一种角豆黄酮类组合物的制备方法及其应用技术

本发明专利技术涉及一种角豆黄酮类化合物组合物，所述组合物由角豆提取得到的3

【技术实现步骤摘要】
一种角豆黄酮类组合物的制备方法及其应用


[0001]本专利技术涉及医药领域，具体涉及一种角豆黄酮类化合物组合物的制备方法及应用。

技术介绍

[0002]黄酮类化合物是水果和蔬菜中种类最丰富的次级代谢物，主要以色素的形式存在。天然存在的黄酮类化合物具有很高的药用价值，包括抗菌、抗炎、抗癌等。但由于其低含量、低溶解性、低稳定性等局限性，天然黄酮类化合物的利用受到限制。因此天然角豆化合物的协同增效方面的研究至关重要。
[0003]角豆(Ceratonia siliqua L.)，原产于地中海东部，目前在国内已由人工引种栽培。制取的角豆胶广泛用于造纸、纺织、化妆绘画油料和胶糖剂等，角豆子制成角豆粉广泛用于食品加工领域。角豆具有非常高的营养价值，富含矿物质及微量元素，含有的单宁、多酚类物质具有药用价值。本专利技术角豆果荚提取物提取方法简便易行，成本低廉，无污染，多靶点作用安全有效。

技术实现思路

[0004]本专利技术目的在于提供一种角豆黄酮类化合物组合物的制备方法。
[0005]本专利技术另一目的在于角豆黄酮类化合物组合物的应用，具体具有有助于抗氧化、抗炎、抗肿瘤、提高免疫力等功效，可用于治疗心血管疾病等领域。
[0006]上述角豆黄酮类化合物制备方法包括以下步骤：
[0007]将角豆果荚粉碎过筛，优选地采用40
‑
80目药筛；
[0008]将角豆荚粗粉用醇提法提取，优选地先采用80
‑
100％乙醇提取2
‑
5次，再采用60
‑
80％乙醇溶液提取1
‑
3次。合并浓缩液得到浸膏；
[0009]将上述浸膏用蒸馏水分散过大孔吸附树脂D101进行吸附，蒸馏水洗脱除去糖类等杂质，再用90
‑
100％乙醇洗脱，得到非糖类小分子部位；
[0010]将上述非糖类小分子部位用200
‑
300目硅胶柱色谱梯度洗脱，优选地，洗脱系统采用石油醚
‑
乙酸乙酯和二氯甲烷
‑
甲醇，洗脱溶液体积比为石油醚
‑
甲醇1:1
‑
0:1、二氯甲烷
‑
甲醇7:1
‑
0:1，TLC检识合并相似流份；
[0011]将上述流份经200
‑
300目硅胶柱色谱或ODS柱色谱梯度洗脱，优选地，硅胶柱色谱洗脱溶液为石油醚
‑
乙酸乙酯(3:1
‑
0:1体积比)，ODS柱色谱洗脱溶液为甲醇
‑
水(15:85
‑
100:0体积比)，TLC检识合并相似流份；
[0012]将上述流份用Sephadex LH
‑
20色谱柱分离，优选地，流动相采用二氯甲烷
‑
甲醇(40
‑
60:40
‑
60体积比)洗脱；
[0013]再将流份采用半制备液相分离纯化，优选地，采用YMC
‑
Pack ODS
‑
A色谱柱柱Ⅰ或/和柱Ⅱ，柱Ⅰ内径为20mm，柱Ⅱ为内径为10mm。优选地流动相采用甲醇
‑
水(35
‑
60:40
‑
65体积比)；
[0014]本专利技术所述角豆黄酮类化合物提取方法可以得到一种或多种黄酮类化合物。
[0015]本专利技术所述角豆黄酮类化合物组合物包含3
‑
O
‑
甲基槲皮素、7，4
’‑
二羟基黄酮、槲皮苷、杨梅苷、杨梅素
‑3‑
O
‑
β
‑
D
‑
葡萄糖苷2种或多种。
[0016]本专利技术所述角豆黄酮类化合物组合物中化合物3
‑
O
‑
甲基槲皮素、7，4
’‑
二羟基黄酮、槲皮苷、杨梅苷、杨梅素
‑3‑
O
‑
β
‑
D
‑
葡萄糖苷比例为10
‑
35:15
‑
35：10
‑
35:5
‑
20:10
‑
25。
[0017]本专利技术所述角豆黄酮类化合物组合物作为食品、保健品、医药领域的生物活性筛选结果表明：
[0018]上述组合物具有良好的DPPH自由基清除能力，具有良好的抗氧化功效。
[0019]上述组合物能够显著降低LPS溶液诱导的RAW264.7小鼠巨噬细胞的炎性因子NO含量及肿瘤坏死因子TNF
‑
α、IL
‑
1β表达量，具有显著的抗炎、抗肿瘤功效。
[0020]上述组合物能够良好的提高斑马鱼T细胞荧光强度，具有有助于提高免疫力的功效。
[0021]上述组合物用于食品、保健品、医药领域，至少一种或多种。
[0022]上述应用所述产品至少具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、提高免疫力的功效一种或多种。
附图说明
[0023]图1为RAW264.7细胞表达的DPPH自由基清除率示意图。
[0024]图2为RAW264.7细胞表达的炎性因子NO的含量示意图。
[0025]图3为RAW264.7细胞表达的肿瘤坏死因子(TNF
‑
α)的含量示意图。
[0026]图4为RAW264.7细胞表达的白介素
‑
1(IL
‑
1β)的含量示意图。
[0027]图5为斑马鱼T细胞荧光强度影响示意图。
具体实施方式
[0028]以下实施例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。
[0029]实施例1各组分提取方法
[0030]取干燥的角豆树去种子果荚10份重量份，粉碎得到≥60目粗粉，加入粗粉7倍重量份的95％乙醇回流提取2次(每次1.5小时)，再用70％乙醇回流提取1次(1.5小时)，合并提取液浓缩得到浸膏5份重量份。用5份重量份的水将浸膏分散，经大孔吸附树脂D101进行吸附，用蒸馏水洗脱3个柱体积除去糖类等杂质，再用95％乙醇洗脱3个柱体积，回收溶剂后得到非糖类小分子部位。将得到的非糖类小分子部位用1份重量份的50％甲醇分散，依次使用石油醚、乙酸乙酯分别萃取5次，回收溶剂后分别得到石油醚部位、乙酸乙酯部位和水部位。
[0031]获得乙酸乙酯部位物质后，优选地，采用200目硅胶柱色谱分离，采用石油醚
‑
乙酸乙酯和二氯甲烷
‑
甲醇两个洗脱系统梯度洗脱，洗脱液石油醚
‑
乙酸乙酯体积比为1:1、3:1、0:1，洗脱液二氯甲烷
‑
甲醇体积比为7:1,、5:1、3:1、1:1、0:1，TLC薄层检识，合并相似流份。重复上述操作1
‑
3次。得到流份A
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种角豆黄酮类化合物组合物的制备方法，其特征在于包含3
‑
O
‑
甲基槲皮素、7，4
’‑
二羟基黄酮、槲皮苷、杨梅苷、杨梅素
‑3‑
O
‑
β
‑
D
‑
葡萄糖苷2
‑
5种黄酮类化合物。2.权利要求1所述角豆黄酮类化合物组合物，其特征在于具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤和提高免疫力的功效。3.权利要求1所述角豆黄酮类化合物制备方法，其特征在于包括以下步骤：取角豆果荚粉碎过药筛；采用醇提法提取浸膏，过大孔吸附树脂D101进行吸附，提取非糖类小分子部位；硅胶柱洗脱，优选地采用石油醚
‑
乙酸乙酯和二氯甲烷
‑
甲醇两个洗脱系统梯度洗脱；采用硅胶柱或ODS色谱柱梯度洗脱；依次采用Seph...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴成，李泽恩，李太娟，全小红，迪丽胡玛尔，
申请(专利权)人：融致丰生制药有限公司，
类型：发明
国别省市：