一种改进型肾活检石蜡切片抗原修复方法及抗原修复液技术

本发明专利技术提供了一种抗原修复液，由TBS缓冲液50‑200ml、胰蛋白酶0.02‑0.3g和无水氯化钙0.01‑0.5g组成。本发明专利技术还提供一种肾活检石蜡切片抗原修复方法，包括采用挥发性有机溶剂对石蜡切片进行脱蜡，水洗获得脱蜡切片，将该脱蜡切片放入抗原修复液中，35‑40℃下处理0.5‑2小时，洗涤后滴加封闭液，35‑40℃保温5‑20分钟。本发明专利技术安全性好，降低容器爆裂、烫伤等实验事故风险；脱片率低，减少组织脱片带来的重复实验、标本损耗；染色效果稳定显著，可重现性好，染色质量高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及肾活检组织切片抗原修复，尤其涉及一种基于酶修复法的改进型肾活检石蜡切片抗原修复方法及抗原修复液。

技术介绍

1、肾组织免疫荧光可使用冰冻切片或石蜡切片，而肾组织免疫组织化学常使用石蜡切片。石蜡切片的优越性在于：可长久保存，多年前的肾活检标本也可进行相关免疫荧光或免疫组织化学染色，用于修正诊断及回顾研究；便于运输，基层单位可将切片运输至上级医院进行诊断及会诊；经甲醛固定，可显示更清晰的组织结构和细胞形态；免疫荧光淬灭时间更长，有利于结果判读。肾组织免疫荧光常使用冰冻组织切片，而冰冻组织的局限性在于：有时没有肾小球，或仅有硬化的肾小球，无法进行诊断；冰冻切片机价格昂贵，基层单位开展困难，且不易保存和运输；冰冻切片有时抗原掩盖，需进一步行石蜡切片抗原修复(antigen retrieval；ar)后暴露抗原决定簇，提高染色阳性率。因此，制备石蜡切片用于肾组织免疫荧光和免疫组织化学染色，对于肾活检组织病理诊断具有重大价值。

2、肾组织石蜡切片制备的固定步骤中，甲醛或多聚甲醛可使组织中的部分抗原发生蛋白交联或封闭，使抗原决定簇表位空间结构发本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种抗原修复液，其特征在于，由TBS缓冲液50-200ml、胰蛋白酶0.02-0.3g和无水氯化钙0.01-0.5g组成。

2.如权利要求1所述的抗原修复液，其特征在于，所述抗原修复液由TBS缓冲液75-150ml、胰蛋白酶0.05-0.2g和无水氯化钙0.05-0.3g组成。

3.如权利要求1所述的抗原修复液，其特征在于，所述抗原修复液由TBS缓冲液90-120ml、胰蛋白酶0.08-0.15g和无水氯化钙0.08-0.15g组成。

4.一种肾活检石蜡切片抗原修复方法，包括如下步骤：

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，在步骤S2...

【技术特征摘要】

1.一种抗原修复液，其特征在于，由tbs缓冲液50-200ml、胰蛋白酶0.02-0.3g和无水氯化钙0.01-0.5g组成。

2.如权利要求1所述的抗原修复液，其特征在于，所述抗原修复液由tbs缓冲液75-150ml、胰蛋白酶0.05-0.2g和无水氯化钙0.05-0.3g组成。

3.如权利要求1所述的抗原修复液，其特征在于，所述抗原修复液由tbs缓冲液90-120ml、胰蛋白酶0.08-0.15g和无水氯化钙0.08-0.15g组成。

4.一种肾活检石蜡切片抗原修复方法，包括如下步...

【专利技术属性】
技术研发人员：李捷，沈子妍，金是，李芳，刘红，丁小强，朱启帆，
申请(专利权)人：复旦大学附属中山医院，
类型：发明
国别省市：