替尔泊肽的制备方法技术

本发明专利技术公开了替尔泊肽的制备方法，属于多肽合成技术领域，具体涉及先由氨基酸试剂制备得到替尔泊肽线性肽；然后制备得到替尔泊肽衍生侧链；将替尔泊肽衍生侧链与活性试剂结合制成替尔泊肽衍生侧链中间体，替尔泊肽衍生侧链中间体包括苯并三氮唑基侧链活性物或吲哚基侧链活性物，苯并三氮唑基侧链活性物由苯并三氮唑与替尔泊肽衍生侧链反应制成，吲哚基侧链活性物由吲哚与替尔泊肽衍生侧链反应制成；通过N

【技术实现步骤摘要】
替尔泊肽的制备方法


[0001]本专利技术属于多肽合成
，具体涉及替尔泊肽的制备方法。

技术介绍

[0002]临床研究显示，替尔泊肽在显著改善2型糖尿病患者的血糖水平时，还能够降低患者体重。6个月数据显示，替尔泊肽能将2型糖尿病HbA1c水平平均降低2.4％，体重减重11.3kg（12.7％）。替尔泊肽在保持疗效的同时，降低了患者胃肠道不良事件发生率。具体数据为HbA1c水平降低2％，体重减轻5.7kg。双效GIP和GLP
‑
1受体激动剂替尔泊肽（LY3298176）随机、平行、开放标签、52周III期SURPASS
‑
4（NCT03730662）临床试验的顶线结果数据显示，在心血管（CV）风险升高的2型糖尿病成人患者中，与滴定甘精胰岛素相比，全部3种剂量替尔泊肽在降低血糖和体重方面均显示出优越性：治疗52周，采用疗效估量统计学分析方法，最高剂量替尔泊肽（15mg，每周1次）将血糖水平从基线降低2.58％、将体重从基线降低11.7公斤（25.8磅，13.0％），而滴定甘精胰岛素将血糖水平从基线降低1.44％、体重较基线增加1.9公斤（4.2磅，2.2％）。在这一患者群体中，替尔泊肽的总体安全性与胰高血糖素样肽
‑
1受体激动剂类别一致。胃肠道副作用是最常见的不良反应，通常发生在剂量递增期，然后随着时间的推移而减少。替尔泊肽除对2型糖尿病和肥胖症疗效显著外，对非酒精性脂肪性肝炎也显示出一定的治疗潜力。
[0003]替尔泊肽的制备方法的研究有重要的意义。<br/>
技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种可用于替尔泊肽制备、收率高、纯度佳的制备方法。
[0005]本专利技术为实现上述目的所采取的技术方案为：替尔泊肽的制备方法，包括：将替尔泊肽线性肽、替尔泊肽衍生侧链中间体和功能剂混合于溶剂中，然后经反应制备得到替尔泊肽；替尔泊肽衍生侧链中间体具有替尔泊肽衍生侧链及与其键合的活性试剂；替尔泊肽线性肽的肽链如下所示：Dde
‑
Tyr
‑
Aib
‑
Glu
‑
Gly
‑
Thr
‑
Phe
‑
Thr
‑
Ser
‑
Asp
‑
Tyr
‑
Ser
‑
Ile
‑
Aib
‑
Leu
‑
Asp
‑
Lys(Dde)
‑
Ile
‑
Ala
‑
Gln
‑
Lys
‑
Ala
‑
Phe
‑
Val
‑
Gln
‑
Trp
‑
Leu
‑
Ile
‑
Ala
‑
Gly
‑
Gly
‑
Pro
‑
Ser
‑
Ser
‑
Gly
‑
Ala
‑
Pro
‑
Pro
‑
Pro
‑
Ser
‑
NH2；替尔泊肽衍生侧链的链序如下：OtBu
‑
Ico
‑
Glu(AEEA
‑
AEEA
‑
OH)
‑
OtBu。本专利技术通过氨基酸试剂首先制备得到替尔泊肽线性肽，然后制备替尔泊肽衍生侧链，由替尔泊肽衍生侧链与活性试剂反应制备得到替尔泊肽衍生侧链中间体，在由替尔泊肽线性肽与替尔泊肽衍生侧链中间体进行反应制备替尔泊肽时，发现在功能剂作用下，可以提高替尔泊肽的收率和纯度。
[0006]优选地，溶剂为DCM、THF、乙酸乙酯、乙腈、DMF、DMSO、NMP、水、丙酮、二甲基乙酰胺DMAC和六甲基磷酰胺HMP中至少1种；或，溶剂为DMF、DMSO、DMAC、HMP、乙腈
‑
水和丙酮
‑
水中
至少1种。
[0007]优选地，功能剂包括有机碱、无机碱和咪唑盐中至少1种，咪唑盐由N
‑
甲基咪唑与1
‑
氯
‑4‑
甲氧基丁烷反应制成；有机碱包括三乙胺（TEA）、二乙胺、N
‑
甲基吗啉（NMM）和N,N
‑
二异丙基乙胺（DIEA）中至少1种；无机碱包括醋酸钠、醋酸钾、磷酸钠、磷酸氢二钠、磷酸钾、磷酸氢二钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾和氢氧化钠中至少1种。本专利技术中的功能剂可选自上述成分，其中，咪唑盐同样可以提高替尔泊肽的收率和纯度；本专利技术中替尔泊肽衍生侧链中间体包括苯并三氮唑基侧链活性物和吲哚基侧链活性物，咪唑盐中含有甲基基团及4
‑
甲氧基丁烷基基团，在甲基基团和4
‑
甲氧基丁烷基基团及咪唑结构的作用下，提高替尔泊肽的收率和纯度，通过实验探索，发现咪唑盐与含有吲哚基团的吲哚基侧链活性物的联合使用，具优于咪唑盐与苯并三氮唑基侧链活性物的联合使用的效果。
[0008]优选地，有机碱包括三乙胺（TEA）、N
‑
甲基吗啉（NMM）和N,N
‑
二异丙基乙胺（DIEA）中至少1种；无机碱包括碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸氢钾、碳酸钾和氢氧化钠中至少1种。
[0009]优选地，替尔泊肽的制备中，反应温度为
‑
20至60℃；或，替尔泊肽的制备中，反应温度为0至40℃。
[0010]优选地，替尔泊肽衍生侧链中间体的使用量为替尔泊肽线性肽的20
‑
40wt%；或，功能剂的使用量为替尔泊肽线性肽的5
‑
20wt%。
[0011]优选地，功能剂为咪唑盐和N
‑
氨基甲酰马来酸；咪唑盐由N
‑
甲基咪唑与1
‑
氯
‑4‑
甲氧基丁烷反应制成。本专利技术中，将咪唑盐和N
‑
氨基甲酰马来酸结合使用后，在包括苯并三氮唑基侧链活性物或吲哚基侧链活性物的替尔泊肽衍生侧链中间体制备替尔泊肽的方法中，可以提高替尔泊肽的收率和纯度。
[0012]更优选地，N
‑
氨基甲酰马来酸的使用量为替尔泊肽线性肽的2
‑
6wt%。
[0013]优选地，替尔泊肽衍生侧链中间体包括苯并三氮唑基侧链活性物和吲哚基侧链活性物中至少1种，苯并三氮唑基侧链活性物由替尔泊肽衍生侧链与苯并三氮唑键合形成，吲哚基侧链活性物由替尔泊肽衍生侧链与吲哚键合形成；或，活性试剂为苯并三氮唑或吲哚。
[0014]本专利技术公开了包括咪唑盐的功能剂在制备替尔泊肽中的用途，咪唑盐由N
‑
甲基咪唑与1
‑
氯
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.替尔泊肽的制备方法，包括：将替尔泊肽线性肽、替尔泊肽衍生侧链中间体和功能剂混合于溶剂中，然后经反应制备得到替尔泊肽；替尔泊肽衍生侧链中间体具有替尔泊肽衍生侧链及与其键合的活性试剂；所述替尔泊肽线性肽的肽链如下所示：Dde
‑
Tyr
‑
Aib
‑
Glu
‑
Gly
‑
Thr
‑
Phe
‑
Thr
‑
Ser
‑
Asp
‑
Tyr
‑
Ser
‑
Ile
‑
Aib
‑
Leu
‑
Asp
‑
Lys(Dde)
‑
Ile
‑
Ala
‑
Gln
‑
Lys
‑
Ala
‑
Phe
‑
Val
‑
Gln
‑
Trp
‑
Leu
‑
Ile
‑
Ala
‑
Gly
‑
Gly
‑
Pro
‑
Ser
‑
Ser
‑
Gly
‑
Ala
‑
Pro
‑
Pro
‑
Pro
‑
Ser
‑
NH2；所述替尔泊肽衍生侧链的链序如下：OtBu
‑
Ico
‑
Glu(AEEA
‑
AEEA
‑
OH)
‑
OtBu。2.根据权利要求1所述的替尔泊肽的制备方法，其特征是：所述溶剂为DCM、THF、乙酸乙酯、乙腈、DMF、DMSO、NMP、水、丙酮、二甲基乙酰胺DMAC和六甲基磷酰胺HMP...

【专利技术属性】
技术研发人员：王辉平，史晓海，王佳炜，邢海英，
申请(专利权)人：杭州湃肽生化科技有限公司，
类型：发明
国别省市：