ACLY或其编码基因作为靶点在制备防治银屑病药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了ACLY或其编码基因作为靶点在制备防治银屑病药物中的应用，涉及生物医药技术领域，通过研究发现ACLY与银屑病的发展呈正相关，采用适当浓度的ACLY抑制剂制剂治疗咪喹莫特小鼠银屑病模型，能够改善鳞屑和皮损厚度；敲除HEKa细胞中ACLY的表达可以降低银屑病模型中炎症因子的释放。本发明专利技术以ACLY或其编码基因作为干预靶点对防治银屑病作用更加明确，而且安全性良好。而且安全性良好。而且安全性良好。

【技术实现步骤摘要】
ACLY或其编码基因作为靶点在制备防治银屑病药物中的应用


[0001]本专利技术涉及生物医药
，具体涉及ACLY或其编码基因作为靶点在制备防治银屑病药物中的应用。

技术介绍

[0002]银屑病是一种由自身免疫介导的、慢性、全身炎症性皮肤病，以角质形成细胞增生和异常分化、炎症细胞浸润为特征，其发病机制复杂，治疗效果不佳。银屑病的临床特征是境界清楚的红色斑块，上覆银白色鳞屑，长期的疾病发展严重影响了患者的生活质量。典型的银屑病组织病理表现为：表皮角化不全，常伴有角化过度；颗粒层减少或消失，表皮呈杵状增生；真皮乳头上延，真皮乳头上方表皮变薄，毛细血管扩张充血；真皮上部血管周围可见淋巴细胞为主的炎症细胞浸润。角质层内可见中性白细胞聚集，称为Munro微脓肿。
[0003]银屑病临床治疗方法有多种，其治疗药物包括皮质类固醇类、维A酸类、维生素D3衍生物类、钙调神经磷酸酶抑制剂等药物，但由于该病具体的发病机制不清且易复发，目前许多治疗方法只能达到近期效果，不能防止复发。近年来，虽然以TNF
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α及IL
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17抗体为代表的生物制剂逐渐应用于中重度银屑病的临床治疗，并取得了较好的疗效，但生物制剂仍存在部分患者效果不佳、感染风险高、免疫耐受形成、远期肿瘤风险及与单抗相关的银屑病爆发及复发等问题。
[0004]ATP柠檬酸裂解酶（ATP citrate lyase，ACLY）是脂肪酸从头合成（de novo lipogenesis，DNL）途径中的关键性代谢酶，最初是由Couch FJ等人（Couch FJ， Abel KJ，Brody LC et al. Localization of the gene for ATP citrate lyase (ACLY) distal to gastrin(GAS) and proximal to D17S856 on chromosome 17q12
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q21[J]. Genomics，1994，21(2): 444
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6.）于1994年发现，他们将编码ATP柠檬酸裂解酶的基因，命名为ACLY，并在一组人/啮齿动物体细胞杂交体上通过PCR将其定位到人染色体17q12
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q21。
[0005]ACLY作为DNL途径中主要的脂肪生成酶，是一种由1101个氨基酸残基组成的480 kDa胞质同源四聚体，属于酰基辅酶A合酶超家族的成员。ACLY在重要辅因子辅酶A（CoA）、ATP和Mg
2+
的存在下，负责催化柠檬酸盐及CoA生成乙酰辅酶A（Ac
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CoA）和草酰乙酸，是DNL途径中的第一个限速酶，也是将葡萄糖分解代谢与脂肪生成联系起来的关键酶。ACLY的差异性表达与各种慢性炎症性疾病，如神经退行性疾病、炎症性肠病、非酒精性脂肪肝等的发生和进展相关，炎症环境下细胞发生代谢重编程以维持其功能，增加的糖酵解和三羧酸（Tricarboxylic acid，TCA）循环重新分布，上调柠檬酸盐合成，同时代谢酶ACLY被磷酸化激活，其依赖的DNL途径也异常上调。目前，关于ACLY或其编码基因作为靶点在制备防治银屑病药物中的应用尚未见报道。因此，实现ACLY或其编码基因作为药物靶点防治银屑病是本领域技术人员亟需解决的技术问题。

技术实现思路

[0006]本专利技术针对上述问题，提供了ACLY或其编码基因作为靶点在制备防治银屑病药物
中的应用，解决了现有技术中生物制剂在防治银屑病时治疗效果不佳、安全性不足等问题。
[0007]为了实现上述目的，本专利技术所采用的技术方案如下：ACLY或其编码基因作为靶点在制备防治银屑病药物中的应用。
[0008]进一步地，所述的药物是在基因水平和/或蛋白水平以ACLY作为靶点防治银屑病。
[0009]本专利技术还提供了一种用于防治银屑病的药物，其特征在于：所述药物是针对ACLY的抑制剂制剂。
[0010]本专利技术还提供了一种siRNA敲除ACLY的载体在制备防治银屑病药物中的应用。
[0011]与现有技术相比，本专利技术的有益效果：本专利技术通过研究发现ACLY与银屑病的发展呈正相关，采用适当浓度的ACLY抑制剂外涂治疗咪喹莫特小鼠银屑病模型，能够改善鳞屑和皮损厚度，因此提出制备防治银屑病的药物时新的药物作用靶点——ACLY，以ACLY或其编码基因作为干预靶点对防治银屑病作用更加明确，而且安全性良好。
附图说明
[0012]图1为 ACLY抑制剂HC外用治疗咪喹莫特银屑病小鼠的临床照片，其中Ctrl组每天涂抹等剂量的凡士林，IMQ＋HC组每天将42.5mg IMQ与100mg/kg HC混匀后，涂抹在小鼠背部，而IMQ＋NaCl组用IMQ与等体积的生理盐水混匀后涂抹；图2为ACLY抑制剂HC外用治疗咪喹莫特小鼠的PASI评分。其中A为总的PASI评分，B为红斑的PASI评分，C为鳞屑的PASI评分，D为皮肤厚度的PASI评分；图3为人体正常皮肤组织和银屑病皮损组织中ACLY免疫组化图；图4为人体正常皮肤组织和银屑病皮损组织中ACLY Western blotting及其相对表达；图5为银屑病鼠模型的大体观；图6为小鼠正常皮肤组织和银屑病皮损组织中ACLY Western blotting及其相对表达；图7为在HEKa细胞和HaCaT细胞用M5刺激不同时间后，提取细胞总蛋白质，Western blotting测ACLY蛋白的表达情况；图8为在HEKa细胞应用si
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negative和si
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ACLY敲除ACLY后48小时，对细胞增殖活力及周期蛋白表达水平的影响；图9为在HEKa细胞应用ACLY特异性抑制剂HC及SB
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204990抑制ACLY 48小时后，提取细胞总蛋白质，Western blotting测炎症相关NF
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κB信号通路的激活情况；图10为在HEKa细胞中敲低ACLY后，qRT
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PCR测相关炎症因子mRNA表达水平。
具体实施方式
[0013]为了使本专利技术的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
实施例1
[0014]本实施例通过研究发现在银屑病患者皮损和咪喹莫特银屑病小鼠皮损中ACLY表
达升高，应用M5（IL
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17A，IL
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22，IL
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1a，OSM和TNF
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a混合物）刺激HEKa细胞模拟银屑病细胞水平后，ACLY表达升高；这些结果提示ACLY与银屑病的发展呈正相关，下面实施例对本专利技术进一步详细的说明。
[0015]1.ACLY抑制剂对咪喹莫特银屑病小鼠疾病表型影响购买6
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8周BALB/c小鼠，用2%水合氯醛麻醉后，剃去背部毛约2
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2cm大小，咪喹本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.ACLY或其编码基因作为靶点在制备防治银屑病药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的药物是在基因水平和/或蛋白水平以ACLY作为靶点防治...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑焱，王玉倩，黄英剑，唐小燕，白瑞敏，殷婷怡，杜文倩，
申请(专利权)人：北京中科卓明生物医学研究所有限公司，
类型：发明
国别省市：