YTHDC2过表达载体的应用、CHO细胞系的应用、重组蛋白表达系统技术方案

本发明专利技术属于基因工程技术领域，具体涉及YTHDC2过表达载体的应用、CHO细胞系的应用、重组蛋白表达系统。本发明专利技术将YTHDC2过表达载体转染至CHO细胞构建过表达YTHDC2的CHO细胞系，该CHO细胞系能够显著提高YTHDC2的mRNA和蛋白表达水平，同时该CHO细胞系作为重组蛋白表达用宿主细胞，相比野生型CHO细胞系，提升重组蛋白表达量，有效克服了目前CHO细胞表达系统存在的表达水平较低的问题；进一步的，本发明专利技术以含转座子元件的出发载体，构建YTHDC2过表达载体，并且通过PBase持续高效催化YTHDC2过表达载体整合到CHO细胞的基因中，实现CHO细胞中YTHDC2的稳定过表达。YTHDC2的稳定过表达。YTHDC2的稳定过表达。

【技术实现步骤摘要】
YTHDC2过表达载体的应用、CHO细胞系的应用、重组蛋白表达系统


[0001]本专利技术属于基因工程
，具体涉及YTHDC2过表达载体的应用、CHO细胞系的应用、重组蛋白表达系统。

技术介绍

[0002]中国仓鼠卵巢(Chinesehamsterovary,CHO)细胞是目前应用最为广泛的哺乳动物细胞表达系统，但仍突出存在重组蛋白表达量较低和异质性等问题，无法满足用于疫苗开发、临床治疗药物和基因疗法等方面日益增长的需求。因此，利用基因和细胞工程的方法进行CHO细胞重组表达研究，对于提高其转基因表达水平和表达稳定性、建立高产稳产的重组蛋白CHO细胞表达系统具有十分重要的意义和应用价值。
[0003]可逆性RNA甲基化作为近年来基因组表观修饰的热点被科研人员广泛研究。N6
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甲基腺嘌呤(N6
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methyladenosine,m6A)是一种通过甲基转移酶复合体将甲基转移到腺嘌呤的第六个氮原子上来取代原来的氢原子的修饰，它可以被去甲基酶逆转。随后，研究人员陆续定位了哺乳动物转录组中的m6A，鉴定了这本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.YTHDC2过表达载体在构建重组蛋白表达系统方面的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述YTHDC2过表达载体是通过将YTHDC2编码基因插入出发载体构建而成。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述YTHDC2编码基因的核酸序列如SEQ ID NO.1所示。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述出发载体为piggyBac。5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述YTHDC2过表达载体是通过将YTHDC2编码基因插入LAC启动子下游构建而成。6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，包括首先将YTHDC2过表达载体和转座酶共转染CHO细胞，然后将重组蛋白表达质粒转染过表达YTHDC2的CHO细胞。7.一种过表达YTHDC2的CHO细胞系作为重组蛋白表达用宿主细胞...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾岩龙，崔钊铭，王天云，郭家良，张玺，王小引，高燕平，郭潇，耿少雷，林艳，
申请(专利权)人：新乡医学院，
类型：发明
国别省市：