一种预防和/或治疗非酒精性脂肪肝的片仔癀小RNA、小RNA组合物及制备方法和用途技术

本发明专利技术提供了一种预防和/或治疗非酒精性脂肪肝的片仔癀小RNA、小RNA组合物及制备方法和用途，属于生物医药技术领域。本发明专利技术小RNA是如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列，小RNA组合物是由SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列为组分组成。本发明专利技术从片仔癀中提取得到的3种小RNA均可通过摄食可被有效吸收，并稳定存在，发挥预防和/或治疗非酒精性脂肪肝的作用。并且，将这3种小RNA组合得到的组合物可以有效抑制脂肪堆积，对非酒精性脂肪肝有良好的预防和/或治疗效果。本发明专利技术研究发现片仔癀中利于预防和/或治疗非酒精性脂肪肝的小RNA，这对于片仔癀的进一步研发和质量控制均具有重要意义。一步研发和质量控制均具有重要意义。一步研发和质量控制均具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
一种预防和/或治疗非酒精性脂肪肝的片仔癀小RNA、小RNA组合物及制备方法和用途


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种预防和/或治疗非酒精性脂肪肝的片仔癀小RNA、小RNA组合物及制备方法和用途。

技术介绍

[0002]非酒精性脂肪肝(NAFLD)是指除外酒精和其他明确的损肝因素所致的肝细胞内脂肪过度沉积为主要特征的临床病理综合征，与胰岛素抵抗和遗传易感性密切相关的获得性代谢应激性肝损伤。包括单纯性脂肪肝(SFL)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)及其相关肝硬化。随着肥胖及其相关代谢综合征全球化的流行趋势，非酒精性脂肪性肝病现已成为欧美等发达国家和我国富裕地区慢性肝病的重要病因，严重威胁人类身心健康。
[0003]公开号为CN104042655A的专利申请公开了片仔癀及其制剂可用于治疗非酒精性脂肪肝，效果优异。片仔癀配方是国家绝密配方，主要由三七、蛇胆、牛黄、麝香等多种名贵中药精制而成，具有保护肝细胞、调节肝脏脂质代谢、减少胶原沉积、减轻炎症反应等多重作用。片仔癀因其药理作用广泛，疗效显著，毒副作用小，着眼于整体调节，具有多层次、多靶点的优点，广泛应用于保肝护肝。但是片仔癀发挥药效的机理尚未明确。
[0004]小RNA(small RNA，sRNA)是指包括micro RNA(miRNA)、small interference RNA(siRNA)、piwi
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interacting RNA(piRNA)在内的一类通常长度在200nt以下的非编码RNA分子。小RNA可以转录后水平调控基因表达，在生理与病理过程中发挥着重要作用。近期有研究发现部分中药中的小RNA可以通过消化道进入机体血液和组织器官，在疾病治疗中发挥重要作用。如金银花煎煮液中的MIR2911可以通过灌胃进食的方式进入小鼠体内，并对流感病毒发挥直接作用。这些发现提示，中药小RNA可能作为一种长期以来被忽视的新型中药有效成分，经口服给药即可通过消化道吸收，到达靶器官发挥治疗价值。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一种预防和/或治疗非酒精性脂肪肝的片仔癀小RNA、小RNA组合物及制备方法和用途。
[0006]本专利技术提供了一种预防和/或治疗非酒精性脂肪肝的小RNA，它是如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。
[0007]本专利技术还提供了SEQ ID NO.1～3任一项所示的小RNA核苷酸序列在制备预防和/或治疗非酒精性脂肪肝的药物中的用途；
[0008]优选地，所述药物为抑制脂肪堆积的药物；
[0009]和/或，所述药物为抑制TG、ALT、AST水平的药物；
[0010]和/或，所述药物为抑制FFA、ROS表达水平的药物。
[0011]进一步地，SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列制备的药物为抑制PPARA基因表达的药物；
[0012]和/或，SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列制备的药物为抑制HNF4A基因表达的药物；
[0013]和/或，SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列制备的药物为抑制PCK1基因、G6PC基因表达的药物。
[0014]本专利技术还提供了一种预防和/或治疗非酒精性脂肪肝的小RNA组合物，它是由SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列为组分组成。
[0015]进一步地，所述SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列摩尔百分比为40～80％，SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列摩尔百分比为10～40％；SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列摩尔百分比为10～30％。
[0016]进一步地，所述SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列摩尔百分比为66～67％，SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列摩尔百分比为20％；SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列摩尔百分比为13～14％。
[0017]进一步地，所述SEQ ID NO.1～3所示的核苷酸序列的摩尔比为1:0.3:0.2。
[0018]本专利技术还提供了前述的小RNA组合物的制备方法，它包括如下步骤：
[0019]将SEQ ID NO.1～3所示的核苷酸序列混合，即得。
[0020]本专利技术还提供了前述的小RNA组合物在制备预防和/或治疗非酒精性脂肪肝的药物中的用途；
[0021]优选地，所述药物为抑制PCK1、G6PC、PPARA、HNF4A基因表达的药物。
[0022]进一步地，所述药物为抑制脂肪堆积的药物；
[0023]和/或，所述药物为抑制TG、ALT、AST水平的药物；
[0024]和/或，所述药物为抑制FFA、ROS表达水平的药物。
[0025]本专利技术还提供了一种预防和/或治疗非酒精性脂肪肝的药物，它是由前述的小RNA或前述的小RNA组合物为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而得的制剂。
[0026]与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：
[0027]本专利技术从传统中成药片仔癀中提取得到3种小RNA，这3种小RNA分别能抑制与非酒精性脂肪肝发生发展有关的基因，因此可以发挥预防和/或治疗非酒精性脂肪肝的作用。并且，将这3种小RNA组合得到的组合物可以有效抑制脂肪堆积，对非酒精性脂肪肝有良好的预防和/或治疗效果。同时，本专利技术sRNA均可通过摄食可被有效吸收，并稳定存在，使用方便、有效。本专利技术sRNA还可以作为标志物对片仔癀进行质量控制，本专利技术sRNA含量高的片仔癀预防和/或治疗非酒精性脂肪肝的效果更佳。本专利技术研究发现片仔癀中利于预防和/或治疗非酒精性脂肪肝的小RNA，这对于片仔癀的进一步研发和质量控制均具有重要意义。根据筛选出的小RNA分子指针，可对每个批次的片仔癀进行产品质量检控。
[0028]显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
[0029]以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。
附图说明
[0030]图1为小RNA高通量测序实验流程图。
[0031]图2为Solexa测序得片仔癀小RNA拷贝数。
[0032]图3为血清中各片仔癀小RNA分布。
[0033]图4为肝脏中各片仔癀小RNA分布。
[0034]图5为PTH
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sRNA
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37与PCK1基因mRNA的结合结果。
[0035]图6为PTH
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sRNA
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37与G6PC基因mRNA的结合结果。
[0036]图7为PTH
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sRNA
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6与PPARA基因mRNA的结合结果。
[0037]图8为PTH本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种预防和/或治疗非酒精性脂肪肝的小RNA，其特征在于：它是如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。2.SEQ ID NO.1～3任一项所示的小RNA核苷酸序列在制备预防和/或治疗非酒精性脂肪肝的药物中的用途；优选地，所述药物为抑制脂肪堆积的药物；和/或，所述药物为抑制TG、ALT、AST水平的药物；和/或，所述药物为抑制FFA、ROS表达水平的药物。3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于：SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列制备的药物为抑制PPARA基因表达的药物；和/或，SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列制备的药物为抑制HNF4A基因表达的药物；和/或，SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列制备的药物为抑制PCK1基因、G6PC基因表达的药物。4.一种预防和/或治疗非酒精性脂肪肝的小RNA组合物，其特征在于：它是由SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列为组分组成。5.根据权利要求4所述的小RNA组合物，其特征在于：所述SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列摩尔百分比为40～80％，SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列摩尔百分比为10～40％；SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列摩尔百分比...

【专利技术属性】
技术研发人员：王世聪，于娟，陈志亮，郭宏源，赵晨，付正，张辰宇，
申请(专利权)人：漳州片仔癀药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：