miR-221-3p的应用制造技术

本发明专利技术属于临床医学领域，具体涉及miR

【技术实现步骤摘要】
miR
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221
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3p的应用


[0001]本专利技术属于临床医学领域，具体涉及miR
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221
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3p的应用。

技术介绍

[0002]急性心肌梗死（STEMI）是指多数在冠状动脉粥样硬化斑块固有的狭窄基础上，斑块不稳定而出现破裂或糜烂，继发血栓形成，导致相应的冠脉完全闭塞，引起心肌持续性缺血缺氧的心脏疾病。目前冠脉溶栓、介入治疗、冠状动脉搭桥术等方法可以有效的开通堵塞的主要血管、挽救心肌细胞。但是由于存在开通血管的时间延迟、缺血再灌注损伤、及一些微血管病灶等原因的干扰，仍有部分心肌细胞因缺血缺氧而坏死。虽然心外膜冠状动脉闭塞后的侧支血流可能足以满足一些患者在休息时的心肌需求，但普遍的观点是，侧支循环通常不足以满足运动时的心肌需求，并且可能无法防止冠状动脉闭塞期间的心肌缺血。
[0003]血管生成，不同于侧枝循环形成，由缺血诱导的新毛细血管的生长。在心肌梗死模型中诱导冠状动脉血管生成被认为是改善心肌缺血和心室重构病理改变的有效方法。因此，探讨急性心肌梗死后血管新生的作用机制及调控靶点已经成为急性心肌梗死期间改善心肌缺血和挽救濒死心肌的一个至关重要的问题。
[0004]血管新生是从已有的血管管中萌发的血管生成，是一个动态的过程，由血管新生因子和血管稳定因子之间的微妙平衡调节，最终导致血管网络的增加、稳定或减少。在促血管生成信号的吸引下，血管内皮细胞具有运动性、侵袭性和突出的丝状伪足的能力。内皮细胞的迁移和增殖导致新生血管芽的形成。组成发芽血管的尖端细胞，像生长锥一样，通过感知环境线索来引导血管，并且是由血管生成因子（VEGF）诱导的内皮细胞的转分化表型。作为芽的主导细胞，“尖细胞”的特征是迁移行为和富含VEGFR
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2的动态丝状足，这将芽向这个VEGF梯度方向生长。尖端细胞之后的细胞，称为“柄细胞”，柄细胞不发育丝状足，但其增殖和拉伸支持芽的扩张。当两个尖端细胞相遇时，芽融合并形成一个血管腔。然后通过内皮细胞与周细胞和平滑肌细胞（SMC）的相互作用来稳定新生的毛细血管。
[0005]MicroRNA是一类长度约为22个核苷酸的内源性单链RNA小分子，虽然不能进一步翻译成蛋白质，但可以特异性结合靶mRNA，从而间接抑制转录后基因的表达。microRNA在血管生成中的作用已被广泛研究，如miR
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320，miR92a，miR
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128，miR
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126，miR
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210和miR
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214。miR
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221也是miRNAs的成员，其基因位于x染色体上。在多次编辑修饰和dicer酶切割后，形成成熟体，其3p末端是miR
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3p。miR
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3p参与多种疾病的病理生理过程，如肿瘤、炎症、动脉粥样硬化、心脏纤维化等。研究表明，缺氧诱导因子
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1α（HIF
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1α）是人脐静脉内皮细胞（HUVECs）中miR
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3p的下游靶基因之一，而miR
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3p通过靶向HIF
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1α抑制内皮细胞的血管生成。血栓软骨素
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2（THBS2）也是miR
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3p的一个下游靶点，而miR
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3p通过靶向THBS220促进滋养细胞的生长、侵袭和迁移。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供miR
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3p的新的用途。
[0007]本专利技术的第一目的在于提供含有miR
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3p的生物材料在制备靶向Ang
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2药物方面的应用。
[0008]血管生成素2（Ang
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2）属于生长因子家族成员，在血管生成过程充当重要作用。Ang
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2 破坏内皮细胞与血管周细胞之间的连接，与血管不稳定有关。在血管生成小鼠模型中，Ang
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2 抗体不仅影响视网膜中央血管的重塑，它还影响了正在生长的视网膜血管网络边缘的尖端细胞出芽。Ang
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2 抗体处理的小鼠幼鼠中的视网膜的尖端细胞数量显著减少。同样，Ang
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2 也被鉴定为尖端细胞的标记基因。
[0009]具体的，miR
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3p靶向Ang
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2，抑制心脏微血管内皮细胞向尖端细胞转化，尤其是在缺氧条件下，因而当生物材料中含有使miR
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3p在机体内表达量下调的试剂时，避免或减少了抑制血管新生的损伤情况发生。
[0010]缺氧条件指当对数生长期的HCMECs达到70%
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80%密度时，将细胞培养瓶置于密封的塑料容器中，但将瓶口松开以保证气体交换。然后用诱导细胞缺氧的混合气体(94% N2+5% CO2+1% O2)填充容器，并持续充气10分钟。然后将塑料容器密封(不拧紧瓶口)并放置在37℃的培养箱中。本专利技术可采用的缺氧条件就是指在1% O2的条件下培养HCMECs。
[0011]现实中，缺氧条件一般是指组织的氧供应不足或者氧利用障碍时导致组织的代谢功能以及形态发生异常的一种病理性过程。心脏是人体耗氧量大的器官之一，氧气是心肌细胞活动的基本物质，通过血液运输到心肌细胞中，一旦发生心肌缺血或者更为严重的心肌梗死，就会立刻导致缺氧，继而心肌细胞代谢不平衡，细胞活力下降，心脏功能严重障碍。
[0012]所述药物为预防和/或治疗心脏疾病的药物，所述心脏疾病选自心肌梗死、心肌缺血损伤、冠心病和心肌纤维化中的一种或多种。
[0013]其中，所述生物材料包括表达盒、表达载体、宿主菌或宿主细胞。
[0014]所述miR
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3p的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，SEQ ID NO.1：5'
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AGCUACAUUGUCUGCUGGGUUUC
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3'。
[0015]本专利技术的再一目的在于提供一种药物，所述药物含有miR
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3p的生物材料。
[0016]优选的，所述药物为治疗心肌梗死的药物，并且所述药物靶向Ang
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2。更为优选的，所述药物为治疗急性心肌梗死的药物，尤其是治疗缺血性心肌病的药物。
[0017]根据本专利技术具体实施方式的上述药物，其所用的所述生物材料含有以下任一或多种：（1）含有miR
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3p的表达盒、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.含有miR
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3p的生物材料在制备靶向Ang
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2药物方面的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述生物材料包括表达盒、表达载体、宿主菌或宿主细胞。3. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述miR
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3p的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。4.一种药物，其特征在于，所述药物含有miR
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3p的生物材料。5.根据权利要求4所述的药物，其特征在于，所述药物为治疗心肌梗死的药物。6.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑振中，杨鹏，唐江峰，
申请(专利权)人：南昌市高新区人民医院南昌大学第一附属医院高新医院，
类型：发明
国别省市：