一类促卵巢癌转移的特异性肿瘤细胞分子标记组合物及应用制造技术

本发明专利技术公开了一类促卵巢癌转移的特异性肿瘤细胞分子标记组合物及应用，本发明专利技术发现在卵巢癌原位组织和转移组织中均存在的一群以表达S100A9为主要特征的肿瘤细胞亚群，与卵巢癌患者的不良预后呈正相关，并鉴定出了一类促卵巢癌转移的特异性肿瘤细胞分子标记组合物：S100A8、S100A9、ADGRF1、CEACAM6、CST6、NDRG2、MUC4、PI3、SDC1和C15orf48基因均呈特异性显著高表达。抑制这些分子标记物可显著抑制卵巢癌细胞在体外的增殖和转移，以及体内的恶性增长。抑制剂可用来制备预防或治疗卵巢癌转移的药物组合物以用于卵巢癌的基因治疗、药物治疗等临床应用。另外，利用本发明专利技术的试剂盒进行卵巢癌转移的辅助诊断与预后预测分析，对后续临床治疗亦具有重要指导意义。床治疗亦具有重要指导意义。床治疗亦具有重要指导意义。

【技术实现步骤摘要】
一类促卵巢癌转移的特异性肿瘤细胞分子标记组合物及应用


[0001]本专利技术涉及肿瘤分子生物学
，具体涉及一种表达S100A9为主要特征的肿瘤细胞亚群，进一步的，本专利技术还涉及一类促卵巢癌转移的特异性肿瘤细胞分子标记组合物的应用。

技术介绍

[0002]卵巢癌是女性生殖器官常见的恶性肿瘤之一，致死率高居首位。根据2021年世界卫生组织国际癌症研究机构发布的全球癌症负担数据显示，全球卵巢癌新发病例约31万，死亡病例超过20万，严重威胁女性生命健康。因卵巢癌发病隐匿，超过70％的患者发现时已处于晚期且多已发生腹腔多部位转移，极大程度阻碍了手术的可实施性和安全性。目前治疗手段不能令人满意，晚期患者5年生存率始终不足40％，但未合并转移的患者5年生存率可达到90％以上。卵巢癌易发生转移是制约卵巢癌患者生存率提高的重要原因，也是临床医生面临的治疗难题。因此，有效遏制卵巢癌的转移，将有助于改善卵巢癌患者的不良预后。
[0003]单细胞测序技术是目前的热点研究手段，在探究肿瘤细胞异质性和癌细胞进化轨迹、分析复杂的肿瘤微环境、解析肿瘤细胞与间质细胞、免疫细胞等肿瘤微环境细胞的互作等方面较传统测序技术具有显著优势，是2018年度10大科学突破之一。然而，基于单细胞测序对卵巢癌转移的相关研究仍待进一步探索。因此本专利研究对18个卵巢癌初发患者的肿瘤原发部位和/或不同转移部位的肿瘤组织(共34个样本)进行深度单细胞转录组测序，建立高分辨率的卵巢癌原位和转移细胞图谱。利用单细胞测序技术助力卵巢癌的基础探索，联合卵巢癌转移的分子特征，以此探索疾病演变过程中的关键肿瘤细胞群体，有望进行精准靶向治疗，最终达到改善卵巢癌患者的生存结局。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于针对现有技术的不足，提供一类促卵巢癌转移的特异性肿瘤细胞分子标记组合物及应用。
[0005]本专利技术的目的是通过以下技术方案来实现的：
[0006]对取自18个卵巢癌初发患者的肿瘤原发部位和/或不同转移部位的肿瘤组织(共34个样本)进行单细胞转录组测序，建立高分辨率的卵巢癌原位和转移细胞图谱。所述图谱中发现原位肿瘤细胞中存在一小群以表达S100A9为主要特征的细胞亚群。所述肿瘤细胞亚群与卵巢癌的不良预后呈正相关。所述肿瘤细胞亚群在不同患者中均存在，而非个体特异，其存在具有普遍性。所述肿瘤细胞亚群在卵巢癌转移部位的肿瘤细胞中亦普遍存在。通过深入分析存在于肿瘤原位组织和转移组织的S100A9+肿瘤细胞共有分子表达特征，发现一类促卵巢癌转移的特异性肿瘤细胞分子标记组合物，均呈特异性显著高表达。所述的特异性肿瘤细胞分子标记组合物，为表达S100A9为主要特征的肿瘤细胞亚群所共有的特异性显著高表达的特征分子，所述分子或其组合选自(a)
‑
(j)的任意一项或多项：(a)S100A8基因
及其表达产物；(b)S100A9基因及其表达产物；(c)ADGRF1基因及其表达产物；(d)CEACAM6基因及其表达产物；(e)CST6基因及其表达产物；(f)NDRG2基因及其表达产物；(g)MUC4基因及其表达产物；(h)PI3基因及其表达产物；(i)SDC1基因及其表达产物；(j)C15orf48基因及其表达产物。
[0007]进一步地，编码S100A8的为NCBI数据库的基因ID为6279所示序列；
[0008]编码S100A9的为NCBI数据库的基因ID为6280所示序列；
[0009]编码ADGRF1的为NCBI数据库的基因ID为266977所示序列；
[0010]编码CEACAM6的为NCBI数据库的基因ID为4680所示序列；
[0011]编码CST6的为NCBI数据库的基因ID为1474所示序列；
[0012]编码NDRG2的为NCBI数据库的基因ID为57447所示序列；
[0013]编码MUC4的为NCBI数据库的基因ID为4585所示序列；
[0014]编码PI3的为NCBI数据库的基因ID为5266所示序列；
[0015]编码SDC1的为NCBI数据库的基因ID为6382所示序列；
[0016]编码C15orf48的为NCBI数据库的基因ID为84419所示序列；
[0017]所述S100A8,S100A9,ADGRF1,CEACAM6,CST6,NDRG2,MUC4,PI3,SDC1和C15orf48基因及其表达产物均为人源。
[0018]一种鉴定或检测所述一类促卵巢癌转移的特异性肿瘤细胞分子标记组合物试剂在制备诊断、检测、监测或预测卵巢癌的进展的药物中的应用。
[0019]进一步地，所述卵巢癌的进展包括卵巢癌细胞在体外的增殖和转移，以及体内的恶性增长。诊断包括：是否卵巢癌不良预后，其中，高表达为卵巢癌不良预后；检测、监测或预测卵巢癌的进展包括：检测患者所述分子标记组合物的表达，其中，高表达为卵巢癌细胞在体外的增殖和转移，以及体内的恶性增长的可能性更大。
[0020]一种抑制所述一类促卵巢癌转移的特异性肿瘤细胞分子标记组合物表达的试剂在制备治疗或预防卵巢癌转移的药物中的应用。
[0021]一种用于诊断、检测、监测或预测卵巢癌的进展的试剂盒，鉴定或检测标记分子的试剂，所述标记分子选自S100A8,S100A9,ADGRF1,CEACAM6,CST6,NDRG2,MUC4,PI3,SDC1和C15orf48，或其任何组合；
[0022]所述卵巢癌的进展包括卵巢癌细胞在体外的增殖和转移，以及体内的恶性增长。
[0023]进一步地，通过核酸检测方法检测标记分子的mRNA或所述标记分子的cDNA；优选采用转录分析，实时荧光定量PCR，核酸杂交或其任意组合。所述试剂各自独立地包含至少一个与所述一类促卵巢癌转移的特异性肿瘤细胞分子标记组合物的mRNA或cDNA的核苷酸序列一部分互补的引物或探针。所述试剂盒至少包括以下10个引物对中的一个或更多个，实时定量反转录PCR的引物序列如SEQ ID NO.3
‑
22所示。
[0024]一种治疗或预防卵巢癌转移的药物组合物，所述药物包含抑制S100A8、S100A9、ADGRF1、CEACAM6、CST6、NDRG2、MUC4、PI3、SDC1和/或C15orf48基因及其表达产物和/或活性降低的物质，或其任何组合。
[0025]进一步地，所述抑制剂至少包括蛋白特异的抗体、针对基因mRNA的RNA干扰分子或反义寡核苷酸、小分子抑制剂、siRNA、shRNA。
[0026]进一步地，采用设计S100A8,S100A9,ADGRF1,CEACAM6,CST6,NDRG2,MUC4,PI3,
SDC1和C15orf48各自的特异性siRNAs，所述siRNA序列如SEQ ID NO.23
‑
SEQ ID NO.62所示。或者能表达或形成所述siRNA的构建物。
[0027]体外功能实验发现，在OVCAR3和CAOV本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一类促卵巢癌转移的特异性肿瘤细胞分子标记组合物，其特征在于，所述的特异性肿瘤细胞分子标记组合物，为表达S100A9为主要特征的肿瘤细胞亚群所共有的特异性显著高表达的特征分子，所述分子或其组合选自(a)
‑
(j)的任意一项或多项：(a)S100A8基因及其表达产物；(b)S100A9基因及其表达产物；(c)ADGRF1基因及其表达产物；(d)CEACAM6基因及其表达产物；(e)CST6基因及其表达产物；(f)NDRG2基因及其表达产物；(g)MUC4基因及其表达产物；(h)PI3基因及其表达产物；(i)SDC1基因及其表达产物；(j)C15orf48基因及其表达产物。2.根据权利要求1所述的一类促卵巢癌转移的特异性肿瘤细胞分子标记组合物，其特征在于：编码S100A8的为NCBI数据库的基因ID为6279所示序列；编码S100A9的为NCBI数据库的基因ID为6280所示序列；编码ADGRF1的为NCBI数据库的基因ID为266977所示序列；编码CEACAM6的为NCBI数据库的基因ID为4680所示序列；编码CST6的为NCBI数据库的基因ID为1474所示序列；编码NDRG2的为NCBI数据库的基因ID为57447所示序列；编码MUC4的为NCBI数据库的基因ID为4585所示序列；编码PI3的为NCBI数据库的基因ID为5266所示序列；编码SDC1的为NCBI数据库的基因ID为6382所示序列；编码C15orf48的为NCBI数据库的基因ID为84419所示序列；所述S100A8,S100A9,ADGRF1,CEACAM6,CST6,NDRG2,MUC4,PI3,SDC1和C15orf48基因及其表达产物均为人源。3.一种鉴定或检测权利要求1或2所述一类促卵巢癌转移的特异性肿瘤细胞分子标记组合物试剂在制备诊断、检测、监测或预测卵巢癌的进展的药物中的应用。4.根据权利要求3所述的应用...

【专利技术属性】
技术研发人员：许君芬，吕卫国，韦欣仪，
申请(专利权)人：浙江大学医学院附属妇产科医院，
类型：发明
国别省市：