性及其优良性状，管理方便，操作简单，破坏性小，成本较低，可在短时间内批量繁育。
[0013]本专利技术针对无菌苗易干枯的问题，将疏花水柏枝先在温度较低的培养室培养促进茎段的生长和分化；再在温度较高的培养室培养适应失水和渗透压升高的胁迫，促进根系生长，提高适应干旱的能力。
[0014]本专利技术针对无菌苗易被污染的问题，发现在弱碱性条件下，可溶性淀粉对杂菌有较好的抑制作用。
[0015]本专利技术针对无菌苗难以适应室外环境的问题，炼苗时利用可溶性淀粉为培养基产生的杂菌提供碳源和能源，利用温室的高温促使培养基内的杂菌滋长，胁迫疏花水柏枝无菌苗适应杂菌滋长的环境，再放置在室外空气环境下适应气候变化，并引入室外的杂菌，再在室外密闭环境下生长适应后，取出移栽至沙河基质中，提高疏花水柏枝的成苗率。
附图说明
[0016]图1为萌芽率较高的外植体。
[0017]图2为生长势较好的无菌苗。
[0018]图3为培养室生根较好的无菌苗图4为杂菌滋长的无菌苗。
[0019]图5为温室滋长的杂菌。
[0020]图6为无菌苗的炼苗移栽。
具体实施方式
[0021]下面结合附图对本专利技术的实施方式做进一步的说明。
[0022]1、外植体的采集以宜昌市胭脂坝江心洲野外采集的疏花水柏枝带芽茎段为外植体，时间选择10～12月的晴天上午8～9点钟进行。
[0023]2、外植体的处理外植体剪成5cm左右的小段，用洗衣粉溶液清洗掉灰尘及其杂质，再用0.2％消毒粉浸泡10min消毒，流水冲洗1
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2h后备用。
[0024]3、培养基配制与灭菌选择1/2MS基本培养基，琼脂5.0g/L，蔗糖20g/L，添加激素组合6
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BA 0.2mg/L、NAA 0.2mg/L、AC 0.2g/L，可溶性淀粉含量和pH值见表1。每处理45瓶，每瓶接1个外植体，然后进行分装于450mL的组培瓶内，每瓶分装25mL，分装完毕后及时在121℃高温蒸汽灭菌锅内灭菌20min，冷却凝固后待用。
[0025]4、外植体消毒与接种在接种室超净工作台上将预处理好的外植体用75％酒精消毒30s，然后用无菌水冲洗3次，再加5滴吐温
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20的0.1％HgCl2消毒10～15min，随后再用无菌水冲洗5次，取出放于无菌滤纸上吸干外植体表面水份，切成1.5～3cm带芽小段接种于步骤3配制好的培养基上，如图1所示，先在温度为20℃培养室培养至茎段木质化并长出嫩叶，再在温度为25℃的培养室培养至产生二级根，光照强度为1400～1800lx、光照时间为14～16h，诱导生根，得到无菌苗，见图2。
[0026]30d后统计记本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种濒危植物疏花水柏枝野外种质高效繁育方法，其特征在于，它包括如下步骤：（1）采集带芽茎段为外植体浸入清水中保存，取出后剪成带芽小段，洗衣粉溶液浸泡后再用清水清洗，冲净凉干后待用；（2）将步骤（1）中处理后的外植体置于培养基中，密闭后进行室内培养，经诱导不定芽萌发后得到无菌苗；（3）将含培养基的无菌苗在密闭环境下的温室静置一段时间后，置于室外空气环境下放置一段时间，再在室外密闭环境下静置一段时间后取出移栽至沙河基质中。2.根据权利要求1所述的濒危植物疏花水柏枝野外种质高效繁育方法，其特征在于，步骤(2)中培养基为1/2MS+6
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BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖20mg/L+琼脂5.0g/L+Ac200mg/L+5
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25 mg/L的可溶性淀粉，pH值6.0~7.5。3.根据权利要求2所述的濒危植物疏花水柏枝野外种质高效繁育方法，其特征在于，步骤(2)中培养基为1/2MS+6
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BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖20mg/L+琼脂5.0g/L+Ac200mg/L+10
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15 mg/L的可溶性淀...

【专利技术属性】
技术研发人员：李豪，陈会员，黄桂云，郭银花，邱利文，张定军，
申请(专利权)人：中国长江三峡集团有限公司，
类型：发明
国别省市：