ZNF92基因在制备抗胶质母细胞瘤药物中的应用制造技术

本发明专利技术属于胶质母细胞瘤治疗领域，具体涉及ZNF92基因在制备抗胶质母细胞瘤药物中的应用。本发明专利技术探索靶向ZNF92抑制脑胶质瘤上皮间质转化的治疗新策略，构建了颅内原位动物模型，验证ZNF92转录激活HSPA5逃逸铁死亡进而调控脑胶质瘤上皮间质转化的生物学过程。本发明专利技术阐明ZNF92介导铁死亡事件在脑胶质瘤上皮间质转化过程中的重要调控作用，发现脑胶质瘤恶性进展新机制，挖掘潜在治疗靶点，探寻GBM有效治疗策略。疗策略。疗策略。

【技术实现步骤摘要】
ZNF92基因在制备抗胶质母细胞瘤药物中的应用


[0001]本专利技术属于胶质母细胞瘤治疗领域，具体涉及ZNF92基因在制备抗胶质母细胞瘤药物中的应用。

技术介绍

[0002]铁死亡(ferroptosis)是一种新定义的细胞死亡形式，在形态学、生物学和遗传学上均不同于凋亡、坏死和自噬，而是由铁依赖的脂质过氧化和致死性活性氧(reactive oxygen species,ROS)的积累，诱导的调节性细胞死亡。最近的研究表明，铁死亡参与调节多种癌症的侵袭、转移及治疗抵抗。
[0003]胶质母细胞瘤(Glioblastoma,GBM)是最常见的原发性中枢神经系统恶性肿瘤。因其具有高度侵袭等特性，导致患者预后极差。即便给予规范化治疗，但GBM的中位生存期仅为确诊后的15个月左右。虽然近年应用不断创新的生命科学理论与技术研究脑胶质瘤发生、发展及治疗抵抗的机制，但仍然没有发现有效的治疗胶质母细胞患者的药物。归其根源主要是其发病机制仍不清晰。皮间质转化(epithelial
‑
mesenchymal transition，EMT)是胶质瘤侵袭加剧的关键事件，阻断EMT的发生是临床治疗的关键。然而，EMT的调控机制不详。因此，探索GBM恶性进展机制，对GBM的临床靶向治疗尤其重要。

技术实现思路

[0004]本专利技术提供ZNF92基因或含有ZNF92基因的生物材料在制备抗胶质母细胞瘤药物中的应用。
[0005]ZNF92(锌指蛋白92)是一种蛋白质编码基因，具有DNA结合转录因子活性。现有技术关于ZNF92的研究相对较少。目前已知ZNF92可能与双相情感障碍疾病的发生相关，及可能成为与胆固醇稳态和他汀类药物反应有关的新候选基因。仅仅在乳腺癌中发现ZNF92相对正常组织过表达，而乳腺癌与胶质母细胞瘤的形成基质并不相同。
[0006]本专利技术基于组学数据及胶质母细胞瘤的预后信息分析，发现ZNF92在GBM四个分子亚型中的间质型GBM中过表达，且ZNF92高表达的患者预后更差。同时，发现胶质瘤中存在的高ROS状态可促进ZNF92进入细胞核。
[0007]此外，转录组的功能富集分析发现ZNF92与铁离子稳态、细胞粘附以及迁移等生物学过程有关，参与谷胱甘肽(glutathione，GSH)代谢、GPX4和JAK/STAT等信号传导通路。敲低ZNF92可抑制的HSPA5及GPX4活性，同时发现间充质标记物水平下调及上皮标记物水平上调。综上，本专利技术结合国内外最新研究进展及申请人前期研究结果，指出ZNF92可能参与HSPA5介导铁死亡事件，进而调控胶质瘤EMT的生物学过程，进而提出“ZNF92转录激活HSPA5逃逸铁死亡参与调控脑胶质瘤上皮间质转化的机制”。
[0008]根据本专利技术具体实施方式的应用，所述生物材料为表达盒、表达载体、质粒、宿主菌或宿主细胞。
[0009]本专利技术还提供ZNF92基因的表达抑制剂在制备胶质母细胞瘤药物中的应用。
[0010]本专利技术还提供抑制ZNF92基因的表达量上调的方法在制备胶质母细胞瘤药物中的应用。
[0011]根据本专利技术具体实施方式的ZNF92基因的表达抑制剂在制备胶质母细胞瘤药物中的应用，所述表达抑制剂为以下任一：
[0012](1)特异性靶向ZNF92基因的反义寡核苷酸；
[0013](2)特异性靶向ZNF92基因的siRNA或shRNA。
[0014]本专利技术还提供一种抗胶质母细胞瘤的药物，所述药物含有抑制ZNF92基因表达的生物材料。
[0015]其中，所述生物材料包括表达盒、表达载体、质粒、宿主菌或宿主细胞。
[0016]本专利技术的有益效果：
[0017]1.本专利技术利用基因转染等技术探究ZNF92表达水平与脑胶质瘤细胞上皮间质转化及恶性表型的关系；
[0018]2.明确了ZNF92对HSPA5基因转录的调控作用；
[0019]3.解析HSPA5介导GPX4逃逸铁死亡参与脑胶质瘤上皮间质转化的过程；
[0020]4.探索靶向ZNF92抑制脑胶质瘤上皮间质转化的治疗新策略；
[0021]5.本专利技术构建颅内原位动物模型，验证ZNF92转录激活HSPA5逃逸铁死亡进而调控脑胶质瘤上皮间质转化的生物学过程。本专利技术阐明ZNF92介导铁死亡事件在脑胶质瘤上皮间质转化过程中的重要调控作用，发现脑胶质瘤恶性进展新机制，挖掘潜在治疗靶点，探寻GBM有效治疗策略。
附图说明
[0022]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0023]图1显示体外实验中，敲减ZNF92后抑制细胞迁移及细胞数量的情况，其中，A和C显示划痕实验结果，B和D显示Transwell实验结果；
[0024]图2显示裸鼠原位移植肿瘤模型中敲除ZNF92的肿瘤变化情况；其中，
[0025]A：肿瘤植入小鼠后第7、14和28天小鼠颅内肿瘤大小的代表图像；
[0026]B：Scramble，siZNF92
‑
1和siZNF92
‑
2处理组的这些生物发光图像的定量分析，数据显示为平均值
±
S.D.n＝6，**P<0.01，与对照Student'S t
‑
检验相比；
[0027]C：小鼠在不同组中的总体存活率，数据显示为平均值
±
S.D。与对照ANOVA测试相比，n＝6，NSP>0.05，**P<0.01；
[0028]D：HE(
×
4放大倍数，比例尺＝1000μm)和HE染色在肿瘤局部区域放大(
×
40放大倍数，比例尺＝200μm)中的代表性图像，三行HE样品是来自不同处理组的重复数据。左边图像的轮廓部分被定义为右边的高倍率部分。
具体实施方式
[0029]为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术的技术方案进行
详细的描述。显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施方式，都属于本专利技术所保护的范围。
[0030]实施例1体外实验
[0031](1)原代肿瘤细胞培养：
[0032]将脑胶质瘤肿瘤组织置于含DMEM/F12培养基的50ml离心管中进行转运，后用MACS漩涡器离碎组织块，制成细胞悬液，置于干细胞培养基(以DMEM/F12培养基、EGF(20μg/L)、bFGF(20μg/L)以及B27(1:50)配置)中培养，待细胞球出现后，低速500g/min离心，去除杂质和细胞碎片等，取沉淀轻轻吹打成单细胞后，继续本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.ZNF92基因或含有ZNF92基因的生物材料在制备抗胶质母细胞瘤药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述生物材料为表达盒、表达载体、质粒、宿主菌或宿主细胞。3.ZNF92基因的表达抑制剂在制备胶质母细胞瘤药物中的应用。4.抑制ZNF92基因的表达量上调的方法在制备胶质母细胞瘤药物中的应用。5.根据权利要求3所述的ZNF92基因的表达抑制剂在制备胶质母...

【专利技术属性】
技术研发人员：于万里，陶震楠，张国华，江志群，
申请(专利权)人：南昌市高新区人民医院南昌大学第一附属医院高新医院，
类型：发明
国别省市：