一种受体试剂及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种受体试剂及其应用，受体试剂包含第一缓冲溶液以及悬浮于其中的能够与活性氧作用产生化学发光信号的受体颗粒，所述受体颗粒的表面结合有生物分子，所述受体颗粒在受体试剂中的粒径分布变异系数C.V值不低于5％且不高于20％；每毫克质量的所述受体颗粒中的糖含量不高于40μg。本发明专利技术的有益效果为：本发明专利技术所述受体试剂中受体颗粒粒径分布变异系数C.V值不低于5％且不高于20％；进而上述受体试剂既能满足大批量生产的商业需要，同时也有超高的灵敏度，又有很宽的检测量程。同时，本发明专利技术对受体颗粒中的糖含量进行控制，降低了糖对检测信号的影响，使检测精密度提高，也降低了生产成本。低了生产成本。低了生产成本。

【技术实现步骤摘要】
一种受体试剂及其应用


[0001]本技术方案涉及化学发光检测领域，更具体地，本技术方案涉及一种受体试剂及其应用。

技术介绍

[0002]免疫分析经过半个多世纪的发展，已经发展出了很多种类。根据测定过程中是否要将待测物质与反应体系分离可以分为非均相(Heterogenous)免疫分析和均相(Homogeneous)免疫分析。非均相免疫分析，是指引入探针进行标记的操作过程中，各种相关试剂混合反应后需要进行分离，将待测物与反应体系分离后再进行检测，是现在免疫分析中的主流方法。如广为人们熟知的酶联免疫吸附法(ELISA法)和磁微粒化学发光法等。均相免疫分析则是指在测定过程中将待测物与反应体系中的相关试剂混合反应后直接测定，而没有多余的分离或清洗的步骤。截止目前，多种灵敏的检测方法被应用于均相免疫分析，比如光学检测方法、电化学检测方法等。
[0003]例如，光激化学发光检测(Light Initiated Chemiluminescent Assay，LiCA)就是一种典型的均相免疫分析方法。它是基于两种微球表面包被的抗原或抗体，在液相中形成免疫复合物而将两种微球拉近。在激光的激发下，发生微球之间的单线态氧的转移，进而产生高能级的红光，通过单光子计数器和数学拟合将光子数换算为靶分子浓度。而当样本不含靶分子时，两种微球间无法形成免疫复合物，两种微球的间距超出单线态氧传播范围，单线态氧在液相中迅速淬灭，检测时则无高能级红光信号产生。它具有快速、均相(免冲洗)、高灵敏和操作简单的特点。光激化学发光技术已经在很多检测项目上得到应用。
[0004]按照传统光学检测理论知识，均相化学发光检测所用微球的粒径尺寸越均一，利用该微球进行的化学发光检测的性能越好。因此，本领域技术人员都趋于努力获得更均一粒径的单分散体系微球。然而，随着检测行业的进步，对超敏试剂的需求越来越多，不但对灵敏度要求极高，而且检测量程又要求非常宽，现有的均相化学发光检测方法就很难满足上述检测条件。
[0005]因此，亟需开发一种能够大批量生产、成本低廉、质量合格、性能稳定，既能满足灵敏度要求、又能满足线性范围要求的受体试剂。

技术实现思路

[0006]本专利技术所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种用于均相化学发光的受体试剂。当将包括该受体试剂的试剂盒应用于均相化学发光分析检测时，本申请的专利技术人意外发现其既有超高的灵敏度，又具有很宽的检测量程。
[0007]基于此，本专利技术一方面提供一种受体试剂，其包含第一缓冲溶液以及悬浮于其中的能够与活性氧作用产生化学发光信号的受体颗粒，所述受体颗粒的表面结合有生物分子，所述受体颗粒在受体试剂中的粒径分布变异系数C.V值不低于5％且不高于20％；每毫克质量的所述受体颗粒中的糖含量不高于40μg。
[0008]在本专利技术的一个优选实施例中，所述受体颗粒包括载体，所述载体的内部填充有发光组合物，所述载体的表面键合有生物分子。
[0009]在本专利技术的一个优选实施例中，所述载体表面包被有多糖分子，所述生物分子通过与多糖分子的化学键合而间接结合到受体颗粒的表面。
[0010]在本专利技术的一个优选实施例中，每毫克质量的所述受体颗粒中的糖含量不高于20μg，优选不高于10μg。
[0011]在本专利技术的一个优选实施例中，所述多糖选自含有三个或更多个未修饰或修饰的单糖单元的碳水化合物；优选选自葡聚糖、淀粉、糖原、菊粉、果聚糖、甘露聚糖、琼脂糖、半乳聚糖、羧基葡聚糖和氨基葡聚糖；更优选选自葡聚糖、淀粉、糖原和聚核糖，最优选为葡聚糖或葡聚糖衍生物。
[0012]在本专利技术的一个优选实施例中，所述受体颗粒在受体试剂中的粒径分布变异系数C.V值不高于15％。
[0013]在本专利技术的一个优选实施例中，所述受体颗粒在受体试剂中的粒径分布变异系数C.V值不低于8％。
[0014]在本专利技术的一个优选实施例中，每升体积的所述第一缓冲溶液中的糖含量不低于0.010g且不高于0.30g。
[0015]在本专利技术的一个优选实施例中，每升体积的所述第一缓冲溶液中的糖含量不低于0.015g且不高于0.20g。
[0016]在本专利技术的一个优选实施例中，所述载体的表面没有包被糖分子而直接键合生物分子。
[0017]在本专利技术的一个优选实施例中，所述载体的表面上带有键合官能团，其用于将生物分子直接化学键合在所述载体的表面上，所述键合官能团选自胺基、酰胺基、羟基、醛基、羧基、环氧基、马来酰亚胺基和巯基中的至少一种；优选选自醛基、羧基、环氧基和马来酰亚胺基。
[0018]在本专利技术的一个优选实施例中，前述糖含量是利用蒽酮法检测的。
[0019]本专利技术第二方面还提供一种均相化学发光检测试剂盒，其包括上述的受体试剂。
[0020]所述试剂盒中含有多个试剂条，每个试剂条上开设有若干盛装试剂的试剂孔槽，其中至少一个所述试剂孔槽用于盛装所述受体试剂。
[0021]本专利技术第三方面提供一种上述受体试剂或上述试剂盒在化学发光分析仪上的应用。本专利技术第四方面提供一种上述受体试剂上述试剂盒在POCT检测中的应用。
[0022]本专利技术的有益效果为：本专利技术所述受体试剂中受体颗粒粒径分布变异系数C.V值不低于5％且不高于20％；进而上述受体试剂既能满足大批量生产的商业需要，同时也有超高的灵敏度，又有很宽的检测量程。同时，本专利技术对受体颗粒中的糖含量进行控制，降低了糖对检测信号的影响，使检测精密度提高，也降低了生产成本。
附图说明
[0023]图1为实施例1制备的受体颗粒a在受体试剂中的Gaussian分布图。
[0024]图2为实施例1制备的偶联抗HBsAg抗体后的受体颗粒的Gaussian分布图。
[0025]图3是糖含量测定标准曲线图。
具体实施方式
[0026]为使本专利技术容易理解，下面将详细说明本专利技术。但在详细描述本专利技术前，应当理解本专利技术不限于描述的具体实施方式。还应当理解，本文中使用的术语仅为了描述具体实施方式，而并不表示限制性的。本专利技术的实施并不局限于下面的实施例，对本专利技术所做的任何形式上的变通和/或改变都将落入本专利技术保护范围。
[0027]在提供了数值范围的情况下，应当理解所述范围的上限和下限和所述规定范围中的任何其他规定或居间数值之间的每个居间数值均涵盖在本专利技术内。这些较小范围的上限和下限可以独立包括在较小的范围中，并且也涵盖在本专利技术内，服从规定范围中任何明确排除的限度。在规定的范围包含一个或两个限度的情况下，排除那些包括的限度之任一或两者的范围也包含在本专利技术中。
[0028]除非另有定义，本文使用的所有术语与本专利技术所属领域的普通技术人员的通常理解具有相同的意义。虽然与本文中描述的方法和材料类似或等同的任何方法和材料也可在本专利技术的实施或测试中使用，但是现在描述了优选的方法和材料。
[0029]Ⅰ.术语
[0030]本专利技术所述用语“活性氧”是指机体内或者自然环境中由氧组成，含氧并且性质活泼的物质的总称，主本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种受体试剂，其包含第一缓冲溶液以及悬浮于其中的能够与活性氧作用产生化学发光信号的受体颗粒，所述受体颗粒的表面结合有生物分子，其特征在于：所述受体颗粒在受体试剂中的粒径分布变异系数C.V值不低于5％且不高于20％；所述受体颗粒包括载体，所述载体的内部填充有发光组合物，所述载体表面包被有多糖分子，所述生物分子通过与多糖分子的化学键合而间接结合到受体颗粒的表面。2.根据权利要求1所述的受体试剂，其特征在于，每毫克质量的所述受体颗粒中的糖含量不高于40μg，优选不高于20μg，更优选不高于10μg。3.根据权利要求1或2所述的受体试剂，其特征在于，所述受体颗粒在受体试剂中的粒径分布变异系数C.V值不高于15％；和/或，所述受体颗粒在受体试剂中的粒径分布变异系数C.V值不低于8％。4.根据权利要求1～3中任一项所述的受体试剂，其特征在于，每升体积的所述第一缓冲溶液中的糖含量不低于0.010g且不高于0.30g；优选地，每升体积的所述第一缓冲溶液中的糖含量不低...

【专利技术属性】
技术研发人员：康蔡俊，李临，
申请(专利权)人：科美诊断技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：