一种表达荧光素酶基因的发热伴血小板综合征病毒及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种表达荧光素酶基因的发热伴血小板综合征病毒及其应用，涉及生物领域，本发明专利技术将Nluc报告基因连入与SFTSV基因组NSs蛋白编码N端，构成Nluc报告基因标记的病毒基因组，该报告基因的插入不影响病毒翻译后的蛋白加工修饰，产生的Nluc蛋白也不影响子代病毒颗粒的组装。转染宿主细胞拯救出表达Nluc的重组SFTSV，该病毒可以高效表达Nluc基因，生长曲线与野生型病毒株相似，插入的Nluc基因在连续传代中较为稳定，可用于小鼠酶活成像系统建立快速高通量的抗病毒药物筛选技术或平台，为活体动物成像、药物筛选、药物作用机制及疫苗评价等提供广泛的应用价值。评价等提供广泛的应用价值。评价等提供广泛的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种表达荧光素酶基因的发热伴血小板综合征病毒及其应用


[0001]本专利技术涉及生物领域，具体而言，涉及一种表达荧光素酶基因的发热伴血小板综合征病毒及其应用。

技术介绍

[0002]发热伴血小板综合征病毒(Severe fever with thrombocytopeniasyndrome，SFTSV)，主要以发热，胃肠道症状、血小板减少为主要临床表现的感染性病例，少数患者因多器官衰竭死亡的情况。SFTSV的主要宿主是蜱虫，该病毒在中国中东部湖北、河南、浙江、山东等地以及日本和韩国流行。主要感染中老年人，感染后会出现高热、厌食、肌肉痛、寒战、淋巴结肿大、血小板减少等症状。
[0003]目前缺乏针对SFTSV的特异性治疗药物，只能进行广谱抗病毒治疗和对症下药，这为SFTS的预防和控制带来极大的困难。由于平常的药物筛选是通过SFTSV的活病毒进行药物筛选，耗时长，成本大。
[0004]鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供了一种表达荧光素酶基因的发热伴血小板综合征病毒及其应用。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种DNA片段，其特征在于，其包括：插入有荧光素酶基因的发热伴血小板综合征重组病毒的S片段的cDNA，所述荧光素酶基因的插入位点为：所述S片段的cDNA中NSs蛋白编码序列的N端与3
’
UTR之间。2.根据权利要求1所述的DNA片段，其特征在于，所述荧光素酶基因为Nluc基因、GFP基因、RFP基因、Rluc基因和Fluc基因中的任意一种或多种；优选地，所述Nluc基因的核苷酸序列如SEQ ID No:1所示。3.根据权利要求1或2所述的DNA片段，其特征在于，所述DNA片段还包括连接序列，所述荧光素酶基因通过所述连接序列与NPs蛋白序列的N端相连；优选地，所述连接序列包括P2A；优选地，所述P2A的核苷酸序列如SEQ ID No:2所示。4.根据权利要求3所述的DNA片段，其特征在于，所述插入有荧光素酶基因的发热伴血小板综合征重组病毒的S片段的cDNA的核苷酸序列如SEQ ID No:3所示。5.一种重组载体，其特征在于，其含权利要求1～4任一项所述的DNA片段；优选地，所述重组载体包括表达载体或克隆载体；优选地，所述表达载体包括pT7或用于病毒反向遗传学拯救的含有T7启动子的质粒。6....

【专利技术属性】
技术研发人员：张磊砢，曹浚垣，徐欢，尚卫娟，肖庚富，温宇稀，
申请(专利权)人：湖北江夏实验室，
类型：发明
国别省市：