酶转化高效制备淫羊藿次苷II的方法技术

本发明专利技术公开一种酶转化高效制备淫羊藿次苷II的方法，首先制备曲霉菌耐有机溶剂淫羊藿次苷II生成酶，与淫羊藿药材中含量高的淫羊藿黄酮苷(包括朝藿定A或朝藿定B或朝藿定C或淫羊藿苷中至少一种)混合，在底物浓度较高的含有机溶剂的反应体系中进行酶反应，使底物几乎全部转化为淫羊藿次苷II，其制备摩尔理论得率90％以上，纯度98％。反应后的耐有机溶剂淫羊藿次苷生成酶可以回收利用。本发明专利技术具有反应效率高，操作简单、成本低、适合大批量生产等特点。点。点。

【技术实现步骤摘要】
酶转化高效制备淫羊藿次苷II的方法


[0001]本专利技术涉及一种酶转化淫羊藿药材中含量高的淫羊藿黄酮苷(淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B或朝藿定C)，高效制备带有3
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O
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α
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L
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鼠李糖基的淫羊藿次苷II的制备方法。

技术介绍

[0002]淫羊藿是常用的传统中药，其茎叶入药，具有强筋骨、补肾壮阳、治疗阳痿遗精、抗血栓、祛风湿等药效。淫羊藿属植物中，发现60余种淫羊藿种群，其中2020年版《中国药典》所收载的药用淫羊藿为：小蘖科植物淫羊藿(Epimedium brevicornum Maxim)；箭叶淫羊藿(Epimedium sagittatum Maxim)；柔毛淫羊藿(Epimedium pubescens Maxim)；朝鲜淫羊藿(Epimedium koreanum Nakai)和巫山淫羊藿(Epimedium wushanense T.S.Ying)等。淫羊藿药材(茎叶)中主要有效成分为淫羊藿黄酮苷，常见的淫羊藿黄酮苷结构式如下：
[0003][000本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种酶转化高效制备淫羊藿次苷II的方法，其特征在于：制备一种耐有机溶剂曲霉菌淫羊藿次苷II生成酶，其酶与淫羊藿苷或朝藿定A或朝藿定B或朝藿定C至少一种的淫羊藿黄酮苷混合，在含有有机溶剂的反应液中反应，高效制备淫羊藿次苷II；依次按照如下步骤制备：a.将曲霉菌接种在含有以干物计算质量比例为5
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20％产酶诱导剂的培养基中用液态发酵法或固态发酵法，培养5
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7天，所述产酶诱导剂为脱脂大豆粉与质量30
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80％的甘草茎叶或槐花粉的混合物；在液态发酵法所得到的离心除杂发酵液上清或用5倍体积生理盐水提取的固态发酵法酶浸提液中，加入3倍体积的乙醇或甲醇沉淀酶蛋白、过夜，离心收集酶蛋白沉淀；将酶蛋白沉淀溶解于原酶液1/5
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1/10体积pH＝5的0.02
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0.04M醋酸缓冲液或柠檬酸缓冲液或磷酸缓冲液中，离心除杂，即可得到耐有机溶剂的淫羊藿次苷II生成酶液；b.将a步骤所得到的耐有机溶剂的淫羊藿次苷II生成酶液与淫羊藿黄酮苷的甲醇或乙醇溶液混合，使酶反应底物质量浓度2.5％
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5％，在温度40
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60℃下反应6
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20小时，其反应底物淫羊藿黄酮苷几乎全部转化为淫羊藿次苷II，其产物沉淀；所述淫羊藿黄酮苷底物...

【专利技术属性】
技术研发人员：金凤燮，鱼红闪，
申请(专利权)人：鱼红闪，
类型：发明
国别省市：