一种注射用重组人凝血因子制造技术

本发明专利技术涉及一种注射用重组人凝血因子

【技术实现步骤摘要】
一种注射用重组人凝血因子
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促凝特性的体外检测方法


[0001]本专利技术属于生物分析检测领域，具体涉及一种注射用重组人凝血因子
Ⅸ
促凝特性的体外检测方法。

技术介绍

[0002]B型血友病是一种遗传性X染色体相关疾病，病因主要在于缺乏功能性凝血因子IX而导致凝血功能受损，患者可能会自发出血或受伤后出血。随着时间的推移，关节和肌肉反复出血可导致严重的关节病。同时，由于凝血因子IX的半衰期相对较短，B型血友病患者需要频繁输注凝血因子IX(FIX)以治疗出血或预防出血。
[0003]重组人凝血因子IX部分与人FIX完全一致，在外源性凝血途径中，凝血因子IX(FIX)被激活后，可以进一步与凝血因子FVIIIa结合形成Tenase复合物，激活凝血因子X，随后加速凝血系统酶促反应级联中凝血酶和纤维蛋白的生成。
[0004]人血浆凝血因子IX促凝活性(FIX∶C)的测定常用于凝血异常所致出血性疾病的诊断，在出凝血疾病的诊断中具有重要的意义。目前，临床上比较常用的检测凝血因子
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种注射用重组人凝血因子IX促凝特性的体外检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：向多孔板的孔中加入FIXa溶液、抗凝血酶III
‑
肝素混合溶液，室温下混合反应；继续加入FVIIIa溶液、FX溶液，36
‑
38℃下反应5
‑
6min；然后，加入发色底物溶液；室温、405nm波长条件下测定混合液吸光值OD405；利用吸光值求得ATIII对FIXa的抑制率，完成注射用重组人凝血因子IX促凝特性的体外检测；其中，所述抑制率％＝(OD405
v
―OD405
s
)/(OD405
v
―OD405
b
)
×
100％；OD405
s
：样品处理组的OD值，所述样品处理组按照上述检测步骤进行处理；OD405
v
：溶剂对照组的OD值，所述溶剂对照组相较于样品处理组未进行抗凝血酶III
‑
肝素混合溶液的配制与添加；OD405
b
：空白组的OD值，所述空白组相较于样品处理组未进行FVIIIa溶液、FIXa溶液以及抗凝血酶III
‑
肝素混合溶液的配制与添加。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述FVIIIa溶液的配制工艺为：将1.5
‑
2.5nM的FVIII溶液和3.5
‑
4.5nM的α
‑
凝血酶溶液在室温下孵育5
‑
8min，然后加入7
‑
9nM的水蛭素溶液、45
‑
55μM的脑磷脂溶液，得到所述FVIIIa溶液。3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述FIXa溶液的配制工艺为：将45
‑
55nM的FIX溶液与20
‑
30pM的FXIa溶液在室温孵育12
‑
14h，得...

【专利技术属性】
技术研发人员：王淑荣，董海辉，毛卓，陈春麟，白静，
申请(专利权)人：美迪西普胜医药科技上海有限公司，
类型：发明
国别省市：