电化学发光化合物、其制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种电化学发光化合物、其制备方法及其应用，所述电化学发光化合物的结构式为：其中，n为100～200，R1、R2、R3和R4均选自Y基团和氢基团中的一种，且R1、R2、R3和R4中至少有一个为Y基团。所述电化学发光化合物的制备方法，包括以下步骤：将含铱络合物、N，N

【技术实现步骤摘要】
电化学发光化合物、其制备方法及其应用


[0001]本专利技术是关于检测
，特别是关于一种电化学发光化合物、其制备方法及其应用。

技术介绍

[0002]盐酸四环素作为一种广谱抗生素，对许多致命细菌感染有明显的治疗效果，同时价格低，因此被广泛应用。然而，由于四环素的过度滥用，会导致四环素在各种食品的残留量日益增加，目前在蜂蜜和牛奶等食品中已发现四环素残留，长期食用残留过多的食品会对人体健康造成严重损害，例如肝脏损害，四环素抗性和影响骨骼发育等。同时四环素极易溶于水，其对水体也会造成严重污染，最终通过食物链富集对人体造成更大的危害。构建灵敏快速的四环素检测方法对于食品安全和环境安全至关重要。传统的四环素检测方法包括有高效液相色谱、液相色谱质谱等，然而这些方法需要大型的仪器，价格昂贵。
[0003]因此构建一种的经济、省时、特异性强的四环素残留检测方法很有必要。
[0004]公开于该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种电化学发光化合物，其能够用于制备铱ECL试剂，并应用于检测四环素。
[0006]为实现上述目的，本专利技术的实施例提供了一种电化学发光化合物，其结构式为：
[0007][0008]其中，n为100～200，R1、R2、R3和R4均选自Y基团和氢基团中的一种，且R1、R2、R3和R4中至少有一个为Y基团，所述Y基团具有以下任意一种结构式：
[0009][0010][0011][0012]本专利技术的实施例还提供了一种如上述的电化学发光化合物的制备方法，包括以下步骤：
[0013]将含铱络合物、N，N
‑
二异丙基乙胺、N，N，N'，N'
‑
四甲基
‑
O
‑
(N
‑
琥珀酰亚胺)脲四氟硼酸盐溶解于N，N
‑
二甲基甲酰胺中，混匀；
[0014]加入聚乙烯亚胺溶液，进行酰胺反应，分离，得到所述电化学发光化合物。
[0015]在本专利技术的一个或多个实施方式中，所述含铱络合物为双齿配体化合物，其结构
式为
[0016]其中，M为铱，C^N二齿配体为第一配体，N^N为第二配体，X
‑
为六氟磷酸根；
[0017]所述第一配体具有以下任意一种结构式：
[0018][0019]所述第二配体具有以下任意一种结构式：
[0020][0021]本专利技术的实施例提供了一种如上述的电化学发光化合物于制备铱ECL试剂、以及于检测四环素中的应用。
[0022]本专利技术的实施例提供了一种铱ECL试剂，包括缓冲液以及溶解于所述缓冲液中的如上述的电化学发光化合物。
[0023]本专利技术的实施例提供了一种检测四环素的方法，包括以下步骤：
[0024]制备铱ECL试剂，所述铱ECL试剂包括缓冲液以及溶解于所述缓冲液中的如上述的电化学发光化合物；
[0025]建立电化学适体传感器，所述电化学适体传感器包括以工作电极，Ag/AgCl为参比电极，铂丝电极为对电极的三电极体系以及所述铱ECL试剂，其中，所述工作电极为表面负载适配体的玻碳电极，所述适配体上修饰有二茂铁，其中，所述适配体能够与四环素结合并从所述玻碳电极上分离；
[0026]建立电化学适体传感器的发光强度与四环素浓度的线性回归方程，所述电化学适体传感器包括所述铱ECL试剂和三电极体系；
[0027]将所述工作电极置于含四环素的待测溶液中，孵育后取出，冲洗，将所述工作电极对应的三电极体系置于所述铱ECL试剂中，测试得到电化学适体传感器的检测发光强度，根据所述线性回归方程和电化学适体传感器的检测发光强度，确定待测溶液中四环素的浓度。
[0028]在本专利技术的一个或多个实施方式中，建立电化学适体传感器的发光强度与四环素浓度的线性回归方程的步骤包括：
[0029]获得多组电化学适体传感器；
[0030]将一组所述三电极体系置于一个所述铱ECL试剂中，测试得到电化学适体传感器的空白发光强度；
[0031]配置不同浓度的四环素标准溶液，将其余所述电化学适体传感器中的所述工作电极分别插入不同浓度的四环素标准溶液中，孵育后取出，冲洗，再将多个所述工作电极对应的三电极体系分别置于对应的所述电化学适体传感器的铱ECL试剂中，测试得到多组电化学适体传感器的标准发光强度；
[0032]根据电化学适体传感器的空白发光强度和多组电化学适体传感器的标准发光强度，获得电化学适体传感器的发光强度与四环素浓度的线性回归方程。
[0033]在本专利技术的一个或多个实施方式中，工作电极的制备步骤包括：
[0034]将玻碳电极表面接枝羧酸分子层；
[0035]接枝有羧酸分子层的玻碳电极浸入在含有cDNA，1
‑
乙基
‑
(3
‑
二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺和N
‑
羟基琥珀酰亚胺的Tris
‑
HCl中进行酰胺化反应，反应后取出并冲洗；
[0036]浸入含适配体的Tris
‑
HCl中进行DNA杂交，取出，冲洗，干燥，得到工作电极。
[0037]在本专利技术的一个或多个实施方式中，所述cDNA的碱基序列如SEQ ID NO.1所示的碱基序列，适配体的碱基序列为如SEQ ID NO.2所示的碱基序列。
[0038]在本专利技术的一个或多个实施方式中，将玻碳电极表面接枝羧酸分子层的步骤包括：
[0039]将NaNO3和4
‑
ABA(4
‑
氨基苯甲酸)溶解于HCl溶液中，在
‑
3～40℃黑暗条件下搅拌3～60min，以产生重氮阳离子；
[0040]在扫描电位为+0.6V～
‑
0.6V(vs Ag/AgCl)的条件下，以50mV/s的扫描速率对玻碳电极进行循环伏安扫描，得到电化学接枝羧酸分子层的玻碳电极。
[0041]与现有技术相比，根据本专利技术实施方式的电化学发光化合物，可以作为ECL活性材料来制备铱ECL试剂，进而构建电化学适体传感器，电化学适体传感器可以用于检测四环素
浓度；本专利技术的电化学发光化合物一方面提高含铱络合物的水溶性，另一方面本专利技术将PEI与发光物质共价偶联形成自增强ECL体系，由于PEI的富胺特性，丰富的铱(III)金属配合物可以固定在PEI的分子链上，从而增强了Ir
‑
PEI(本专利技术的电化学发光化合物)的发光强度。由于分子内的电子转移路径更短，能量损失更小，因此分子内的ECL反应比分子间反应更有效，可以显著提高ECL的效率。本专利技术电化学发光化合物应用的电化学发光检测方法，具有简单灵敏的优点，避免了在测试溶液中添加任何共反应物进行信号放大的过程。本专利技术的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种电化学发光化合物，其特征在于，其结构式为：其中，n为100～200，R1、R2、R3和R4均选自Y基团和氢基团中的一种，且R1、R2、R3和R4中至少有一个为Y基团，所述Y基团具有以下任意一种结构式：
2.一种如权利要求1所述的电化学发光化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将含铱络合物、N，N
‑
二异丙基乙胺、N，N，N'，N'
‑
四甲基
‑
O
‑
(N
‑
琥珀酰亚胺)脲四氟硼酸盐溶解于N，N
‑
二甲基甲酰胺中，混匀；加入聚乙烯亚胺溶液，进行酰胺反应，分离，得到所述电化学发光化合物。3.如权利要求2所述的电化学发光化合物的制备方法，其特征在于，所述含铱络合物为双齿配体化合物，其结构式为其中，M为铱，C^N二齿配体为第一配体，N^N为第二配体，X
‑
为六氟磷酸根；所述第一配体具有以下任意一种结构式：
所述第二配体具有以下任意一种结构式：所述第二配体具有以下任意一种结构式：4.一种如权利要求1所述的电化学发光化合物于制备铱ECL试剂、以及于检测四环素中的应用。5.一种铱ECL试剂，其特征在于，包括缓冲液以及溶解于所述缓冲液中的如权利要求1所述的电化学发光化合物。6.一种检测四环素的方法，其特征在于，包括以下步骤：制备铱ECL试剂，所述铱ECL试剂包括缓溶液以及溶解于所述缓溶液中的如权利要求1所述的电化学发光化合物；
建立电化学适体传感器，所述电化学适体传感器包括以工作电极，Ag/AgCl为参比电极，铂丝电极为对电极的三电极体系以及所述铱ECL试剂，其中，所述工作电极为表面负载适配体的玻碳电极，所述适配体上修饰有二茂铁，其中，所述适配体能够与四环素结合并从所述玻碳电极上分离；建立电化学适体传感器的发光强度与四环素浓度的线性回归方程，所述电化学适体传感器包括所述铱ECL试剂和三电极体系；将所述工作电极置于含四环素的待测溶液中，孵育后取出，冲洗，将所述工作电极对应的三电极体系置于所述铱ECL试剂中，测试得到电化学适体传感...

【专利技术属性】
技术研发人员：周宇扬，董建华，毛子旺，
申请(专利权)人：苏州科技大学，
类型：发明
国别省市：