一种适用于工厂化生产大果沙枣苗木组织培养的方法技术

本发明专利技术公开了一种适用于工厂化生产大果沙枣苗木组织培养的方法，属于植物组织培养技术领域。本发明专利技术的方法通过选用当年生未木质化的嫩梢为外植体，接种于诱导培养基，通过丛生芽的诱导

【技术实现步骤摘要】
一种适用于工厂化生产大果沙枣苗木组织培养的方法


[0001]本专利技术涉及植物组织培养
，特别是涉及一种适用于工厂化生产大果沙枣苗木组织培养的方法。

技术介绍

[0002]大果沙枣(Elaeagnus moorcroftii Wall.ex Schlecht)，别名：新疆大沙枣，大沙枣；胡颓子科胡颓子属，是集多种功能为一体的经济型生态树种，具有抗旱、耐风沙、抗盐碱等特性，具有比沙枣(Elaeagnus angustifolia Linn.)更强的抗盐碱能力、更高的产量、果实比沙枣大、口感更佳等优良特性。同时，大果沙枣的果实、花和叶均具有较高的经济开发潜力，符合名特优树种基本特征，可作为农村产业结构调整主栽树种进行推广发展。
[0003]大果沙枣采用种子繁殖，易发生劣变，果实退化，成为小果沙枣，品质降低。目前，大果沙枣主要采用扦插和嫁接两种无性繁殖方法，但这两种方法需要耗费大量财力、物力和人力，而且受天气、土壤等自然条件影响较大，对穗条的处理及保存要求也较高，穗条质量直接影响大果沙枣的繁育成活率。因此，亟需采取新的无性繁殖的方法来解决这一问题。
[0004]组织培养是近几十年来发展起来的一项无性繁殖的新技术，不存在变异，可保持原母本的一切遗传特征。组织培养能够通过人工控制培养条件，不会被天气、季节等难控因素限制，能够有效减少人力、财力的支出，极利于高度集约化和工厂化育苗生产，是未来农业工厂化育苗的发展方向。
[0005]大果沙枣和沙枣属于同一科属不同种植物，大果沙枣果实形态变异较大，繁育中果实更易退化，品质降低。国外对于沙枣组培的研究仅见叶片获再生芽、未成熟子叶形成愈伤获高效再生植株，未见对大果沙枣组培的研究；国内对于沙枣组培的研究主要是选用种子培养无菌苗、叶片和芽作为外植体进行培养，因采用种子繁殖，大果沙枣会变异为沙枣，该方法不适用于大果沙枣繁育，而国内对于大果沙枣组培方法的研究仅见组培实验性报导，未提大规模工厂化繁育流程及相应技术指标。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是提供一种适用于工厂化生产大果沙枣苗木组织培养的方法，以解决上述现有技术存在的问题。本专利技术通过利用无性繁殖领域的组织培养方法，解决了大果沙枣传统无性繁殖方法中受地理环境和季节等外界条件限制的问题，解决了利用现有沙枣组培方法繁殖大果沙枣易褐化、污染，生根率低的问题，解决了现有大果沙枣组培技术仅在试验阶段，未进行工厂化试验的问题。本专利技术的方法具有繁殖速度快、增殖倍数高、管理方便、生产成本低、成株率高、培养周期短、可周年生产和实现规模化、工厂化生产等特性，可以使植物在室内模拟光照条件下在较短时间内达到快速、高效繁殖的目的，创造出较高的经济效益。本专利技术的方法可以推动大果沙枣规模化生产和产业化发展进程，满足市场对大果沙枣的需求，而且随着规模的不断扩大，还可满足国内及周边国家的需求。
[0007]本专利技术的方法通过选用当年生未木质化的嫩梢为外植体，接种于诱导培养基，通
过丛生芽的诱导
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植株的培养
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茎段增殖(微扦插)途径进行增殖培养，待培养瓶内生长的根、茎、叶俱全的完整植株时进行瓶内炼苗、温室炼苗及苗圃移栽。本专利技术确定了最佳的诱导、继代增殖和生根培养基及激素组合，并且本专利技术提供的方法更适用于工厂化生产大果沙枣苗木，具有繁殖速度快、繁殖系数大、管理方便、生产成本低、成苗率高、培养周期短、可周年生产和实现规模化、工厂化生产的效果，具有广泛的实用性。本专利技术的方法克服了已有的沙枣组培方法效率不高，外植体材料获取和保存不易，操作繁杂，易褐化、污染，且仅适用于试验研究的技术现状，本专利技术提供的方法更适用于大果沙枣苗木的工厂化生产。
[0008]为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
[0009]本专利技术的技术方案之一：一种大果沙枣苗木组织培养的方法，包括以下步骤：
[0010](1)外植体的建立：将大果沙枣外植体灭菌后接种在诱导培养基中培养，得到萌发不定芽的组织；
[0011]更进一步地，所述培养的条件为：温度26
±
2℃，光照强度3200LX，光照时间12～14h，培养时间45～60d；
[0012]诱导培养：
[0013](2)将萌发不定芽的组织转入植株分化培养基中继续培养，得到半木质化的植株(高度为2～2.5cm)；
[0014]更进一步地，所述培养的条件为：温度26
±
2℃，光照强度3200LX，光照时间12～14h，培养时间30d；
[0015](3)将半木质化的植株接入生根促长培养基中培养，得到大果沙枣组培苗(植株高度为4～5cm，植株节间4～5节)；大果沙枣组培苗生根后，根长1.0～1.5cm时，可进行炼苗移栽。
[0016]更进一步地，所述培养的条件为：温度26
±
2℃，光照时间14h，培养时间20d；
[0017](4)将大果沙枣组培苗炼苗后移栽，得到大果沙枣苗木。
[0018]更进一步地，所述炼苗具体包括：将大果沙枣组培苗(瓶装)放置在温室自然散射光下，温度控制在25℃
±
3℃，封口炼苗3～5d，然后逐渐打开瓶盖继续炼苗5～10d。
[0019]更进一步地，所述移栽具体包括温室移栽和苗圃移栽；
[0020]更进一步地，所述温室移栽具体包括：将炼苗后的大果沙枣组培苗连同培养基一同取出，洗净根部培养基，分级后移栽至装有混合基质(细园土：草炭土：珍珠岩按5：3：2的体积比配制)的营养钵中，并置于温室大棚内，用25％的多菌灵可湿性粉剂1000倍溶液喷撒幼苗，透光率40％的遮阳网遮光。适时适量喷水，使温室大棚内的相对湿度保持在80％以上，温度控制在24～26℃。每天早晚掀开遮阳网透光。当第一片新叶完全张开后，可撤去遮阳网，并逐渐打开温室大棚透风，降低湿度。
[0021]更进一步地，所述苗圃移栽具体包括：将经过温室移栽获得的幼苗连同基质取出在苗床上移栽，株行距15cm
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20cm，及时浇足定根水，用透光率60％遮阳网遮盖5～7d。适时对苗床进行浇水，除草。苗木移栽培养至休眠期，苗高≥80cm，地径≥0.7cm，生长健壮，根系发达，苗木基部及根系木质化，获得所述大果沙枣苗木(可出圃)。
[0022]本专利技术的技术方案之二：一种适用于工厂化生产大果沙枣苗木组织培养的方法，包括以下步骤：
[0023](1)外植体的建立：将大果沙枣外植体灭菌后接种在诱导培养基中培养，得到萌发
不定芽的组织；
[0024]更进一步地，所述培养的条件为：温度26
±
2℃，光照强度3200LX，光照时间12～14h，培养时间45～60d；
[0025]诱导培养：
[0026](2)将萌发不定芽的组织转入植株分化培养基中继续培养，得到半木质化的植株(高度为2～2.5cm)；
[0027]更进一步地，所述培养的条件为：温度26
±
2℃，光照强度3本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种大果沙枣苗木组织培养的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将大果沙枣外植体灭菌后接种在诱导培养基中培养，得到萌发不定芽的组织；(2)将萌发不定芽的组织转入植株分化培养基中继续培养，得到半木质化的植株；(3)将半木质化的植株接入生根促长培养基中培养，得到大果沙枣组培苗。2.一种适用于工厂化生产大果沙枣苗木组织培养的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将大果沙枣外植体灭菌后接种在诱导培养基中培养，得到萌发不定芽的组织；(2)将萌发不定芽的组织转入植株分化培养基中继续培养，得到半木质化的植株；(3)将半木质化的植株接入生根促长培养基中培养，得到组培苗；(4)将组培苗剪成带有腋芽的茎段，然后转接到增殖培养基中培养，得到芽苗；(5)将芽苗剪成带有腋芽的茎段，然后接种在生根培养基中培养，得到大果沙枣组培植株。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述诱导培养基，成分包括：MS+6
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BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L。4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述大果沙枣外植体为大果沙枣当年生未木质化的嫩梢。5.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘巧玲，单奇，盛玮，王蓉，周斌，罗青红，蒋腾，刘丽燕，
申请(专利权)人：新疆农业职业技术学院，
类型：发明
国别省市：