环状RNAcircTP63-N及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种环状RNA circTP63

【技术实现步骤摘要】
环状RNA circTP63
‑
N及其应用


[0001]本专利技术属于肿瘤分子生物学制备
，具体涉及一种新的环状RNA circTP63
‑
N及其应用。

技术介绍

[0002]在鼻咽癌中，已鉴定出大量的表达发生改变的环状RNA(circularRNA，circRNA)，这些circRNA可以调控肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移、放疗抵抗、耐药和肿瘤免疫等多种鼻咽癌恶性表型。比如circCAMSAP1可以通过SERPINH1调控c
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Myc进而促进鼻咽癌的增殖与侵袭迁移。circRNF13可以通过结合SUMO2促进GLUT1的降解，GLUT1作为葡萄糖转运蛋白的功能受到抑制，从而抑制糖酵解影响AMPK
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mTOR途径，最终抑制鼻咽癌的增殖与转移。过表达外泌体来源的circMYC可以降低放疗敏感性以及促进细胞增殖，而敲低circMYC则可以增强放疗敏感性并抑制细胞增殖。circIPO7通过与YBX1结合促进其磷酸化，进一步激活YBX1下游靶基因的转录，从而促进鼻咽癌的转移与顺铂耐药。尽管已有多项研究表明circRNA可以影响鼻咽癌的发生发展，但是目前的研究还不够深入，还需要进一步地探索更多的circRNA在鼻咽癌中的作用。
[0003]TP63是属于p53家族的一个转录因子。TP63已被发现存在多种亚型，这些亚型分为两类，一类是具有与p53同源的反式激活结构域的TAp63，一类是N端缺失的ΔNp63。这些亚型具有多种功能，广泛参与到增殖、分化、细胞死亡与存活、DNA损伤修复以及代谢等生物过程。此外，TP63与包括癌症在内的人类疾病紧密相关。
[0004]在包括鼻咽癌的多种癌症中有观察到TP63的过表达，且TP63与鼻咽癌的分化阶段密切相关。此外TP63在体内可与EBV核抗原5(EBNA5)相互作用，在EBV感染和鼻咽癌发展中发挥重要作用。
[0005]TP63也可以通过编码circRNA在肿瘤中发挥功能。已有报道TP63 pre
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mRNA的第10、11号外显子成环的circTP63促进多种肿瘤发生发展。在肺鳞状细胞癌和乳腺癌中证实了circTP63可作为ceRNA，竞争性地与miR
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873
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3p结合，最终上调FOXM1促进肿瘤的进展。而在肝癌中circTP63通过结合miR
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155
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5p，上调ZBTB18促进肝癌细胞的生长；它还可以通过结合miR
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217，上调EZH2促进胆癌细胞增殖和侵袭。
[0006]TP63的pre
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mRNA包含15个外显子，除了第10、11号外显子成环的circTP63，可能还存在着不同成环形式的circRNA，且在鼻咽癌中也有可能发挥着重要作用。本专利技术发现TP63pre
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mRNA第10、11号外显子成环的circTP63，在鼻咽上皮和鼻咽癌中表达水平都非常低，而由TP63pre
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mRNA第2
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4号外显子形成的环状RNA在正常鼻咽上皮中表达丰度较高，且在鼻咽癌中显著低表达，这一新型环状RNA我们将其命名为circTP63
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N，通过进一步研究我们证实在circTP63
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N可以抑制鼻咽癌细胞的增殖、侵袭和迁移，从而在鼻咽癌的恶性进程中发挥着重要的抑瘤基因作用。

技术实现思路

[0007]本专利技术的首要目的是提供一种新的环状RNA circTP63
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N，序列为：Tttcgtagaaaccccagctcatttctcttggaaagaaagttattaccgatccaccatgtcccagagcacacagacaaatgaattcctcagtccagaggttttccagcatatctgggattttctggaacagcctatatgttcagttcagcccattgacttgaactttgtggatgaaccatcagaagatggtgcgacaaacaagattgagattagcatggactgtatccgcatgcaggactcggacctgagtgaccccatgtggccacagtacacgaacctggggctcctgaacagcatggaccagcagattcagaacggctcctcgtccaccagtccctataacacagaccacgcgcagaacagcgtcacggcgccctcgccctacgcacagcccagctccaccttcgatgctctctctccatcacccgccatcccctccaacaccgactacccaggcccgcacagtttcgacgtgtccttccagcagtcgagcaccgccaagtcggccacctggacg，见SEQ ID NO.1。
[0008]本专利技术的第二个目的是提供检测所述的环状RNA circTP63
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N的试剂在制备鼻咽癌诊断或预后制剂中的应用。
[0009]进一步地，所述的检测环状RNA circTP63
‑
N的试剂包括PCR检测试剂或者原位杂交检测试剂。
[0010]更进一步地，所述的PCR检测试剂的引物序列如下：
[0011]上游引物：5'
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TCCACCTTCGATGCTCTCTC
‑
3'
[0012]下游引物：5'
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TTTGTCTGTGTGCTCTGGGA
‑
3'。
[0013]本专利技术的第三个目的是提供一种鼻咽癌诊断或预后制剂，包括检测所述的环状RNA circTP63
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N的试剂。
[0014]本专利技术的第四个目的是提供过表达所述的环状RNA circTP63
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N的试剂在制备鼻咽癌治疗制剂中的应用。
[0015]进一步地，过表达所述的环状RNA circTP63
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N的试剂包括过表达环状RNA circTP63
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N的载体。
[0016]本专利技术的第五个目的是提供一种鼻咽癌治疗制剂，包括过表达所述的环状RNA circTP63
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N的试剂。
[0017]进一步地，过表达所述的环状RNA circTP63
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N的试剂包括过表达环状RNA circTP63
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N的载体。
[0018]本专利技术还提供了circTP63
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N在制备与HSP90AB1蛋白结合促进LATS1/2和YAP1蛋白的结合、引起YAP1磷酸化并发生泛素化降解、导致YAP1入核减少、抑制下游细胞外基质相关基因INHBA、MMP3以及细胞周期相关基因CCNE2的表达的任一种制剂中的应用。
[0019]本专利技术中，circTP63
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N是TP63(NM_003722本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种环状RNA circTP63
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N，序列为：tttcgtagaaaccccagctcatttctcttggaaagaaagttattaccgatccaccatgtcccagagcacacagacaaatgaattcctcagtccagaggttttccagcatatctgggattttctggaacagcctatatgttcagttcagcccattgacttgaactttgtggatgaaccatcagaagatggtgcgacaaacaagattgagattagcatggactgtatccgcatgcaggactcggacctgagtgaccccatgtggccacagtacacgaacctggggctcctgaacagcatggaccagcagattcagaacggctcctcgtccaccagtccctataacacagaccacgcgcagaacagcgtcacggcgccctcgccctacgcacagcccagctccaccttcgatgctctctctccatcacccgccatcccctccaacaccgactacccaggcccgcacagtttcgacgtgtccttccagcagtcgagcaccgccaagtcggccacctggacg。2.检测权利要求1所述的环状RNA circTP63
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N的试剂在制备鼻咽癌诊断或预后制剂中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的检测权利要求1所述的环状RNA circTP63
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N的试剂包括PCR检测试剂或者原位杂交检测试剂。4.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：熊炜，王丹，郭灿，左思程，陈攀，向波，周鸣，范春梅，葛军尚，王芙艳，曾朝阳，李桂源，
申请(专利权)人：中南大学，
类型：发明
国别省市：