通过转分化治疗神经元缺失性疾病制造技术

本发明专利技术公开了通过转分化治疗神经元缺失性疾病，具体为降低一种或更多种基因、或其RNA、或其编码蛋白的表达或活性的抑制剂在治疗神经元功能缺失或死亡的疾病中的用途，这些基因选自：Plpp7、Fam126a、Gprc5c、Tmed4、Tle6、Psmd5、Mastl、Ssr3、Rhoa、Rfx8、Rbm10、Hnrnpa3、Prpf6、Pou3f3、Ncoa1、Ccdc8、Adck1、Gjb2、Smad9、Nr2e1、Atp10b、Nid1、Tmcc3、Rad21、Amigo1、Cep192、Sepp1、Klf12、Nxf1、Trp53inp2、Phlpp1、Ptpdc1、Pebp1、Gm22174、Gm26117、Mir873a、Mir1900、Gm22414、Khdc4、Hnrnpa0、Hnrnph2、Srrm1、Hnrnpf、Srsf4、Mbnl1、Zbtb42、Kcmf1、Gtf2i、Chgb、Fos、Kat2a、Tsg101、Hmgb4、Junb、Cdx2、Cers2、Rhox6、Thap3、Zscan25。Zscan25。

【技术实现步骤摘要】
通过转分化治疗神经元缺失性疾病
[0001]本申请要求于2022年03月14日提交中国专利局、申请号为CN202210248958.7、专利技术名称为“通过转分化治疗神经元缺失性疾病”的中国专利申请的优先权，其全部内容通过引用结合在本申请中。


[0002]本专利技术属于转化医学领域，具体地，本专利技术涉及通过降低细胞转分化因子的表达或活性从而可以使非神经细胞转分化为神经元或神经前体细胞的技术，以及降低细胞转分化因子的表达或活性的抑制剂治疗或预防神经元功能缺失或神经元死亡相关的疾病中的用途。

技术介绍

[0003]细胞的转分化(cell transdifferentiation)是指一种类型的分化细胞通过基因选择性表达或基因的重编程使其在结构和功能上转变成另一种分化细胞的过程。
[0004]最近的研究表明，某些神经元特异性转分化因子能够将非神经元细胞(例如成纤维细胞)转分化为神经元细胞。将非神经元细胞转分化为神经元细胞有望用于与神经元功能缺失或死亡相关的疾病，例如帕金森病、脑卒中、与RGC或感光细胞功能缺失或死亡有关的视觉系统疾病本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.将非神经元细胞转化为神经元或者神经前体细胞的方法，其特征在于，所述方法包括降低细胞转分化因子的表达或活性，所述细胞转分化因子选自Plpp7、Fam126a、Gprc5c、Tmed4、Tle6、Psmd5、Mastl、Ssr3、Rhoa、Rfx8、Rbm10、Hnrnpa3、Prpf6、Pou3f3、Ncoa1、Ccdc8、Adck1、Gjb2、Smad9、Nr2e1、Atp10b、Nid1、Tmcc3、Rad21、Amigo1、Cep192、Sepp1、Klf12、Nxf1、Trp53inp2、Phlpp1、Ptpdc1、Pebp1、Gm22174、Gm26117、Mir873a、Mir1900、Gm22414、Khdc4、Hnrnpa0、Hnrnph2、Srrm1、Hnrnpf、Srsf4、Mbnl1、Zbtb42、Kcmf1、Gtf2i、Chgb、Fos、Kat2a、Tsg101、Hmgb4、Junb、Cdx2、Cers2、Rhox6、Thap3、或Zscan25中的至少一种基因、或至少一种基因的RNA、或至少一种基因编码的蛋白；优选的，所述非神经元细胞选自干细胞、祖细胞或终末分化细胞；更优选的，所述非神经元细胞选自哺乳动物的非神经元细胞，例如人、非人灵长类动物、小鼠、大鼠物种的非神经元细胞；更优选的，所述哺乳动物的非神经元细胞选自干细胞或终末分化细胞。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述干细胞为胚胎干细胞、神经干细胞、或诱导多能干细胞。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述终末分化细胞为胶质细胞；优选的，所述胶质细胞选自星形胶质细胞、少突胶质细胞、小胶质细胞、NG2细胞、穆勒胶质细胞、胶质瘤细胞或螺旋神经节胶质细胞；更优选的，所述胶质细胞选自星形胶质细胞、穆勒胶质细胞或螺旋神经节胶质细胞。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，体外培养非神经元细胞，并降低细胞转分化因子的表达或活性，使得非神经元细胞体外转化为神经元或者神经前体细胞；或者通过降低体内细胞转分化因子的表达或活性，诱导体内的非神经元细胞在体内转化为神经元或者神经前体细胞；优选的，所述非神经元细胞是胶质细胞，非神经元细胞在体内转化为神经元或者神经前体细胞。5.根据权利要求1
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4任一所述的方法，其特征在于，所述降低细胞转分化因子的表达或活性的方法包括给予降低细胞转分化因子的表达或活性的抑制性物质，所述抑制性物质包括能降低Plpp7、Fam126a、Gprc5c、Tmed4、Tle6、Psmd5、Mastl、Ssr3、Rhoa、Rfx8、Rbm10、Hnrnpa3、Prpf6、Pou3f3、Ncoa1、Ccdc8、Adck1、Gjb2、Smad9、Nr2e1、Atp10b、Nid1、Tmcc3、Rad21、Amigo1、Cep192、Sepp1、Klf12、Nxf1、Trp53inp2、Phlpp1、Ptpdc1、Pebp1、Gm22174、Gm26117、Mir873a、Mir1900、Gm22414、Khdc4、Hnrnpa0、Hnrnph2、Srrm1、Hnrnpf、Srsf4、Mbnl1、Zbtb42、Kcmf1、Gtf2i、Chgb、Fos、Kat2a、Tsg101、Hmgb4、Junb、Cdx2、Cers2、Rhox6、Thap3、或Zscan25中的至少一种基因、或至少一种基因的RNA、或至少一种基因编码的蛋白的表达或活性的抑制剂；优选的，所述抑制剂选自调控所述细胞转分化因子表达的基因编辑工具、表观遗传调控工具、抗体、小分子化合物、mRNA,microRNA、siRNA、shRNA、反义寡核苷酸、结合蛋白或蛋白结构域、多肽、核酸适配体、PROTAC、包含启动子的表达载体、蛋白质类似物，人工合成或修饰的以上所述抑制剂或其组合；更优选的，所述基因编辑工具包括：(a)基因编辑系统或其表达载体，所述基因编辑系统有选自：CRISPR系统(包括CRISPR/
dCas系统)、ZFN系统、TALEN系统、RNA编辑系统，或其组合；和/或(b)一个或多个所需的gRNA或其表达载体，所述gRNA是引导基因编辑蛋白特异性结合所述基因的DNA或RNA。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，采用CRISPR系统降低细胞转分化因子的表达或活性；优选的，所述crispr基因编辑工具含有cas酶或cas酶的功能结构域的编码核酸以及靶向所述细胞转分化因子的gRNA；更优选的，所述cas酶为Cas13d、CasRx、Cas13X、Cas13a、Cas13b、Cas13c、或Cas13Y；更优选的，所述cas酶为CasRx、Cas13X、或Cas13Y；更优选的，所述cas酶为CasRx。7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述抑制性物质还包括载体；优选的，所述载体为病毒载体、脂质纳米颗粒(LNP)、脂质体、阳离子聚合物(如PEI)、纳米颗粒、外泌体、或类病毒颗粒；更优选的，所述载体为AAV载体或脂质纳米颗粒。8.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述星形胶质细胞来源于脑部或脊髓，或所述穆勒胶质细胞来源于视网膜，或所述螺旋神经节胶质细胞来源于内耳或前庭；所述脑部优选自大脑、中脑、小脑、脑干；更优选自纹状体或黑质。9.根据权利要求1
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8任一所述的方法，其特征在于，所述神经元细胞为哺乳动物神经元，例如人、非人灵长类动物、大鼠、小鼠的神经元；其中所述神经元细胞优选多巴胺神经元、5
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HT神经元、NE神经元、ChAT神经元、GABA神经元、谷氨酸能神经元、运动神经元、感光细胞(如视杆细胞和视锥细胞)、视网膜神经节细胞(RGC)、耳蜗神经细胞(如耳蜗螺旋神经节细胞和前庭神经元)、或中型多棘神经元(MSN)或其组合；更优选多巴胺神经元、视网膜神经节细胞或感光细胞；在一更优选的方案中，所述非神经元细胞是星形胶质细胞，且所述神经元细胞是多巴胺神经元；或者所述胶质细胞是穆勒胶质细胞，且所述神经元细胞是RGC或感光细胞。10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述细胞转分化因子选自Plpp7、Fam126a、Gprc5c、Tmed4、Tle6、Psmd5、Mastl、Ccdc8、Adck1、Gjb2、Smad9、Nr2e1、Atp10b、Nid1、Tmcc3、Rad21、Amigo1、Rbm10、Hnrnpa3中的至少一种基因、或至少一种基因的RNA、或至少一种基因编码的蛋白；优选的，所述细胞转分化因子选自Amigo1、Fam126a、Gjb2或Gprc5c的至少一种基因、或至少一种基因的RNA、或至少一种基因编码的蛋白。11.降低选自细胞转分化因子表达或活性的抑制剂在制备预防或治疗与神经元功能缺失或死亡相关的疾病的药物的用途，所述细胞转分化因子选自Plpp7、Fam126a、Gprc5c、Tmed4、Tle6、Psmd5、Mastl、Ssr3、Rhoa、Rfx8、Rbm10、Hnrnpa3、Prpf6、Pou3f3、Ncoa1、Ccdc8、Adck1、Gjb2、Smad9、Nr2e1、Atp10b、Nid1、Tmcc3、Rad21、Amigo1、Cep192、Sepp1、Klf12、Nxf1、Trp53inp2、Phlpp1、Ptpdc1、Pebp1、Gm22174、Gm26117、Mir873a、Mir1900、Gm22414、Khdc4、Hnrnpa0、Hnrnph2、Srrm1、Hnrnpf、Srsf4、Mbnl1、Zbtb42、Kcmf1、Gtf2i、Chgb、Fos、Kat2a、Tsg101、Hmgb4、Junb、Cdx2、Cers2、Rhox6、Thap3、Zscan25中的至少一种基因、或至少一种基因的RNA、或至少一种基因编码的蛋白；优选的，所述细胞转分化因子选自Plpp7、Fam126a、Gprc5c、Tmed4、Tle6、Psmd5、Mastl、Ccdc8、Adck1、Gjb2、Smad9、Nr2e1、Atp10b、Nid1、Tmcc3、Rad21、Amigo1、Rbm10、Hnrnpa3中的至少一种基因、或至少一种基因的RNA、或至少一种基因编码的蛋白；更优选的，所述细胞转分化因子选自Amigo1、Fam126a、Gjb2或Gprc5c的至少一种基因、
或至少一种基因的RNA、或至少一种基因编码的蛋白。12.根据权利要求11所述的用途，其特征在于，所述药物配制成用于在体内施用于神经系统、视觉系统和听觉系统的药剂，例如体内施用于纹状体、黑质、中脑腹侧被盖区、脊髓、下丘脑、背侧中脑、大脑皮层、海马、小脑、视网膜下、玻璃体腔、内耳耳蜗和前庭，优选纹状体、黑质、视网膜下和玻璃体腔。13.根据权利要求11所述的用途，其特征在于，所述与神经元功能缺失或死亡相关的疾病为神经系统疾病，所述神经系统疾病优选自帕金森病、RGC或感光细胞功能缺失或死亡有关的视觉系统疾病、脑卒中、阿尔茨海默病、脑损伤、亨廷顿舞蹈症、癫痫、抑郁症、睡眠失调、脑缺血、运动神经元病、肌萎缩性侧索硬化、脊髓性肌萎缩症、共济失调、PloyQ疾病、精神分裂症、成瘾、Pick病、失明、耳聋，更优选帕金森病和RGC或感光细胞功能缺失或死亡有关的视觉系统疾病；所述与RGC功能缺失或死亡有关的视觉系统疾病优选自：RGC细胞死亡导致的视力损伤、青光眼、年龄相关的RGC病变、视神经损伤、年龄相关性黄斑变性(AMD)、糖尿病相关视网膜病变、视网膜缺血或出血、Leber遗传性视神经病变、或其组合；所述与感光细胞功能缺失或死亡有关的视觉系统疾病优选自...

【专利技术属性】
技术研发人员：周海波，冯灿斌，许争争，高妮，胡新德，
申请(专利权)人：上海鲸奇生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：