一种识别NNTA特异位点的基因、基因编辑系统及其应用技术方案

本发明专利技术提供了一种识别NNTA特异位点的基因、基因编辑系统及其应用，用于植物尤其是水稻基因打靶。本发明专利技术涉及生物技术和植物基因工程技术领域。所述基因具有SEQ ID No：1所示的核苷酸序列。本发明专利技术的基因是以模式作物水稻密码子为基础改造获得的，再经过化学合成而来。发明专利技术人从大量不同的基因中进行组合获得了在水稻中具有高剪切效率的识别NNTA的基因。本发明专利技术利用所获得的基因构建植物表达载体，构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA双链剪切，实现了水稻基因打靶，并且以高突变效率获得转基因水稻植株。以高突变效率获得转基因水稻植株。以高突变效率获得转基因水稻植株。

【技术实现步骤摘要】
一种识别NNTA特异位点的基因、基因编辑系统及其应用


[0001]本专利技术涉及生物技术和植物基因工程
具体的，本专利技术涉及一种识别NNTA特异位点的基因，含有该基因的表达盒、表达载体、打靶载体、转基因细胞以及它们的应用。

技术介绍

[0002]在基因编辑中，DNA双链断裂(DSBs)可以通过非同源末端连接(NHEJ)和同源重组(HDR)进行修复。通过NHEJ的修复容易发生错误，使断裂位置产生小片段的缺失或插入，从而导致基因突变；在有供体DNA存在的情况下，有可能通过HDR进行断裂位置的修复，产生精准的基因插入或替换。目前基因组编辑技术已经开发了很多工具，但在基因工程中使用最频繁的基因组编辑系统是CRISPR/Cas9系统。但SpCas9蛋白识别靶点时需要特定的NGG序列，在一定程度上限定了该基因编辑系统的广泛应用。为了拓宽CRISPR/Cas系统的编辑范围，有必要研发出不同类型的CRISPR酶系统。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的是为了克服现有技术存在的上述缺陷，本专利技术希望提供一种能够识别其他目标基因本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种识别NNTA特异位点的基因，其特征在于，所述基因包括SEQ ID No：1所示的核苷酸序列。2.根据权利要求1所述的识别NNTA特异位点的基因，其中，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID No：1所示。3.一种识别NNTA特异位点的基因编辑系统，其中，所述基因编辑系统包括SEQ ID No：1所示的核苷酸序列。4.一种表达盒，其特征在于，所述表达盒含有权利要求1或2所述的基因。5.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体插入有权利要求1或2所述的基因或权利要求3所述的表达盒，优选地，所述表达载体为PHUC411。6.一种打靶载体，其特征在于，该打靶载体插入有权利要求1或2所述的基因或权利要求4所述的表达盒以及靶位点表达盒。7.根据权利要求6所述的打靶载体，其特征在于，所述靶位点表达盒具有式I结构：P1
‑
A
‑
B
‑
T(I)；其中，(a)P1为第1启动子；(b)A为目标位点引导序列sg；(c)B为scaffold序列；(d)T为终止序...

【专利技术属性】
技术研发人员：权利要求书一页说明书八页序列表电子公布附图二页，
申请(专利权)人：安徽农业大学，
类型：发明
国别省市：