一种原位肺结节小鼠模型构建方法技术

本发明专利技术公开了一种原位肺结节小鼠模型构建方法，包括如下步骤：1)将loxp

【技术实现步骤摘要】
一种原位肺结节小鼠模型构建方法


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种原位肺结节小鼠模型的构建方法。

技术介绍

[0002]肺结节定义为通过常规胸部CT平扫或低剂量胸部CT筛查，发现的肺内直径小于3cm的类圆形、局灶性、密度增高的实性或亚实性肺部异常影。目前除了早期外科手术治疗，尚无针对肺结节的药物治疗方法，定期的CT随访不可避免会带来辐射暴露，同时临床上采用的有创肺结节穿刺活检的方法，也会带来一些不必要的术后并发症。在近期一些研究中发现有一部分以惰性生物学为表现的恶性肺结节，具有影像学缓慢进展的特点，尤其在一类以磨玻璃为影像学表现的肺结节中较为常见，给临床肺结节影像学鉴别诊断添加了难度。
[0003]近期，通过大规模回顾性临床样本的对比研究发现，在恶性肺结节中存在一组促癌基因的表达上调，同时合并另一组抑癌基因的表达下调。前者包括Kras基因，后者包括P53、Tgfbr2等基因。目前国际上通过气道滴注带有识别特定基因序列剪切酶活性的腺病毒(AdCre)的方法，可以实现位于特定部位的呼吸道上皮细胞基因编辑功能，例如由Ty本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种原位肺结节小鼠模型构建方法，其特征在于，包括如下步骤：1)将loxp
‑
stop
‑
loxp KrasG12D转基因小鼠与loxp
‑
Tgfbr2
‑
loxp转基因小鼠杂交；2)对由步骤1)获得的F0杂交小鼠或其后代进行气道滴注带有识别特定基因序列剪切酶活性的腺病毒(AdCre)。2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述腺病毒(AdCre)的使用浓度低于109pfu；优选地，所述所述腺病毒(AdCre)的使用浓度为106‑
108pfu；更优选地，所述所述腺病毒(AdCre)的使用浓度为107‑5×
107pfu。3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述腺病毒(AdCre)的使用浓度为2.5
×
107pfu。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1)前采用SEQ ID NO：1
‑
2或SEQ ID NO：3
‑
4的引物验证loxp
‑
st...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨达伟，谢林杉，宋元林，白春学，王向东，孙梦婷，尹俊，向萌，周建，
申请(专利权)人：复旦大学附属中山医院，
类型：发明
国别省市：