硫氰酸钠在制备用于凝血项目检测的试剂盒中的应用制造技术

本发明专利技术公开了硫氰酸钠在制备用于凝血项目检测的试剂盒中的应用，所述试剂盒基于凝固法、发色底物法或免疫比浊法检测凝血项目，所述凝血项目包括凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间、纤维蛋白原、纤维蛋白(原)降解产物、D

【技术实现步骤摘要】
硫氰酸钠在制备用于凝血项目检测的试剂盒中的应用


[0001]本专利技术属于凝血检测
，具体涉及一种用于凝血项目检测的试剂盒，且该试剂盒中含有硫氰酸钠，可显著优化试剂盒的临床比对结果。

技术介绍

[0002]凝血是血液由液态转变为凝胶状的过程，该过程复杂，涉及凝血因子、凝血酶、纤维蛋白原以及纤溶系统之间的调节与互作。凝血检测可用以协助疾病诊断、评估手术的风险或监控抗凝血药物的使用等。凝血检测项目包括凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、活化部分凝血活酶时间(Activated partial thromboplatin time,APTT)、凝血酶时间(thrombin time,TT)、纤维蛋白原(Fibrinogen,FIB)、纤维蛋白(原)降解产物(FDP)、D
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二聚体(D
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Dimer)、抗凝血酶Ⅲ(antithrombin,AT
‑Ⅲ
)和抗Xa(Anti
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Xa)等。
[0003]目前用于凝血检测的方法主要包括三种：凝固法、发色底物法和免疫比浊法。凝固法采用光学透射+百分比终点法检测血液凝固时间；光源为LED灯，滤波后的光照射到标本，光电二极管接收透射光信号并转换为电信号，经A/D转换后软件进行数据处理，绘制出凝固曲线，用百分比终点法来确定凝固时间。可用凝固法检测的凝血项目有凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间、纤维蛋白原等。免疫比浊法是将待测物对应的抗体包被在大小均一的乳胶颗粒上，当对应的抗原与抗体结合后形成复合物，由于复合物体积的增大引起透射光的变化，即吸光度值的变化，后由吸光度变化推算所检测物质的含量。可用免疫比浊法检测的凝血项目有纤维蛋白(原)降解产物、D
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二聚体等。发色底物法是通过测定产色底物吸光度变化来推测所测物质的含量和活性的，其原理是通过人工合成可以被酶催化裂解的化合物，且化合物连接上产色物质，在检测时，产色物质可被解离下来，使被检样品中颜色发生变化，产生颜色的深浅与待测物成比例关系，同时与吸光度值成正比，从而可对检测物质精确定量。可用发色底物法检测的凝血项目有抗凝血酶Ⅲ、抗Xa等。
[0004]目前凝血市场发展势头较好，但占据国内凝血市场主要的厂家均出自于进口，以sysmex、stago和werfen为代表，占据了国内90％的市场份额。国内凝血试剂盒整体质量仍处于发展初期，试剂的准确度相关性方面仍需要进一步提高。基于当前市场环境，特提出此专利技术。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术旨在提供一种用于凝血项目检测的试剂盒，具体通过添加硫氰酸钠(CAS No.540
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7)显著提高了凝血项目检测试剂盒的临床相关性。
[0006]本专利技术的技术方案具体如下：
[0007]一种用于凝血项目检测的试剂盒，且在该试剂盒中含有硫氰酸钠；该试剂盒具体基于凝固法、发色底物法和免疫比浊法中的任一种方法原理检测凝血项目，具体的，本专利技术所述凝血项目包括凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间、纤维蛋白原、纤维蛋白(原)降解产物、D
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二聚体、抗凝血酶Ⅲ和抗Xa。
[0008]专利技术人在研究过程中发现，在以凝固法进行凝血项目检测过程中添加硫氰酸钠可以提高检测结果的临床相关性，并提高试剂的准确度；将其进一步拓展至凝血项目检测的其他检测方法，发现该操作在凝血项目检测的三个主流检测方法学(凝固法、发色底物法和免疫比浊法)之间普遍适用，均可有效提高试剂的临床相关性，通用性强。
[0009]进一步地，当上述试剂盒具体为基于凝固法检测凝血项目时，硫氰酸钠在检测体系中的终浓度为20
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600mmol/L。
[0010]在上述凝固法试剂盒中，试剂盒中还包括有凝血试剂，如凝血试剂可以为组织凝血活酶悬浊液、牛凝血酶、兔脑磷脂中的一种，其中，组织凝血活酶悬浊液在检测体系中的终浓度优选为0.1
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5％，牛凝血酶在检测体系中的终浓度优选为5
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50IU/mL，兔脑磷脂在检测体系中的终浓度优选为0.1
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0.5％，按质量百分比计。
[0011]在上述凝固法试剂盒中，试剂盒中还可以包括缓冲液、稳定剂、表面活性剂、防腐剂中的至少一种。其中：
[0012]缓冲液具体为HEPES缓冲液、MES缓冲液或Tris缓冲液，pH为5
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9，浓度优选为50
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150mmol/L。
[0013]稳定剂包括已无机盐、大分子蛋白质、糖类、氨基酸中的至少一种；更为具体地，
[0014]无机盐为氯化钠、氯化钙和硫酸铵中的至少一种，且无机盐在检测体系中的终浓度优选为0.2
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2％，更优选为0.2
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1.5％，按质量百分比计；
[0015]大分子蛋白质为BSA、明胶和黄原胶中的至少一种，且大白分蛋白质在检测体系中的终浓度优选为0.1
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5％，更优选为0.1
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3％，按质量百分比计；
[0016]糖类为蔗糖、海藻糖和葡萄糖中的至少一种，且糖类在检测体系中的终浓度优选为0.5
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5％，更优选为0.5
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3％，按质量百分比计；
[0017]氨基酸包括甘氨酸、组氨酸和赖氨酸中的至少一种，且氨基酸在检测体系中的终浓度优选为10
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100mmol/L，更优选为15
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50mmol/L。
[0018]表面活性剂为吐温20、吐温80、曲拉通X
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100、曲拉通X
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405和花王A90中的至少一种，且表面活性剂在检测体系中的终浓度为0.1
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0.5％，按质量百分比计。
[0019]防腐剂为Proclin300和/或叠氮钠，且其在检测体系中的终浓度为0.1
‑
0.5％，按质量百分比计。
[0020]可以理解的是，在上述凝固法试剂盒中，各试剂组分可以分别存放，也可以直接预制成不含待测样品的检测体系。
[0021]进一步地，当上述试剂盒具体为基于发色底物法检测凝血项目时，试剂盒含有试剂A1和试剂A2，其中，试剂A1中含有硫氰酸钠且其在试剂A1中的终浓度为20
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150mmol/L，试剂A2中含有发色底物。
[0022]在上述发色底物法试剂盒中，试剂A1中还包括缓冲液、稳定剂、防腐剂和蛋白制剂中的至少一种。其中：
[0023]缓冲液为HEPES缓冲液或Tris缓冲液，pH为5.5
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8.5，浓度优选为50
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150mmol/L。
[0024]稳定剂包括无机盐、大分子蛋白质、糖类、氨基酸中的至少一种；更为具体地：
[0025]无机盐为氯化钠、氯化钙和硫酸铵中的至少一种，且无机盐在试剂A1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.硫氰酸钠在制备用于凝血项目检测的试剂盒中的应用，所述试剂盒基于凝固法、发色底物法或免疫比浊法检测凝血项目，所述凝血项目包括凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间、纤维蛋白原、纤维蛋白(原)降解产物、D
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二聚体、抗凝血酶Ⅲ和抗Xa。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂盒基于凝固法检测凝血项目时，所述硫氰酸钠在检测体系中的浓度为20
‑
600mmol/L。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述试剂盒中还包括缓冲液、稳定剂、表面活性剂、防腐剂中的至少一种；其中，所述缓冲液为HEPES缓冲液、MES缓冲液或Tris缓冲液，且所述缓冲液的pH为5
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9；所述稳定剂为无机盐、大分子蛋白质、糖类、氨基酸中的至少一种；所述表面活性剂为吐温20、吐温80、曲拉通X
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100、曲拉通X
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405和花王A90中的至少一种；所述防腐剂为Proclin300和/或叠氮钠。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述无机盐为氯化钠、氯化钙和硫酸铵中的至少一种，且其在检测体系中的浓度为0.2
‑
2％；所述大分子蛋白质为BSA、明胶和黄原胶中的至少一种，且其在检测体系中的浓度为0.1
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5％；所述糖类为蔗糖、海藻糖和葡萄糖中的至少一种，且浓度为0.5
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5％；所述氨基酸包括甘氨酸、组氨酸和赖氨酸中的至少一种，且其在检测体系中的浓度为10
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100mmol/L；所述表面活性剂在检测体系中的浓度为0.1
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0.5％，所述防腐剂在检测体系中的浓度为0.1
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0.5％。5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂盒基于发色底物法检测凝血项目时，所述试剂盒包括试剂A1和试剂A2，所述试剂A1中含有硫氰酸钠且其浓度为20
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150mmol/L，所述A2中含有发色底物。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述试剂A1中还包括缓冲液、稳定剂、防腐剂和蛋白制剂中的至少一种；其中，所述缓冲液为HEPES缓冲液、Tris缓冲液，且缓冲液pH为5.5
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8.5；所述稳定剂包括无机盐、大分子蛋白质、糖类、氨基酸中的至少一种；所述防腐剂为Proclin300和/或叠氮钠；所述蛋白制剂包...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑慧铃，王颖，岳柠柠，孙晓亮，夏涛，
申请(专利权)人：武汉明德生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：