【技术实现步骤摘要】
一种制备凝血酶的方法
[0001]本专利技术属于生化制药领域，涉及一种制备凝血酶的方法。
技术介绍
[0002]动物血液是用于生产包括凝血酶在内的诸多生物制品的重要原料。凝血酶是一种重要的细胞外胰丝氨酸蛋白酶，其由两条肽链组成，以二硫键相连，是机体凝血系统中的重要组成部分。
[0003]由于凝血酶制品是从动物血液提取制备而得的多组分生化药品，存在动物源性病毒污染的潜在隐患，例如，猪血中常见的病毒包括伪狂犬病毒、水疱性口炎病毒、猪脑心肌炎病毒和猪细小病毒等。为了提高产品的安全性，有必要开展凝血酶产品的病毒灭活工艺研究。
[0004]目前常用的病毒去除/灭活方法有S/D处理法、干热法、紫外线照射法、膜过滤法。S/D处理法中引入了化学物质(S/D试剂)，使后续处理变的更加复杂；与之相比较，膜过滤法、干热法、紫外线照射法需购买相关设备，增加生产步骤，加大生产成本。
[0005]鉴于此，有必要开发简便易行、无引入外源物质和/或病毒的风险、安全且成本可控的制备凝血酶的方法。
技术实现思路
[000...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种制备凝血酶的方法，其包括以下步骤：采用二乙基氨基乙基葡聚糖处理血浆，经洗涤洗脱后获得凝血酶原液，然后对所述凝血酶原液进行后处理，获得凝血酶；所述血浆与所述二乙基氨基乙基葡聚糖的重量比为0.5～1kg:1～3g。2.根据权利要求1所述的方法，其中，采用所述二乙基氨基乙基葡聚糖处理所述血浆包括以下步骤：将血浆的温度控制在15℃～30℃，将血浆的pH调节至6.9～7.5，添加所述二乙基氨基乙基葡聚糖，搅拌40～50分钟，静置20～40分钟；优选地，所述搅拌速度为30rpm～90rpm。3.根据权利要求2所述的方法，其中，采用饱和柠檬酸三钠溶液和/或饱和碳酸氢钠溶液调节血浆的pH；优选地，采用饱和柠檬酸三钠溶液调节血浆的pH。4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中，所述洗涤洗脱包括以下步骤：将经所述二乙基氨基乙基葡聚糖处理的血浆与包含所述二乙基氨基乙基葡聚糖的沉淀物分离，以第一溶液洗涤包含所述二乙基氨基乙基葡聚糖的沉淀物一次或多次，弃去洗涤液；以及以第二溶液洗脱包含所述二乙基氨基乙基葡聚糖的沉淀物一次或多次，收集洗脱液。5.根据权利要求4所述的方法，其中，血浆与所述第一溶液的重量/体积比为1kg:150～200mL；优选地，所述洗涤包括用所述第一溶液浸泡包含所述二乙基氨基乙基葡聚糖的沉淀物20～40分钟，弃去洗涤液。6.根据权利要求4所述的方法，其中，血浆与所述第二溶液的重量/体积...
【专利技术属性】
技术研发人员：孙志翀，朱振涛，孙丽，曹思瑶，王雪，王欣，
申请(专利权)人：长春雷允上药业有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。