一种新型可降解泌尿系组织工程替代物的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种新型可降解泌尿系组织工程支架材料的制备方法，包括负载左氧氟沙星壳聚糖的制备，可降解组织工程支架材料的制备；本发明专利技术的有益效果在于，本发明专利技术将左氧氟沙星负载于壳聚糖当中，增强其抗菌作用，有助于预防组织工程支架材料植入后伤口感染的问题。本发明专利技术以负载左氧氟沙星的壳聚糖支架作为基底，并将PLGA以及Ⅰ型胶原作为支架涂层，保证了组织工程支架材料整体的生物相容性以及降解性能；此外，本发明专利技术的组织工程支架材料呈现立体三维网状结构，有助于细胞及新生血管的长入，并且材料各组分间相辅相成共同发挥促进伤口愈合的目的，使之成为一种具有良好生物相容性、降解性、抗菌性并兼备一定机械强度的优秀组织工程支架材料。组织工程支架材料。

【技术实现步骤摘要】
一种新型可降解泌尿系组织工程替代物的制备方法


[0001]本专利技术涉及复合材料制备
，具体为一种新型可降解泌尿系组织工程替代物的制备方法。

技术介绍

[0002]外伤、肿瘤、先天畸形等一系列因素都可能导致泌尿系统组织的结构和功能缺失，往往需要通过手术进行修复和重建。泌尿系统修复重建手术不同于毁损性手术，它操作难度大、风险高、成功率低、并发症发生率高。此外，对于一些组织缺失严重的患者，还需要进一步通过移植物来进行组织修复。临床常用的泌尿系统修复移植物一般来源于自体组织以及组织工程学替代物等。优秀组织工程替代物需要具备良好的生物相容性和可降解性，同时要具备良好的力学性能。用于泌尿系替代的组织工程材料还需具备一定的疏水性，防止术后尿液外渗。
[0003]壳聚糖分布范围广，储量丰富，并具有良好的组织相容性及生物降解性。由壳聚糖所构建的支架材料具有相对规律的三维多孔结构，孔隙间相互贯通，有利于细胞迁移和微血管植入。将壳聚糖与左氧氟沙星偶联，可增强壳聚糖的抗菌能力，降低感染的发生。聚乳酸
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聚乙醇酸(PLGA)作为一种可完全降解且降解速率可控的功能性生物高分子有机化合物，具有良好的机械性能及疏水特性，被广泛的应用于医用功能性材料的制备。中国专利CN107441557B公开了一种以猪小肠黏膜下层、壳聚糖等为主要原料合成的一种可用于泌尿系统缺损重建的组织工程支架材料。中国专利CN109847101A公开了一种以聚乳酸和明胶原料合成的一种新型的组织工程尿道支架。本专利技术以偶联左氧氟沙星的壳聚糖作为基本支架，并将PLGA作为基本涂层，增强材料的韧性以及疏水性能，最后将具备修复性能的胶原蛋白均匀涂抹于支架材料的表面，构建出一种兼顾抗菌性能和机械性能的可完全降解型泌尿系组织工程替代物。

技术实现思路

[0004]1.技术方案
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种新型可降解泌尿系组织工程替代物的制备方法，包括如下步骤：
[0006]步骤1，制备负载左氧氟沙星的壳聚糖；
[0007]步骤1.1，用浓度为2％乙酸溶液配置浓度为0.5mg/L的壳聚糖溶液，并用氢氧化钠调节至合适PH值；
[0008]步骤1.2，将0.1mol/L的左氧氟沙星与1.0mol/L的1
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乙基
‑
(3
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二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)以合适摩尔比进行活化；
[0009]步骤1.3，将1.0ml 0.5mg/L的壳聚糖加入活化的左氧氟沙星溶液中在适宜温度下搅拌反应2小时；
[0010]步骤1.4，反应结束后将反应液进行透析脱盐、冷冻干燥得到负载左氧氟沙星的壳
聚糖固体；
[0011]步骤2，可降解泌尿系组织工程替代物的制备；
[0012]步骤2.1，将步骤1中所得负载左氧氟沙星的壳聚糖固体加蒸馏水配置成4％溶液，然后将其倒入模具中，
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20℃冷藏过夜，然后将其置于冷冻干燥机中真空干燥24h，得到负载左氧氟沙星的壳聚糖模型样品；
[0013]步骤2.2，将0.5g PLGA溶解于适量氯仿中，使之完全溶解；
[0014]步骤2.3，将步骤2.1中所得到的样品完全浸没于步骤2.2中所得到的PLGA溶液当中，然后取出置于层流工作台中风干；
[0015]步骤2.4，将步骤2.3中晾干的样品在常温下放入20g/L的胶原溶液中，浸泡30min，然后再次置于层流工作台常温条件下风干；
[0016]步骤2.5，将步骤2.4风干的样品在戊二醛溶液中保持2h，取出后用蒸馏水洗涤三遍，
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20℃冷藏过夜，然后将其置于冷冻干燥机中真空干燥24h得到可降解泌尿系组织工程替代物。
[0017]上述的可降解泌尿系组织工程替代物方法，其中，所述步骤1.1中的调节的PH值为5。
[0018]上述的可降解泌尿系组织工程替代物方法，其中，所述步骤1.2中左氧氟沙星与EDC的摩尔比为1：1。
[0019]上述的可降解泌尿系组织工程替代物方法，其中，所述步骤1.3中反应的合适温度为60℃。
[0020]上述的可降解泌尿系组织工程替代物方法，其中，所述步骤2.2中PLGA是由50％乳酸和50％羟基乙酸聚合而成。
[0021]上述的可降解泌尿系组织工程替代物方法，其中，所述步骤2.2中0.5gPLGA溶解于5ml氯仿当中。
[0022]上述的可降解泌尿系组织工程替代物方法，其中，所述步骤2.3中层流工作台风干的温度为40℃。
[0023]上述的可降解泌尿系组织工程替代物方法，其中，所述步骤2.4中所用胶原为Ⅰ型胶原。
[0024]上述的可降解泌尿系组织工程替代物方法，其中，所述步骤2.5中戊二醛浓度为1％。
[0025]2有益效果
[0026]综上所述，本专利技术的有益效果在于：
[0027](1)本专利技术将左氧氟沙星负载壳聚糖上，增加了其抗菌作用，有效预防组织工程替代物植入后伤口感染问题。本专利技术将负载左氧氟沙星的壳聚糖作为支架，并以PLGA以及Ⅰ型胶原作为支架涂层，保证了复合材料的整体的生物相容性、疏水性能及降解特性。
[0028](2)本专利技术的泌尿系组织工程替代物具有良好的机械强度和多孔疏松结构，各组分间相辅相成发挥促进伤口愈合的功效，弥补了单一材料性能上的不足，使之成为一种具有良好生物相容性、降解性、抗菌并具有机械强度的优秀组织工程材料。
具体实施方式
[0029]下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0030]一种新型可降解泌尿系组织工程替代物的制备方法，包括如下步骤：
[0031]步骤1，制备负载左氧氟沙星的壳聚糖；
[0032]步骤1.1，用浓度为2％乙酸溶液配置浓度为0.5mg/L的壳聚糖溶液，并用氢氧化钠调节至合适PH值，将其置于4℃冰箱冷藏备用；
[0033]步骤1.2，将0.1mol/L的左氧氟沙星溶液，在搅拌的条件下加入1.0mol/L的1
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乙基
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(3
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二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)以合适摩尔比进行活化，搅拌转速为500rpm/min，反应温度为室温；
[0034]步骤1.3，将1.0ml 0.5mg/L的壳聚糖加入活化的左氧氟沙星溶液中在适宜温度下搅拌反应2小时，搅拌转述为500rpm/min；
[0035]步骤1.4，反应结束后将反应液用透析袋脱盐24h，然后液氮冷冻后放入真空干燥机中干燥24h得到负载左氧氟沙星的壳聚糖固体；
[0036]步骤2，可降解泌尿系组织工程替代物的制备；
[0037]步骤2.1，将步骤1中所得负载左氧氟沙本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种新型可降解泌尿系组织工程替代物的制备方法，包括如下步骤：步骤1，制备负载左氧氟沙星的壳聚糖；步骤1.1，用浓度为2％乙酸溶液配置浓度为0.5mg/L的壳聚糖溶液，并用氢氧化钠调节至合适PH值，将其置于4℃冰箱冷藏备用；步骤1.2，将0.1mol/L的左氧氟沙星溶液，在搅拌的条件下加入1.0mol/L的1
‑
乙基
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(3
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二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)以合适摩尔比进行活化，搅拌转速为500rpm/min，反应温度为室温；步骤1.3，将1.0ml 0.5mg/L的壳聚糖加入活化的左氧氟沙星溶液中在适宜温度下搅拌反应2小时，搅拌转述为500rpm/min；步骤1.4，反应结束后将反应液用透析袋脱盐24h，然后液氮冷冻后放入真空干燥机中干燥24h得到负载左氧氟沙星的壳聚糖固体；步骤2，可降解泌尿系组织工程替代物的制备；步骤2.1，将步骤1中所得负载左氧氟沙星的壳聚糖固体加蒸馏水配置成4％溶液，然后将其倒入直径为2cm，厚度为0.2cm的模具中，在
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20℃的条件下冷藏过夜，然后将其置于冷冻干燥机中真空干燥24h，得到负载左氧氟沙星的壳聚糖模型样品；步骤2.2，将0.5g PLGA溶解于适量氯仿中，不断搅拌，搅拌转速为300rpm/min，使之完全溶解；步骤2.3，将步骤2.1中所得到的样品完全浸没于步骤2.2中所得到的PLGA溶液当中，然后取出置于层流工作台中风干备用；步骤2.4，将步骤2.3中晾干的样品在常温...

【专利技术属性】
技术研发人员：马佩芬，胡敬龙，赵光辉，王志平，李孟芸，李丹茜，赵寒，李玲艳，
申请(专利权)人：兰州大学，
类型：发明
国别省市：