本发明专利技术提供了一种三维二硫化钼片状复合纳米材料及其制备方法和在免疫层析中的应用，属于纳米材料生物检测技术领域。本发明专利技术以MoS2纳米片作为内层基底，利用聚乙烯亚胺的层层自组装负载两层金纳米粒子，提供可控的SERS热点；从结构上看，MoS2纳米片具有大表面积、可以提供更多的反应位点，从而提高比色能力和SERS活性；两层致密的AuNPs，增强比色能力的同时提供了大量SERS热点；该材料具有良好的稳定性、分散性、优异的SERS性能和比色能力，明显优于传统的SERS标签，可实现在复杂实际样本中稳定、灵敏的检测目标分析物，具有极大的应用潜力，可以代替传统的免疫层析检测方法，满足不同情况下的检测需求。同情况下的检测需求。同情况下的检测需求。
【技术实现步骤摘要】
一种三维二硫化钼片状复合纳米材料及其制备方法和在免疫层析中的应用
[0001]本专利技术涉及纳米材料生物检测
，特别涉及一种三维二硫化钼片状复合纳米材料及其制备方法和在免疫层析中的应用。
技术介绍
[0002]免疫层析(immunochromatographic assay，ICA)以其快速、简便、结构简单、成本低等优点，已成为最有潜力的现场快速检测方法之一，被广泛应用于生物标志物诊断、传染病病原筛查、食品安全和环境监测等。传统的ICA采用比色标签(如金纳米颗粒、乳胶微球等)作为报告分子，通过试纸条检测线上的颜色变化进行定性或半定量分析，但普遍存在灵敏度低、稳定性差、无法准确定量等问题。因此，迫切需要开发新型的纳米信号标签来提升免疫层析的性能。
技术实现思路
[0003]有鉴于此，本专利技术目的在于提供一种三维二硫化钼片状复合纳米材料及其制备方法和在免疫层析中的应用，本专利技术提供的三维二硫化钼片状复合纳米材料具有极强的比色
‑
SERS双信号和稳定的检测能力。
[0004]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0005]本专利技术提供了一种三维二硫化钼片状复合纳米材料，包括二维MoS2内层和包裹在所述二维MoS2内层表面的两层金纳米粒子壳层，单层金纳米粒子壳层包括聚乙烯亚胺层和分布在所述聚乙烯亚胺层表面的金纳米粒子。
[0006]优选的，所述二维MoS2内层的片径为400～800nm；
[0007]单层聚乙烯亚胺层的厚度为1～10nm；
[0008]所述金纳米粒子的粒径为20～40nm。
[0009]本专利技术提供了上述三维二硫化钼片状复合纳米材料的制备方法，包括以下步骤：
[0010](1)提供MoS2二维纳米片分散液；
[0011](2)将所述MoS2二维纳米片分散液与第一聚乙烯亚胺水溶液超声混合，得到MoS2@PEI纳米片；
[0012](3)将所述MoS2@PEI纳米片与第一胶体金溶液超声混合，得到MoS2@Au纳米片；
[0013](4)将所述MoS2@Au片状复合纳米颗粒与第二聚乙烯亚胺水溶液超声混合，得到MoS2@Au@PEI纳米片；
[0014](5)将所述MoS2@Au@PEI纳米片与第二胶体金溶液超声混合，得到三维二硫化钼片状复合纳米材料。
[0015]优选的，所述第一聚乙烯亚胺水溶液、第二聚酰亚胺水溶液的浓度独立为0.1～5mg/mL；
[0016]所述MoS2二维纳米片与第一聚乙烯亚胺、第二聚乙烯亚胺的质量比为100:1～10:
1～10；
[0017]所述MoS2二维纳米片与第一胶体金、第二胶体金的质量比为1:10～30:10～30。
[0018]本专利技术提供了上述三维二硫化钼片状复合纳米材料在非诊断目的免疫层析分析检测中的应用。
[0019]本专利技术提供了一种三维二硫化钼片状复合纳米材料SERS免疫标签，包括上述三维二硫化钼片状复合纳米材料，与所述三维二硫化钼片状复合纳米材料化学偶联的拉曼分子，以及与所述拉曼报告分子化学偶联的病毒抗体；
[0020]所述拉曼报告分子为5,5
′‑
二硫代双(二硝基苯甲酸)。
[0021]优选的，所述病毒抗体为猴痘病毒抗体。
[0022]本专利技术提供了上述三维二硫化钼片状复合纳米材料SERS免疫标签的制备方法，包括以下步骤：
[0023]将所述三维二硫化钼片状复合纳米材料与拉曼报告分子超声混合，得到MoS2@Au
‑
Au
‑
DTNB复合纳米片；
[0024]将所述MoS2@Au
‑
Au
‑
DTNB复合纳米片与羧基活化剂混合，进行羧基活化，得到活化羧基的MoS2@Au
‑
Au
‑
DTNB复合纳米片；
[0025]将所述活化羧基的MoS2@Au
‑
Au
‑
DTNB复合纳米片与病毒抗体混合，进行孵育，封闭未结合位点，得到三维二硫化钼片状复合纳米材料SERS免疫标签。
[0026]本专利技术提供了一种猴痘病毒检测试纸，包括硝酸纤维素膜、结合垫、样品垫、吸水垫和底板，其特征在于，所述硝酸纤维素膜设有T线和C线，所述T线表面包被有猴痘病毒捕获抗体，所述C线表面包被有山羊抗小鼠抗体；
[0027]所述结合垫表面包被有上述三维二硫化钼片状复合纳米材料SERS免疫标签，所述三维二硫化钼片状复合纳米材料SERS免疫标签中的病毒抗体为猴痘病毒抗体。
[0028]本专利技术提供了一种非诊断目的的猴痘病毒比色
‑
SERS双信号模式检测方法，包括以下步骤：
[0029]将待测样品与缓冲溶液混合，得到待测溶液；
[0030]将所述待测溶液加至猴痘病毒检测试纸的样品垫上，静置后观察T线的颜色，将T线显色深浅与预定的比色卡比较颜色，获得待测样品中猴痘病毒的含量；所述比色卡为不同浓度猴痘病毒蛋白检测试纸T线上的比色图像；
[0031]或者，将所述待测溶液加至测试试纸的样品垫上，静置后测试T线的拉曼信号强度，根据所述拉曼信号强度和预定的标准曲线获得待测样品中猴痘病毒的含量；所述标准曲线为猴痘病毒含量与拉曼信号强度的线性关系曲线。
[0032]本专利技术提供了一种三维二硫化钼片状复合纳米材料(简写为MoS2@Au
‑
Au)，包括二维MoS2内层和包裹在所述二维MoS2内层表面的两层金纳米粒子壳层，单层金纳米粒子壳层包括聚乙烯亚胺层和分布在所述聚乙烯亚胺层表面的金纳米粒子。二硫化钼(MoS2)纳米片是典型的二维膜状过渡金属硫族化合物，具有独特的物理和化学性质，包括较强的催化活性、优秀的比色能力、巨大的比表面积、高带隙可调性和优异的分散性。重要的是，二硫化钼纳米结构显示出特有的表面增强拉曼散射(SERS)化学增强效应，可显著提高其表面贵金属的SERS活性。本专利技术以MoS2纳米片作为内层基底，利用聚乙烯亚胺(PEI)的层层自组装负载两层金纳米粒子(AuNPs)，提供可控的SERS热点；从结构上看，MoS2纳米片具有大表面积、可
以提供更多的反应位点，从而提高比色能力和SERS活性；两层致密的AuNPs，增强比色能力的同时提供了大量SERS热点；该材料具有良好的稳定性、分散性、优异的SERS性能和比色能力，明显优于传统的SERS标签，可实现在复杂实际样本中稳定、灵敏的检测目标分析物，具有极大的应用潜力，可以代替传统的免疫层析检测方法，满足不同情况下的检测需求。
[0033]本专利技术提供了上述三维二硫化钼片状复合纳米材料的制备方法，本专利技术利用PEI层层自组装法制备三维二硫化钼片状复合纳米材料，制备方法简单，可实现批量生产。
[0034]本专利技术提供了上述三维二硫化钼片状复合纳米材料在非诊断目的免疫层析分析检测中的应用。本专利技术提供的三维二硫化钼片状复合纳米材料具有广阔的应用前景，本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种三维二硫化钼片状复合纳米材料，包括二维MoS2内层和包裹在所述二维MoS2内层表面的两层金纳米粒子壳层，单层金纳米粒子壳层包括聚乙烯亚胺层和分布在所述聚乙烯亚胺层表面的金纳米粒子。2.根据权利要求1所述的三维二硫化钼片状复合纳米材料，其特征在于，所述二维MoS2内层的片径为400～800nm；单层聚乙烯亚胺层的厚度为1～10nm；所述金纳米粒子的粒径为20～40nm。3.权利要求1或2所述的三维二硫化钼片状复合纳米材料的制备方法，包括以下步骤：(1)提供MoS2二维纳米片分散液；(2)将所述MoS2二维纳米片分散液与第一聚乙烯亚胺水溶液超声混合，得到MoS2@PEI纳米片；(3)将所述MoS2@PEI纳米片与第一胶体金溶液超声混合，得到MoS2@Au纳米片；(4)将所述MoS2@Au片状复合纳米颗粒与第二聚乙烯亚胺水溶液超声混合，得到MoS2@Au@PEI纳米片；(5)将所述MoS2@Au@PEI纳米片与第二胶体金溶液超声混合，得到三维二硫化钼片状复合纳米材料。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述第一聚乙烯亚胺水溶液、第二聚酰亚胺水溶液的浓度独立为0.1～5mg/mL；所述MoS2二维纳米片与第一聚乙烯亚胺、第二聚乙烯亚胺的质量比为100:1～10:1～10；所述MoS2二维纳米片与第一胶体金、第二胶体金的质量比为1:10～30:10～30。5.权利要求1～2任意一项所述的三维二硫化钼片状复合纳米材料或权利要求3～4任意一项所述制备方法制备得到的三维二硫化钼片状复合纳米材料在非诊断目的免疫层析分析检测中的应用。6.一种三维二硫化钼片状复合纳米材料SERS免疫标签，包括权利要求1～2任意一项所述的三维二硫化钼片状复合纳米材料或权利要求3～4任意一项所述制备方法制备得到的三维二硫化钼片状复合纳米材料，与所述三维二硫化钼片状复合纳米材料化学偶联的拉曼分子，以及与所述拉曼报告分子化学偶联的病毒抗体；所述拉曼报告分子为5,5
′‑
二硫代双(二硝基苯甲酸)。7...
【专利技术属性】
技术研发人员：顾兵，汪崇文，于晴，郑帅，田本顺，
申请(专利权)人：广东省人民医院，
类型：发明
国别省市：
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