用于区分藜属植物的引物及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种用于区分藜属植物的引物及应用。该引物包括引物Mai079、引物Mai200中的一种或者引物Mai11和引物Mai36两种。采用引物Mai11和引物Mai36结合或者单独采用引物Mai079或引物Mai200均可从藜属植物中区分出藜，也可从藜属植物中快速区分出红心藜以及藜，实现在播种前的种子时期或者幼苗期进行物种早期区分，降低误种，减少经济损失。采用引物Mai11和引物Mai36结合还可明确区分出红心藜、南美黑藜麦和藜三种物种，进一步降低误种，在作物栽培上具有重要的应用价值。作物栽培上具有重要的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
用于区分藜属植物的引物及应用


[0001]本专利技术涉及利用分子技术区分物种领域，具体涉及一种用于区分藜属植物的引物及应用。

技术介绍

[0002]藜属植物为苋科藜属植物，例如南美藜麦、红心藜、台湾红藜、藜等。南美藜麦(Chenopodium quinoaWilld.)，又称藜麦，苋科藜属植物，株高1.5
‑
2.5m，原产于南美洲的安第斯山脉，具有耐旱、耐贫瘠、耐盐碱的特性，在原产地，从海平面到4000m海拔都有藜麦的分布，栽培历史已有5000年以上，因其营养全面，被FAO称作唯一能够满足人体基本营养需求的单体食物，近年来，在国内各省均有引种。藜麦籽粒(种子)颜色丰富，有黑、红、白、褐、棕、灰、黄等多种颜色，其中以黑色、白色和红色栽培较多，根据藜麦籽粒颜色可分为黑色南美藜麦(南美黑藜麦、南美黑藜)、红色南美藜麦(南美红藜麦、南美红藜)等。红心藜(Chenopodiumcentrorubrum(Makino)Naka)，为藜(Chenopodium album L.)的变种，枝顶幼叶密布红色粉粒，长大后逐渐变绿，在浙江庆元地区分布较广，株高近3米，杆较藜麦粗壮50％以上，强抗倒伏，在粮食匮乏时期曾作为粮食食用，籽粒黑色，与黑色南美藜麦相似，但产量较南美藜麦略低，但在江南地区的适应性远强于南美藜麦和台湾红藜。台湾红藜(Chenopodium formosanumKoidz.)，又叫台湾藜，是台湾原生的苋科藜属植物，株高1.5
‑
2.5m，其籽粒成熟期茎秆呈紫红色，籽粒亦呈红色，籽粒颜色与红色南美藜麦相似，生长特性也与南美藜麦相似，但抗倒伏能力较南美藜麦强，耐高温和高湿，在我国东部引种较多，部分人会误将其作为藜麦的一个品种。藜(Chenopodium album L.)，又名灰灰菜，大多株高仅0.5m，人工营养栽培下可达2m，是国内常见苋科藜属野草，其幼年期，形态与藜麦、台湾红藜和红心藜相似，较难分别，但其植株较小，籽粒黑色，产量低。
[0003]南美藜麦、红心藜、台湾红藜和藜的特性见表1：
[0004]表1
[0005][0006]其中，南美藜麦、红心藜、台湾红藜和藜的幼苗、种子形态相似，幼苗之间、颜色相同的种子之间均很难区分，目前还没有有效的区分方法，通过人工区分错误率高，如能开发一种能够有效区分藜属植物幼苗、种子的方法，可以在播种前或者幼苗期对物种进行早期鉴定，降低误种，减少经济损失。

技术实现思路

[0007]本专利技术提供了一种用于区分藜属植物的引物，可以从藜属植物中快速区分出产量低的藜，也可以从藜属植物中快速区分出红心藜以及产量低的藜。
[0008]本专利技术还提供了一种用于区分藜属植物的引物的应用，采用引物Mai11和引物Mai36结合或者单独采用引物Mai079或引物Mai200均可从藜属植物中区分出产量低的藜，实现在播种前的种子时期或者幼苗期进行早期藜属植物区分，降低误种，减少经济损失。采用引物Mai11和引物Mai36结合还可明确区分出红心藜、南美黑藜麦和藜三种物种，进一步降低误种，在作物栽培上具有重要的应用价值。
[0009]一种用于区分藜属植物的引物，包括引物Mai079、引物Mai200中的一种或者引物Mai11和引物Mai36两种；
[0010]所述引物Mai11：
[0011]上游引物：5
’‑
TAGCTGTAGTGGGGGAGTACAT
‑3’
(SEQ ID NO：1)，
[0012]下游引物：5
’‑
CTTCCTGTCGACCTTGCTCTTG
‑3’
(SEQ ID NO：2)；
[0013]所述引物Mai36：
[0014]上游引物：5
’‑
TTCGCAAGGTCCTGTACGTCCA
‑3’
(SEQ ID NO：3)，
[0015]下游引物：5
’‑
GCGCAAATCGCATTGAGCGTCT
‑3’
(SEQ ID NO：4)；
[0016]所述引物Mai079：
[0017]上游引物：5
’‑
AGGTGCAGCTGTCTTAGGCGAGT
‑3’
(SEQ ID NO：5)，
[0018]下游引物：5
’‑
CCCACCATAGGCACCGCACTGAC
‑3’
(SEQ ID NO：6)；
[0019]所述引物Mai200：
[0020]上游引物：5
’‑
GGTCTCATACAGTACGACGCT
‑3’
(SEQ ID NO：7)，
[0021]下游引物：5
’‑
ATGTGCCTTTCGGTGTCCTCTT
‑3’
(SEQ ID NO：8)。
[0022]可选的，所述藜属植物包括红心藜、南美藜麦、台湾红藜中的至少一种和藜。例如：所述藜属植物包括南美藜麦、台湾红藜中的至少一种以及红心藜和藜。进一步优选，所述南美藜麦包括南美红藜麦、南美黑藜麦中的一种或两种。
[0023]可选的，所述引物中可引入荧光染料、荧光探针等用于荧光标记的材料设计成荧光标记引物，以适应各种荧光检测设备或荧光读取设备。一般是将所述引物中的上游引物进行荧光标记。
[0024]所述引物可用于区分出藜属植物中的藜。
[0025]所述引物可用于区分出藜属植物种子中藜种子，所述引物包括引物Mai11和引物Mai36两种或者引物Mai200一种。
[0026]所述引物可用于区分出藜属植物幼苗中藜幼苗，所述引物为引物Mai079。
[0027]所述引物可用于区分藜属植物中红心藜、南美黑藜麦和藜三种物种，所述引物包括引物Mai11和引物Mai36两种。
[0028]所述引物可用于区分藜属植物中红心藜种子、南美黑藜麦种子和藜种子，所述引物包括引物Mai11和引物Mai36两种。
[0029]所述引物可用于区分藜属植物中红心藜、藜两种物种。
[0030]本专利技术引物Mai11和引物Mai36结合或者单独的引物Mai079或引物Mai200均能够从藜属植物中快速区分出产量低的藜。引物Mai11和引物Mai36结合能够特异性识别红心藜、南美黑藜麦和藜的黑色种子，可用于黑色种子的快速物种区分。
[0031]结合本专利技术引物的应用，提供了以下几种用于区分藜属植物的方法：
[0032]一种用于区分藜属植物的方法，包括步骤：
[0033](1)提取各待测样本种子的DNA；
[0034](2)分别以步骤(1)提取的各DNA作为DNA模板，采用所述引物Mai11进行PCR扩增，得到各引物Mai11PCR扩增产物；
[0035](3)将步骤(2)中各引物Mai11PCR扩增产物纯化，得到各纯化后引物Mai11PCR扩增产物；...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于区分藜属植物的引物，其特征在于，包括引物Mai079、引物Mai200中的一种或者引物Mai11和引物Mai36两种；所述引物Mai11：上游引物：5
’‑
TAGCTGTAGTGGGGGAGTACAT
‑3’
，下游引物：5
’‑
CTTCCTGTCGACCTTGCTCTTG
‑3’
；所述引物Mai36：上游引物：5
’‑
TTCGCAAGGTCCTGTACGTCCA
‑3’
，下游引物：5
’‑
GCGCAAATCGCATTGAGCGTCT
‑3’
；所述引物Mai079：上游引物：5
’‑
AGGTGCAGCTGTCTTAGGCGAGT
‑3’
，下游引物：5
’‑
CCCACCATAGGCACCGCACTGAC
‑3’
；所述引物Mai200：上游引物：5
’‑
GGTCTCATACAGTACGACGCT
‑3’
，下游引物：5
’‑
ATGTGCCTTTCGGTGTCCTCTT...

【专利技术属性】
技术研发人员：王衍彬，吴应齐，丁敏，秦玉川，王丽玲，
申请(专利权)人：庆元县生态林业发展中心丽水市森林资源保护管理总站，
类型：发明
国别省市：