一种山羊精液的保存液及其保存方法技术

本发明专利技术属于精液保存液技术领域，尤其是一种山羊精液的保存液及其保存方法。该保存液每100mL中包括以下组分：组分A：1.2～1.3g的果糖、1.7～1.8g的柠檬酸一水合物、3.5～3.6g的三羟甲基氨基甲烷；组分B：19～21mL的新鲜卵黄、3.5～4.5mL的维生素E、0.4～0.6g的牛血清白蛋白、0.4～0.6g的维生素C、3.5～4.5mL的甘油、10000～15000IU的青霉素钠、10000～15000IU的链霉素硫酸盐、0.5～0.7mg的Y

【技术实现步骤摘要】
一种山羊精液的保存液及其保存方法


[0001]本专利技术属于精液保存液
，尤其涉及一种山羊精液的保存液及其保存方法。

技术介绍

[0002][0003]养羊业是畜牧业的重要组成部分，自20世纪50年代以来，随着市场对羊肉需求的增加和对羊毛、羊皮产品需求的下降，世界养羊业逐渐由毛用型向肉用型方向发展。羊肉以其高蛋白、低脂肪、低胆固醇、含有许多人体需要的氨基酸，营养全面，且具有保健作用，是符合现代消费观念的绿色、安全食品。伴随着人们生活水平的提高，羊肉的需求增长非常明显，规模化和集约化肉羊养殖场发展迅速。肉羊的人工授精技术作为现代生物快繁技术，加速了肉羊规模化和集约化发展。
[0004]精液保存同人工授精技术相结合，能够突破优良种畜精液配种的时间和地域限制，具有加快畜群改良育种进程、保护家畜种质资源和遗传多样性等作用。精液保存技术的建立，精液实现长期保存和长途运输，极大地推动了家畜人工授精的产业化进程，具有巨大的商业化价值和应用前景。精液的保存是人工授精技术的一项重大革新，目前，牛、马等家畜的精液保存已取得了令人满意的效果。
[0005]自1939年Philips首先发现卵黄对公牛精子具有保护作用以来,卵黄作为精子的保护剂成为保存液中不可或缺的重要成分，目前已广泛应用于不同动物精子的保存，但在山羊的精液保存方面进展缓慢，主要原因在于，1957年ROY首先发现山羊精浆会导致卵黄聚集，并最终引起精子的死亡。这种卵黄聚集作用是由一种来源于山羊尿道球腺的蛋白酶引起的，并将这种蛋白酶命名为EYCE。60年代，Iritani等将该酶定义为磷脂酶A。磷脂酶A可以将卵黄中卵磷脂水解为脂肪酸和溶血卵磷脂，导致质膜通透性增加，最终诱发精子顶体反应和染色体解聚，这些结构变化都不利于精子存活。为了解决山羊精浆导致卵黄聚集，并最终引起精子死亡的问题，有些研究人员通过离心去除含有磷脂酶A的山羊精浆，然后把离心沉淀的精子用含卵黄保存液重悬，保存液不再发生卵黄聚集。但是在去除山羊精浆的过程中，较低速度离心会使得精子沉淀不全，接近一半的精子仍在山羊精浆中，而且沉淀下来的精子活力明显下降，影响保存的效果。而较高速度离心虽然使精液中的精子完全沉淀，但是沉淀下来的精子会失去活力和利用价值。因此，亟需一种山羊精液的保存液及其保存方法解决上述问题。

技术实现思路

[0006]为了克服上述现有技术中的缺陷，为此，本专利技术提供一种山羊精液的保存液及其保存方法。本专利技术可以解决山羊精液中磷脂酶A与卵黄发生相互作用而聚集的问题，同时提高了山羊精液的保存时间和质量。
[0007]为实现上述目的之一，本专利技术采用以下技术方案：
[0008]一种山羊精液的保存液，该保存液每100mL中包括以下组分：
[0009]组分A：1.2～1.3g的果糖、1.7～1.8g的柠檬酸一水合物、3.5～3.6g的三羟甲基氨基甲烷；
[0010]组分B：19～21mL的新鲜卵黄、3.5～4.5mL的维生素E、0.4～0.6g的牛血清白蛋白、0.4～0.6g的维生素C、3.5～4.5mL的甘油、10000～15000IU的青霉素钠、10000～15000IU的链霉素硫酸盐、0.5～0.7mg的Y
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·
2HCl、5～6mg的四氢嘧啶、0.2～0.3mg的联苯双酯、0.3～0.4mg的硫普罗宁、0.5～0.6mg的氨磷汀、2～2.5mg的阿奇霉素、0.1～5mg的地塞米松；
[0011]其余为双蒸水。
[0012]优选的，地塞米松的浓度为20μg/mL。
[0013]优选的，该保存液每100mL中包括以下组分：
[0014]组分A：1.26g的果糖、1.72g的柠檬酸一水合物、3.53g的三羟甲基氨基甲烷；
[0015]组分B：20mL的新鲜卵黄、4mL的维生素E、0.5g的牛血清白蛋白、0.5g的维生素C、4mL的甘油、15000IU的青霉素钠、15000IU的链霉素硫酸盐、0.64mg的Y
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27632
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2HCl、5.68mg的四氢嘧啶、0.21mg的联苯双酯、0.33mg的硫普罗宁、0.5mg的氨磷汀、2mg的阿奇霉素、2mg的地塞米松；
[0016]其余为双蒸水。
[0017]本专利技术目的之二是提供一种山羊精液的保存液的保存方法，包括以下步骤：
[0018]利用保存液将采集到的合格山羊精液进行8倍稀释，再将稀释后的精液分装至离心管，外包脱脂棉后，置于4℃冰箱保存。
[0019]本专利技术目的之三是提供一种山羊精液的保存液的保存方法，包括以下步骤：
[0020]利用保存液将采集到的合格羊精液进行8倍稀释，再将稀释后的精液分装在细管中，细管用聚乙烯醇粉封口，接着将细管置于预先准备的液氮中熏蒸，最后将细管放入液氮中保存。
[0021]本专利技术的优点在于：
[0022](1)本专利技术保存液中各组分的作用如下：
[0023]地塞米松：与其他糖皮质激素一样，具有抗炎、抗内毒素、抑制免疫、抗休克及增强应激反应等药理作用，故广泛应用于治疗多种疾病。地塞米松主要通过抑制磷脂酶A活性及其代谢产物合成发挥抗炎和镇痛作用。地塞米松与靶细胞糖皮质激素受体结合，诱导靶细胞产生脂皮素，通过阻断mRNA的合成抑制磷脂酶A产生，减少花生四烯酸代谢产物生成，实现对靶细胞和器官的保护作用。地塞米松还可激活腺苷酸环化酶，抑制磷酸二酯酶，提高cAMP水平和支气管β受体对拟肾上腺素药及茶碱类的敏感性，间接发挥支气管解痉挛作用。
[0024]Y
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2HCl：作为ROCK
‑
II的抑制剂，具有通过选择性抑制Ca
2+
敏感化，抑制多种兴奋剂诱导的平滑肌收缩。Y
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2HCl作用于培养的细胞，抑制Rho诱导的p160 ROCK调节的应力纤维的形成。10μM Y
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2HCl处理在无血清培养基中的人类胚胎干细胞，能够显著降低细胞凋亡，提高细胞克隆效率(从1％提高到27％)。
[0025]果糖：糖类是羊精液保存液或稀释液中的重要能源物质，其主要功能是为羊精子提供营养和补充能量，另外，糖类能够稳定精子膜蛋白
‑
脂类复合物，发挥保护精子质膜的作用。
[0026]柠檬酸一水合物和三羟甲基氨基甲烷：均为缓冲物质，缓冲物质是羊精液保存液或稀释液中必不可少的成分。在稀释液中加入缓冲物质的目的是为了调节和维持精液正常的pH，以利于精子的存活。
[0027]维生素E和维生素C：精液保护液中添加一定浓度的维生素E和维生素C，可以减少精子保存过程中产生的过量超氧化物，降低对精子质膜的氧化应激性损伤，提高的精子保存质量。
[0028]新鲜卵黄：作为保护和能量物质被广泛的应用于精液的保存液或稀释液。另外，卵黄中的低密度脂蛋白直接渗入细本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种山羊精液的保存液，其特征在于，该保存液每100mL中包括以下组分：组分A：1.2～1.3g的果糖、1.7～1.8g的柠檬酸一水合物、3.5～3.6g的三羟甲基氨基甲烷；组分B：19～21mL的新鲜卵黄、3.5～4.5mL的维生素E、0.4～0.6g的牛血清白蛋白、0.4～0.6g的维生素C、3.5～4.5mL的甘油、10000～15000IU的青霉素钠、10000～15000IU的链霉素硫酸盐、0.5～0.7mg的Y
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2HCl、5～6mg的四氢嘧啶、0.2～0.3mg的联苯双酯、0.3～0.4mg的硫普罗宁、0.5～0.6mg的氨磷汀、2～2.5mg的阿奇霉素、0.1～5mg的地塞米松；其余为双蒸水。2.根据权利要求1所述的一种山羊精液的保存液，其特征在于：所述地塞米松的浓度为20μg/mL。3.根据权利要求1所述的一种山羊精液的保存液，其特征在于：该保存液每100mL中包括以下组分：组分A：1.26g的果糖、1.72g的柠檬酸一水合物、3.53g的三羟甲基氨...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹鸿国，沈文正，白海玉，付玉，凌英会，张子军，
申请(专利权)人：安徽农业大学，
类型：发明
国别省市：