积雪草酸在制备改善蛛网膜下腔出血后早期脑损伤药物中的用途制造技术

本发明专利技术公开了积雪草酸在制备改善蛛网膜下腔出血后早期脑损伤药物中的用途。本发明专利技术通过分子对接技术以及胞内热迁移实验，验证了积雪草酸可与酰基辅酶A氧化酶1相结合，结合高度稳定，胞内热迁移实验结果保持一致。本发明专利技术通过侧脑室注入慢病毒对大鼠转染实验验证了积雪草酸通过调控酰基辅酶A氧化酶1来改善铁死亡。确证了酰基辅酶A氧化酶1是积雪草酸的靶标蛋白，且积雪草酸在蛛网膜下腔出血后通过上调酰基辅酶A氧化酶1的表达来改善神经元的铁死亡，从而有效减轻蛛网膜下腔出血后的早期脑损伤。因此积雪草酸进行药物干预铁死亡的发生为蛛网膜下腔出血后早期脑损伤的治疗提供了一个新的思路。个新的思路。个新的思路。

【技术实现步骤摘要】
积雪草酸在制备改善蛛网膜下腔出血后早期脑损伤药物中的用途


[0001]本专利技术涉及药物
，具体涉及一种积雪草酸在制备改善蛛网膜下腔出血后早期脑损伤药物中的用途。

技术介绍

[0002]脑卒中是一种急性的脑血管疾病，包括缺血性脑卒中和出血性脑卒中两类。出血性脑卒中发病率相较于缺血性脑卒中低，但由于其极差的预后，其死亡率和病残率均高于缺血性脑卒中。蛛网膜下腔出血（Subarachnoid hemorrhage，SAH）是一种由血液直接流入蛛网膜下腔引起的临床综合征，其中80%以上是由破裂的动脉瘤引起。SAH是一种致命的压型。其发病率为2
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22例/100000人，60%的SAH发生在40
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60岁的人群中，导致高死亡率和致残率。早期脑损伤是指SAH后72小时内发生的所有脑损伤，它与氧化应激、神经炎症、神经元死亡、血脑屏障（Blood
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brain barier，BBB）损伤和大脑自动调节功能障碍有关，是导致SAH患者预后不良的主要病理事件之一。如何有效减轻早期脑损伤(Early brain injury，EBI)已成为改善SAH预后的重要目标。因此，提高我们对与早期脑损伤相关的病理生理过程的认识将有助于探索新的治疗措施，改善SAH患者的预后。
[0003]近些年已有报道表明，神经元的铁死亡是SAH后EBI的主要原因之一，但其诱因及发生机制尚不明确。铁死亡（Ferroptosis）是指细胞死亡的一种非凋亡方式，是由大量脂质过氧化介导的膜损伤引起的铁依赖性调节性坏死。其发生的可能机制为（1）谷胱甘肽（GSH）的耗竭和随后的谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）失活以及活性氧（ROS）的积累，（2）转铁蛋白输入或铁过载，以及（3）谷氨酰胺代谢/谷氨酰胺分解。在2021年的一项研究中，通过分别建立体外及体内模型来研究铁死亡在SAH后早期脑损伤中的作用；研究表明，Fer
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1抑制剂通过抑制SAH后的脂质过氧化来减少铁死亡的发生，从而对SAH后的早期脑损伤提供神经保护。由此可见，SAH后急性期的脑神经功能损害似乎是由神经元铁死亡引起的，使用药物逆转SAH引起的神经元铁死亡可能是一种治疗SAH后脑损伤的新的治疗策略。
[0004]积雪草酸（Asiatic acid，AA）是热带植物积雪草（Centella asiatica，CA）中天然存在的熊果烷型五环三萜的苷元，在传统医学中被誉为治疗伤口愈合、神经退行性疾病和癌症的药物，研究表明其在具有多种药理活性，如抗氧化、抗炎、保护肝脏、保护心脏、保护神经、保护胃和抗癌等。积雪草酸具有亲脂性，容易透过BBB，口服后主要在空肠被动扩散，随后在肝脏快速代谢，在血供中吸收迅速，仅需30min即可达到最高血药浓度，静脉注射积雪草酸的半衰期为2.0小时，治疗安全边际宽。Ki Yong Lee等人对永久大脑中动脉栓塞（pMCAO）大鼠采用不同浓度的积雪草酸（50 mg/kg和75 mg/kg）分别在造模前30 min及造模后6 h、9 h、12 h进行静脉注射，结果表明在缺血前后给予积雪草酸均可显著减少梗死体积（呈剂量依赖性）。此外，AA还已被证明对伤口愈合、肝纤维化、痴呆症、高血糖、代谢综合征、肥胖、阿尔茨海默氏症和帕金森氏症等疾病均有治疗作用。AA作为一种传统的药物成分已经进行过许多研究，并被广泛用于各种疾病。然而，在SAH中还没有相关文章报道。因此，AA
在SAH中的作用以及其可能的机制值得进一步探讨。

技术实现思路

[0005]本专利技术探索了积雪草酸在蛛网膜下腔出血中的作用及其机制研究，为蛛网膜下腔出血后的治疗提供新的思路方法。数据分析表明，积雪草酸可通过调控ACOX1改善神经元铁死亡，从而减轻蛛网膜下腔出血后早期脑损伤。
[0006]本专利技术的技术方案是：本专利技术提供了积雪草酸在制备改善蛛网膜下腔出血后早期脑损伤药物中的用途。
[0007]一些实施例中，ACOX1（酰基辅酶A氧化酶1）是积雪草酸的靶标蛋白。
[0008]一些实施例中，积雪草酸通过调控ACOX1改善神经元铁死亡，从而减轻蛛网膜下腔出血后早期脑损伤。
[0009]一些实施例中，积雪草酸通过上调ACOX1的表达，改善神经元的铁死亡，从而减轻蛛网膜下腔出血后的早期脑损伤。
[0010]一些实施例中，积雪草酸通过上调ACOX1的表达减少VLCFA（极长链脂肪酸）的堆积来增加GSH（谷胱甘肽）、GPX4（谷胱甘肽过氧化物酶4）的含量及GPX的活性并且抑制脂质过氧化的发生，从而改善神经元的铁死亡，减轻蛛网膜下腔出血后的早期脑损伤。
[0011]本专利技术探索了积雪草酸在SAH中的作用及其机制研究，为SAH后的治疗提供新的思路方法。本专利技术研究表明：积雪草酸在大鼠SAH后可有效减轻早期脑损伤对神经功能的损害，在SAH后给予积雪草酸可有效逆转神经元死亡，减少铁沉积。本专利技术通过分子对接技术以及胞内热迁移实验，验证了积雪草酸可与酰基辅酶A氧化酶1相结合，结合高度稳定，胞内热迁移实验结果保持一致。本专利技术通过侧脑室注入慢病毒对大鼠转染实验验证了积雪草酸通过调控酰基辅酶A氧化酶1来改善铁死亡。确证了酰基辅酶A氧化酶1是积雪草酸的靶标蛋白，且积雪草酸在蛛网膜下腔出血后通过上调酰基辅酶A氧化酶1的表达来改善神经元的铁死亡，从而有效减轻蛛网膜下腔出血后的早期脑损伤。积雪草酸进行药物干预铁死亡的发生为SAH后的早期脑损伤的治疗提供了一种新型药物治疗思路。
附图说明
[0012]下面结合附图及实施例对本专利技术作进一步描述：图1为sham组和SAH组全脑图片及取材部位示意图；图2为行为学实验时间轴；图3为行为学实验测试积雪草酸对SAH大鼠运动、平衡、感觉等行为学能力的影响（n=12）；各组大鼠的改良加西亚评分（图A）；转轮试验各组大鼠在转轮上持续的时间（图B）；平衡木实验各组大鼠通过木棒至暗室的时间（图C）；平衡木实验各组大鼠在木棒上保持平衡的时间（图D）；所有数据为平均值
±
标准差（Mean
±
SD）描述。*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001；图4为采用Morris水迷宫测试积雪草酸对SAH大鼠学习、记忆等能力的作用，（n=12）；各组大鼠在水池中游行的路径（图A）；实验开始时各组大鼠在水中游行的速度（图B）；各组大鼠在水中寻找到平台所需时间（图C）；各组大鼠在水中寻找到平台所游行的距离（图D）；所有数据为平均值
±
标准差（Mean
±
SD）描述；*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001；
图5积雪草酸在SAH后对大鼠神经元状态以及铁沉积的影响（n=6）；各组大鼠颞底脑组织尼氏染色结果及存活神经元数量统计分析（箭头所标为存活神经元，比例尺=50μm，图A）；各组大鼠颞底脑组织perls染色结果及阳性染色百分比统计分析（箭头所标为铁染色阳性，比例尺=50μm，图B）；*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001；图6为在P本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.积雪草酸在制备改善蛛网膜下腔出血后早期脑损伤药物中的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，积雪草酸可以与酰基辅酶A氧化酶1相互结合作用，酰基辅酶A氧化酶1是积雪草酸的靶标蛋白。3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，积雪草酸通过调控酰基辅酶A氧化酶1改善神经元铁死亡，从而减轻蛛网膜下腔出血后早期脑损伤。4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，积雪...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈罡，李香，胡玉鲲，
申请(专利权)人：陈罡，
类型：发明
国别省市：