【技术实现步骤摘要】
一种增强新城疫病毒免疫效果的抗原及其制备方法和应用
[0001]本专利技术涉及动物免疫学领域,尤其涉及一种增强新城疫病毒免疫效果的抗原及其制备方法和应用。
技术背景
[0002]新城疫(Newcastle Disease,ND)是由新城疫病毒(Newcastle Disease Virus,NDV)引起的禽类疾病综合征,尤以高热、呼吸困难和消化系统病变为主要症状。截止目前为止,ND已造成四次大流行(Alexander D J,Aldous E W,Fuller C M.The long view:a selective review of 40years of Newcastle disease research[J].Avian Pathology,2012,41(4):329
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335),且每次大流行都会有新基因型的产生,导致原有疫苗不能有效抵抗病毒的入侵。
[0003]现行的ND疫苗主要是灭活苗和减毒疫苗,弱毒疫苗具有较好的保护作用,却存在易受母源抗体干扰、不完全保护和毒力返强等不足;灭活苗虽 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种增强新城疫病毒免疫效果的抗原,其特征在于,该抗原是由Ii
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key
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F
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Fc重组载体经工程菌表达获得的融合蛋白,命名为Ii
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key
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F
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Fc融合蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述Ii
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key
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F
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Fc重组载体由NDV F蛋白上三个主要抗原表位片段拼接后再与鸡IgY Fc、Ii
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key分别串联获得,Ii
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key
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F
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Fc重组载体的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;所述NDV F蛋白为新城疫病毒细胞膜上的表面糖蛋白,所述三个主要抗原表位片段分别位于NDV F蛋白第72、161和343片段处,氨基酸序列分别如SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5所示。2.如权利要求1所述的一种增强新城疫病毒免疫效果的抗原,其特征在于,所述NDV F蛋白上三个主要抗原表位片段拼接后产物为抗原表位组合肽,其氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。3.一种如权利要求1所述的增强新城疫病毒免疫效果的抗原的制备方法,包括以下步骤:S1.酶切获得鸡的IgY Fc基因以及NDV F蛋白的三个主要抗原表位片段,将NDV F蛋白的三个主要抗原表位片段连接形成抗原表位组合肽,抗原表位组合肽命名为F片段,将所述F片段分别与IgY Fc、恒定链功能性片段Ii
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key串联获得目的基因片段;S2.目的基因片段连接到pCold
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TF原核表达载体上后,将Ii
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key
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F
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Fc重组载体转化进感受态细胞BL21中,利用感受态细胞表达Ii
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key
‑
F
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Fc融合蛋白,该Ii
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key
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F
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Fc融合蛋白为增强新城疫病毒免疫效果的抗原。4.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述步骤S1中,提取鸡巨噬细胞RNA,反转录获得cDNA,以cFc
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F/cFc
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R为引物,扩增IgY Fc基因;以pcDNA3
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F质粒为模板,分别以引物对NDV
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F
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F1/NDV
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F
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R1、NDV
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F
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F2/NDV
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F
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R2、NDV
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F
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F3/NDV
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F
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R3扩增含有NDV主要抗原表位的第72、161和343基因片段,最后以前3个PCR产物为模板,引物对NDV
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F
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F/NDV
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F
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R扩增抗原表位组合肽;所述cFc
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F/cFc
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R序列如SEQ ID NO.7/SEQ ID NO.8所示,所述NDV
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F
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F1/NDV
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F
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...
【专利技术属性】
技术研发人员:许发芝,孙菁,鲁吉楠,于倩影,王锦斌,朱恩宇,刘雪兰,
申请(专利权)人:安徽农业大学,
类型:发明
国别省市:
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