一种用于心脑血管疾病早期预警及预后的分子标志物制造技术

本发明专利技术公开了一种用于心脑血管疾病早期预警及预后的分子标志物。本发明专利技术提供的心脑血管疾病鉴别标志物为甲基化生物标志物，其用途为如下中的至少一种：辅助诊断心脑血管疾病或在临床发病之前预警心脑血管疾病(如冠心病、脑卒中)、辅助评估心脏损伤和心脑血管预后监控。本发明专利技术揭示了冠心病患者、心脏损伤患者、冠心病复发患者血液中HYAL2基因的低甲基化和脑卒中患者、脑卒中复发患者血液中HYAL2基因的高甲基化现象，且以血液为样本能够在临床发病前预警并区分不同临床特征的心脑血管患者和健康对照、心脏损伤和未出现心脏损伤、不同临床特征的心脑血管疾病复发和非复发，本发明专利技术对提高心脑血管疾病早期诊疗效果和降低死亡率均有重要的科学意义和临床应用价值。均有重要的科学意义和临床应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种用于心脑血管疾病早期预警及预后的分子标志物


[0001]本专利技术涉及生物医学领域，具体涉及一种用于心脑血管疾病早期预警及预后的分子标志物。

技术介绍

[0002]心脑血管疾病是心脏血管和脑血管疾病的统称，泛指由于高脂血症、血液黏稠、动脉粥样硬化、高血压等所导致的心脏、大脑及全身组织发生的缺血性或出血性疾病。心脑血管疾病是一种严重威胁人类，特别是50岁以上中老年人健康的常见病，具有高患病率、高致残率，以及高死亡率的特点。目前，全球每年死于心脑血管疾病的人数高达1500万人。
[0003]冠心病是指由于冠状动脉粥样硬化使管腔狭窄、痉挛或阻塞，导致心肌缺血、缺氧或坏死而引发的心脏病，统称为冠状动脉性心脏病或冠状动脉疾病。根据病变部位、范围和程度等临床特征可以将冠心病分为5种类型：(1)隐匿性或无症状性心肌缺血：无症状，但是在静息、动态或负荷心电图下显示心肌缺血改变，或放射性核素心肌显像提示心肌灌注不足，无组织形态改变；(2)心绞痛：因心肌供血不足引起发作性胸骨后疼痛；(3)心肌梗死：缺血症状严重，由冠状动脉闭塞导致心肌急性缺血坏死；(4)缺血性心肌病：长期慢性心肌缺血或坏死而导致心肌纤维化，表现为心脏增大、心力衰竭和心律失常；(5)猝死：突发心搏骤停引起的死亡，多为缺血心肌局部发生电生理紊乱引起严重心律失常所致。目前冠心病主要诊断方法如下：(1)临床特征：一般结合检查者的病史和身体检查状况，用于初步诊断，但是特异性很低；(2)影像学方法：心电图、超声心动图和冠状动脉血管造影，但是往往受医生经验和仪器设备的影响；(3)目前最常用的冠心病标志物有以下几类：心肌损伤标志物、炎症因子及黏附分子和细胞因子标志物、血浆脂蛋白及载脂蛋白标志物和凝血相关蛋白标志物等。因为某个标志物只反映疾病某个疾病机理，导致这些标志物在临床上并未得到广泛认同。
[0004]脑卒中俗称中风，是一种急性脑血管疾病，包括缺血性脑卒中和出血性脑卒中。缺血性脑卒中占所有脑卒中的60％～70％，主要是由于动脉粥样硬化引起脑部血管狭窄或者闭塞，从而引起脑组织缺血、缺氧，进一步导致局限性脑组织的缺血性坏死或软化，患者多在40岁以上，男性较女性多，严重者可引起死亡。出血性脑卒中分为脑出血和蛛网膜下腔出血，主要是由于长期的高血压、动脉瘤或脑血管先天比较脆弱等原因，导致脑血管破裂出血，这些血液在脑中压迫正常的脑组织，使大脑无法发挥正常功能，也就是常说的“脑溢血”，而且死亡率比较高。目前常使用影像学方法来进行脑卒中的诊断，例如CT和核磁共振检查，CT对于出血性脑卒中的灵敏度较高，但对于缺血性脑卒中的灵敏度却只有16％，由于辐射原因不宜频繁使用；核磁共振检查对缺血性脑卒中的灵敏度高于CT而且没有辐射影响，但其缺点是较低的可行性、实用性和可及性(设备以及训练有素的人员)。
[0005]冠心病和脑卒中都属于心脑血管疾病。大多数冠心病疾病是可预防和治疗的，一般通过普及知识提高意识、避免外源性刺激因素和合理膳食适度运动来进行预防，其治疗效果很大程度上依赖于早期诊断及相应的干预措施。目前，临床上关于冠心病和脑卒中疾
病诊断标志物的灵敏度和特异性很有限，尤其是缺乏早期诊断的标志物，因此更为敏感、特异的早期分子标志物亟待发掘。DNA甲基化是基因上重要的一种化学修饰，影响着基因转录的调控过程和细胞核结构。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是提供一种用于心脑血管疾病早期预警及预后的分子标志物。
[0007]第一方面，本专利技术要求保护一种甲基化生物标志物。
[0008]本专利技术所要求保护的述甲基化生物标志物，其核苷酸序列为HYAL2基因中如下(A1)
‑
(A3)所示片段中的全部或部分：
[0009](A1)SEQ ID No.1所示的DNA片段或与其具有80％以上同一性的DNA片段；
[0010](A2)SEQ ID No.2所示的DNA片段或与其具有80％以上同一性的DNA片段；
[0011](A3)SEQ ID No.3所示的DNA片段或与其具有80％以上同一性的DNA片段。
[0012]所述甲基化标志物包括位于其核苷酸序列上的如下(B1)
‑
(B7)中任一所示CpG位点：
[0013](B1)HYAL2基因中SEQ ID No.1、SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示3个DNA片段中的任意一个或多个CpG位点；
[0014]此处所述“多个CpG位点”的上限为HYAL2基因中SEQ ID No.1至SEQ ID No.3所示3个DNA片段中所有CpG位点。SEQ ID No.1所示的DNA片段中所有CpG位点(见表1)、SEQ ID No.2所示的DNA片段中所有CpG位点(见表2)、SEQ ID No.3所示的DNA片段中所有CpG位点(见表3)。
[0015](B2)HYAL2基因中SEQ ID No.1所示的DNA片段上的所有CpG位点(表1)和SEQ ID No.2所示的DNA片段上的所有CpG位点(表2)；
[0016](B3)HYAL2基因中SEQ ID No.2所示的DNA片段上的所有CpG位点(表2)和SEQ ID No.3所示的DNA片段上的所有CpG位点(表3)；
[0017](B4)HYAL2基因中SEQ ID No.1所示的DNA片段上的所有CpG位点(表1)和SEQ ID No.3所示的DNA片段上的所有CpG位点(表3)；
[0018](B5)HYAL2基因中SEQ ID No.1所示的DNA片段上的所有CpG位点(表1)、SEQ ID No.2所示的DNA片段上的所有CpG位点(表2)和SEQ ID No.3所示的DNA片段上的所有CpG位点(表3)；
[0019](B6)HYAL2基因中SEQ ID No.3所示的DNA片段中的全部CpG位点(表3)或任意10个或任意9个或任意8个或任意7个或任意6个或任意5个或任意4个或任意3个或任意2个或任意1个CpG位点；
[0020](B7)HYAL2基因中SEQ ID No.3所示的DNA片段上如下6项所示CpG位点的全部或任意5项或任意4项或任意3项或任意2项或任意1项：
[0021]第1项：SEQ ID No.3所示的DNA片段自5
’
端第191
‑
192位所示CpG位点(HYAL2_C_6)；
[0022]第2项：SEQ ID No.3所示的DNA片段自5
’
端第200
‑
201位所示CpG位点(HYAL2_C_7)；
[0023]第3项：SEQ ID No.3所示的DNA片段自5
’
端第383
‑
384位所示CpG位点(HYAL2_C_
8)；
[0024]第4项：SEQ ID No.3所示的DNA片段自5
’
端第445
‑
446位所示CpG位点(HYA本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种甲基化生物标志物，其特征在于：所述甲基化生物标志物的核苷酸序列为HYAL2基因中如下(A1)
‑
(A3)所示片段中的全部或部分：(A1)SEQ ID No.1所示的DNA片段或与其具有80％以上同一性的DNA片段；(A2)SEQ ID No.2所示的DNA片段或与其具有80％以上同一性的DNA片段；(A3)SEQ ID No.3所示的DNA片段或与其具有80％以上同一性的DNA片段；所述甲基化标志物包括位于其核苷酸序列上的如下(B1)
‑
(B7)中任一所示CpG位点：(B1)HYAL2基因中SEQ ID No.1、SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示3个DNA片段中的任意一个或多个CpG位点；(B2)HYAL2基因中SEQ ID No.1所示的DNA片段上的所有CpG位点和SEQ ID No.2所示的DNA片段上的所有CpG位点；(B3)HYAL2基因中SEQ ID No.2所示的DNA片段上的所有CpG位点和SEQ ID No.3所示的DNA片段上的所有CpG位点；(B4)HYAL2基因中SEQ ID No.1所示的DNA片段上的所有CpG位点和SEQ ID No.3所示的DNA片段上的所有CpG位点；(B5)HYAL2基因中SEQ ID No.1所示的DNA片段上的所有CpG位点、SEQ ID No.2所示的DNA片段上的所有CpG位点和SEQ ID No.3所示的DNA片段上的所有CpG位点；(B6)HYAL2基因中SEQ ID No.3所示的DNA片段中的全部CpG位点或任意10个或任意9个或任意8个或任意7个或任意6个或任意5个或任意4个或任意3个或任意2个或任意1个CpG位点；(B7)HYAL2基因中SEQ ID No.3所示的DNA片段上如下6项所示CpG位点的全部或任意5项或任意4项或任意3项或任意2项或任意1项：第1项：SEQ ID No.3所示的DNA片段自5
’
端第191
‑
192位所示CpG位点；第2项：SEQ ID No.3所示的DNA片段自5
’
端第200
‑
201位所示CpG位点；第3项：SEQ ID No.3所示的DNA片段自5
’
端第383
‑
384位所示CpG位点；第4项：SEQ ID No.3所示的DNA片段自5
’
端第445
‑
446位所示CpG位点；第5项：SEQ ID No.3所示的DNA片段自5
’
端第470
‑
471位所示CpG位点；第6项：SEQ ID No.3所示的DNA片段自5
’
端第493
‑
494位所示CpG位点；所述甲基化生物标志物的用途为如下中的至少一种：(1)辅助诊断心脑血管疾病或在临床发病之前预警心脑血管疾病；(2)辅助诊断冠心病或在临床发病之前预警冠心病；(3)辅助诊断脑卒中或在临床发病之前预警脑卒中；(4)辅助区分冠心病和脑卒中或在临床发病之前预警并区分冠心病和脑卒中；(5)辅助诊断不同临床特征的冠心病或在临床发病之前预警不同临床特征的冠心病；(6)辅助诊断不同临床特征的脑卒中或在临床发病之前预警不同临床特征的脑卒中；(7)辅助诊断心脏损伤或在临床发病之前预警心脏损伤；(8)辅助进行心脑血管疾病复发监控或在临床发病之前预警心脑血管疾病复发；(9)辅助进行冠心病复发监控或在临床发病之前预警冠心病复发；(10)辅助进行脑卒中复发监控或在临床发病之前预警脑卒中复发；(11)辅助进行不同临床特征的冠心病复发监控或在临床发病之前预警不同临床特征
的冠心病复发；(12)辅助进行不同临床特征的脑卒中复发监控或在临床发病之前预警不同临床特征的脑卒中复发。2.权利要求1所述甲基化生物标志物在制备产品中的应用；所述产品的用途为如下中的至少一种：(1)辅助诊断心脑血管疾病或在临床发病之前预警心脑血管疾病；(2)辅助诊断冠心病或在临床发病之前预警冠心病；(3)辅助诊断脑卒中或在临床发病之前预警脑卒中；(4)辅助区分冠心病和脑卒中或在临床发病之前预警并区分冠心病和脑卒中；(5)辅助诊断不同临床特征的冠心病或在临床发病之前预警不同临床特征的冠心病；(6)辅助诊断不同临床特征的脑卒中或在临床发病之前预警不同临床特征的脑卒中；(7)辅助诊断心脏损伤或在临床发病之前预警心脏损伤；(8)辅助进行心脑血管疾病复发监控或在临床发病之前预警心脑血管疾病复发；(9)辅助进行冠心病复发监控或在临床发病之前预警冠心病复发；(10)辅助进行脑卒中复发监控或在临床发病之前预警脑卒中复发；(11)辅助进行不同临床特征的冠心病复发监控或在临床发病之前预警不同临床特征的冠心病复发；(12)辅助进行不同临床特征的脑卒中复发监控或在临床发病之前预警不同临床特征的脑卒中复发。3.用于检测权利要求1所述甲基化生物标志物的甲基化水平的物质在制备产品中的应用；所述产品的用途为如下中的至少一种：(1)辅助诊断心脑血管疾病或在临床发病之前预警心脑血管疾病；(2)辅助诊断冠心病或在临床发病之前预警冠心病；(3)辅助诊断脑卒中或在临床发病之前预警脑卒中；(4)辅助区分冠心病和脑卒中或在临床发病之前预警并区分冠心病和脑卒中；(5)辅助诊断不同临床特征的冠心病或在临床发病之前预警不同临床特征的冠心病；(6)辅助诊断不同临床特征的脑卒中或在临床发病之前预警不同临床特征的脑卒中；(7)辅助诊断心脏损伤或在临床发病之前预警心脏损伤；(8)辅助进行心脑血管疾病复发监控或在临床发病之前预警心脑血管疾病复发；(9)辅助进行冠心病复发监控或在临床发病之前预警冠心病复发；(10)辅助进行脑卒中复发监控或在临床发病之前预警脑卒中复发；(11)辅助进行不同临床特征的冠心病复发监控或在临床发病之前预警不同临床特征的冠心病复发；(12)辅助进行不同临床特征的脑卒中复发监控或在临床发病之前预警不同临床特征的脑卒中复发。4.用于检测权利要求1所述甲基化生物标志物的甲基化水平的物质和储存有数学模型和/或数学模型使用方法的介质在制备产品中的应用；所述产品的用途为如下中的至少一种：(1)辅助诊断心脑血管疾病或在临床发病之前预警心脑血管疾病；
(2)辅助诊断冠心病或在临床发病之前预警冠心病；(3)辅助诊断脑卒中或在临床发病之前预警脑卒中；(4)辅助区分冠心病和脑卒中或在临床发病之前预警并区分冠心病和脑卒中；(5)辅助诊断不同临床特征的冠心病或在临床发病之前预警不同临床特征的冠心病；(6)辅助诊断不同临床特征的脑卒中或在临床发病之前预警不同临床特征的脑卒中；(7)辅助诊断心脏损伤或在临床发病之前预警心脏损伤；(8)辅助进行心脑血管疾病复发监控或在临床发病之前预警心脑血管疾病复发；(9)辅助进行冠心病复发监控或在临床发病之前预警冠心病复发；(10)辅助进行脑卒中复发监控或在临床发病之前预警脑卒中复发；(11)辅助进行不同临床特征的冠心病复发监控或在临床发病之前预警不同临床特征的冠心病复发；(12)辅助进行不同临床特征的脑卒中复发监控或在临床发病之前预警不同临床特征的脑卒中复发；所述数学模型按照包括如下步骤的方法获得：(A1)分别检测n1个A类型样本和n2个B类型样本的权利要求1所述甲基化生物标志物的甲基化水平；(A2)取步骤(A1)获得的...

【专利技术属性】
技术研发人员：狄飞飞，王俊，张晶，
申请(专利权)人：南京腾辰医学检验实验室有限公司，
类型：发明
国别省市：