一种用于真菌性角膜炎初期诊断的试剂盒及其制备方法技术

一种用于真菌性角膜炎初期诊断的试剂盒及其制备方法，该试剂盒包括基于检测(1

【技术实现步骤摘要】
一种用于真菌性角膜炎初期诊断的试剂盒及其制备方法


[0001]本专利技术涉及医用诊断试剂技术，特别是涉及一种用于真菌性角膜炎初期诊断的试剂盒及其制备方法。

技术介绍

[0002]真菌性角膜炎是一种严重的角膜感染，致盲率高。据统计，我国每年有100,365例真菌性角膜炎患者，在西北地区的发病率为1.3例/10万人年，东南地区发病率为15.2例/10万人年。在我国病原微生物感染引起的角膜炎病例中，真菌感染占比高于45％，且其发病率有上升的趋势。
[0003]目前真菌性角膜炎的检测手段主要有真菌培养、涂片镜检和角膜激光共聚焦显微镜这三种。真菌培养被认为是真菌性角膜炎诊断的金标准，然而这一过程通常需要5天以上，可能会造成诊断延误，加大后续治疗难度，甚至致盲，不适用于真菌性角膜炎的早期诊断；直接显微镜镜检的真菌菌丝检出率为90.8％，是一种准确、快速的真菌性角膜炎的早期诊断方式，但其依赖于医生取角膜病灶刮片的经验和技巧，且为有创性操作，存在进一步破坏角膜组织甚至致使角膜穿孔的风险；角膜激光共聚焦显微镜检查价格昂贵，通常只有三甲医院具有相应的检查条件，且可能出现假阳性和假阴性的情况。
[0004]真菌性角膜炎与植物性外伤史密切相关，多发于西北部及农村地区，且51.7％的患者是农民工。由于经济条件以及高发地域医疗资源的限制，上述诊断方式存在一定的局限性。因此需要一种操作便捷、诊断迅速、准确率高且低成本的早期筛查手段。
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葡聚糖是绝大多数真菌细胞壁的特有成分，可作为抗原成分进行检测。目前已有研究表明，泪液中(1
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葡聚糖浓度与真菌性角膜炎病情有直接相关关系，且其对真菌性角膜炎诊断有很高的敏感性、特异性、阳性和阴性预测值。此外其阳性结果的出现通常比临床症状和影像学诊断的结果早4天左右，可作为真菌性角膜炎的早期标志物。因此，通过检测泪液样本中(1
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葡聚糖，可以在早期判断眼角部位有无深部真菌感染。
[0006]目前针对(1
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葡聚糖的检测手段主要有基于G试验以及基于ELISA的两种方法，操作较为复杂、实验条件要求高，检测环境大都集中在专业的实验室中，且目前存在的检测方法的样本对象主要为血清。此外，针对泪液中(1
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葡聚糖的检测仅在科研领域进行了可行性的验证，目前尚未有针对泪液样本中(1
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葡聚糖的成熟检测手段。结合真菌性角膜炎的发病特征和诊断应用场景，因此需要一种针对泪液样本中(1
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葡聚糖的快速、准确、便捷、无创的低成本检测手段。
[0007]需要说明的是，在上述
技术介绍
部分公开的信息仅用于对本申请的背景的理解，因此可以包括不构成对本领域普通技术人员已知的现有技术的信息。

技术实现思路

[0008]本专利技术的主要目的在于克服上述
技术介绍
的缺陷，提供一种诊断快速、操作便捷、
准确度高、低成本的真菌性角膜炎初期诊断试剂盒。
[0009]为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0010]一种用于真菌性角膜炎初期诊断的试剂盒，包括基于检测(1
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葡聚糖的免疫层析试纸，所述免疫层析试纸包括胶体金试剂垫、检测线和质控线，所述胶体金试剂垫含有胶体金颗粒标记的第一种动物(1
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葡聚糖单克隆抗体，所述检测线含有第二种动物(1
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葡聚糖单克隆抗体，所述质控线42含有IgG抗体；其中，所述第一种动物(1
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葡聚糖单克隆抗体能够与(1
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葡聚糖结合形成抗原抗体复合物，所述第二种动物(1
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葡聚糖单克隆抗体能够与所述抗原抗体复合物结合形成抗体
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抗原
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抗体夹心复合物。
[0011]进一步地：
[0012]所述第一种动物(1
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葡聚糖单克隆抗体为鼠抗(1
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葡聚糖单克隆抗体为兔抗(1
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葡聚糖单克隆抗体。
[0013]所述质控线含有羊抗鼠IgG抗体。
[0014]还包括样本垫、载体膜和吸水垫，所述样本垫连接所述胶体金试剂垫，所述胶体金试剂垫通过所述载体膜连接所述吸水垫，所述检测线和所述质控线设置在所述载体膜上。
[0015]所述载体膜为纤维素膜。
[0016]还包括底板和粘胶层，所述样本垫、所述胶体金试剂垫、所述载体膜和所述吸水垫通过所述粘胶层设置在所述底板上。
[0017]所述底板为聚苯乙烯底板。
[0018]所述样本垫为玻璃纤维膜。
[0019]还包括泪液采集装置，所述泪液采集装置为单独的泪液采集毛细管或泪液采集试纸，优选地，所述泪液采集毛细管包括一端开口的毛细管和封闭连接在所述毛细管的另一端的可按压软质气泡；或者，所述泪液采集装置为集成在所述免疫层析试纸上的前端采集试纸。
[0020]一种制备所述的试剂盒的方法，包括：以(1
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葡聚糖为抗原进行动物细胞免疫；使用被免疫动物的细胞制备杂交瘤细胞；对被免疫动物接种杂交瘤细胞，从被免疫动物体内获得杂交瘤细胞分泌的(1
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葡聚糖单克隆抗体；将所获得的(1
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于真菌性角膜炎初期诊断的试剂盒，其特征在于，包括基于检测(1
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葡聚糖的免疫层析试纸，所述免疫层析试纸包括胶体金试剂垫、检测线和质控线，所述胶体金试剂垫含有胶体金颗粒标记的第一种动物(1
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葡聚糖单克隆抗体，所述检测线含有第二种动物(1
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D葡聚糖单克隆抗体，所述质控线含有IgG抗体；其中，所述第一种动物(1
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葡聚糖单克隆抗体能够与(1
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葡聚糖结合形成抗原抗体复合物，所述第二种动物(1
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葡聚糖单克隆抗体能够与所述抗原抗体复合物结合形成抗体
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抗原
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抗体夹心复合物。2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述第一种动物(1
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葡聚糖单克隆抗体为鼠抗(1
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葡聚糖单克隆抗体，所述IgG抗体为羊抗鼠IgG抗体。3.如权利要求1或2所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：武一恒，范梓欣，黎明，
申请(专利权)人：深圳市定视生物医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：