一种喜光花提取物杀线虫剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供一种喜光花提取物杀线虫剂及其制备方法和应用，具体涉及喜光花提取物在制备杀线虫制剂中的应用。通过对南方根结线虫致死率和孵化率的测定，发现喜光花中的乙萘酚对线虫不仅具有较好的杀虫活性，而且对南方根结线虫卵孵化也有明显的抑制作用。乙萘酚的杀线虫活性随着用药浓度的增加而增加，对线虫卵孵化的抑制率会随着处理时间和药剂浓度的增加随之增加。随之增加。

【技术实现步骤摘要】
一种喜光花提取物杀线虫剂及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及杀线虫剂领域，特别涉及一种喜光花提取物杀线虫剂及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]根结线虫被认为是危害最大的线虫之一，属于世界性病害，其造成的损失在整个栽培作物的损失中占90％以上，每年给全世界造成1700多亿美元的农业损失，阿维菌素、噻唑磷、氟吡菌酰胺等化学杀线虫剂一直被公认为是防治根结线虫最有效的办法，然而，在全球农业的快速发展中，传统的化学杀线虫剂的施药量和施药次数不断增加导致了根结线虫抗药性的产生，使得根结线虫的防治成本相应增加，除此之外，化学杀线虫剂在杀灭有害线虫的同时，也杀伤了大量天敌，破坏了生态平衡，污染了人类的生存环境。化学杀线虫剂的施用越来越不符合现代人类绿色消费的理念，因此开发具有新的杀线虫机理的绿色杀线虫剂变得越来越重要。
[0003]植物源农药是植物自身防御功能与有害生物和环境胁迫相适应演变、协同进化的结果，是从植物中提取出来的、由植物产生的次生代谢产物，具有选择性高、对环境友好、不易产生抗性等特点，符合现代农药与环境和谐相容的要求。近年来，从植物中提取天然杀线虫活性物质的研究逐渐引起国内外学者的兴趣，但目前植物源化合物在根结线虫防治中应用进展缓慢，因此亟待挖掘和应用高效杀线虫植物防治根结线虫。
[0004]喜光花是灌木，为大戟科喜光花属植物，是海南特有种植物，目前国内外学者对喜光花的研究较少，宋小平等用GC
‑
MS联用确定了喜光花叶挥发油中主要含烷、烯和醇类等19种化学成分；阚素琴等用GC
‑
MS联用确定了喜光花果挥发油中的32种成分，主要成分为酯、酮、烯、醇类；唐贝等研究发现喜光花叶中含有抗肿瘤成分，从喜光花叶中分离得到36种化学成分，其中包含酸、酮、酯、醇以及生物碱类化合物。现有研究结果表明喜光花可能存在抗肿瘤活性，但对喜光花的农用活性，尤其是杀线虫活性尚未见有人研究报道，因此研究喜光花的杀线虫活性极有意义。

技术实现思路

[0005]鉴以此，本专利技术提出一种喜光花的提取物杀线虫剂及其制备方法和应用。
[0006]本专利技术的技术方案是这样实现的：
[0007]喜光花提取物或者乙萘酚在制备杀线虫剂中的应用。
[0008]进一步的，所述乙萘酚的施用浓度为100μg
·
mL
‑
1以上。
[0009]进一步的，喜光花提取物或者乙萘酚在制备植物杀线虫剂中的应用。
[0010]进一步的，喜光花提取物或者乙萘酚在制备辣椒苗和番茄苗杀线虫剂中的应用。
[0011]进一步的，所述线虫为南方根结线虫(Meloidogyne incognita)。
[0012]一种喜光花提取物杀线虫剂的制备方法，所述喜光花提取物按照以下方法制备：
[0013]S1.将喜光花叶在45
‑
55℃下干燥3
‑
5d、粉碎，加入溶剂中，制得粗提物；喜光花叶
与溶剂的质量比为10～15:1；
[0014]S2.将步骤S1中制得的粗提物溶于水中，制得粗提物水溶液，再用有机溶剂分别萃取3～5次制得有机相，将有机相在40～50℃真空条件下浓缩，制得有机溶剂萃取物；
[0015]S3.用有机溶剂体系对步骤S2中制得的有机溶剂萃取物进行柱色谱分离，制得分离物；
[0016]S4.将步骤S3中制得的分离物加入凝胶柱中，加入洗脱剂等度洗脱，制得馏分；
[0017]S5.将步骤S4中制得的馏分加入半制备液相色谱仪，进一步纯化，制得喜光花提取物；所述喜光花提取物包含活性成分乙萘酚。
[0018]进一步的，步骤S1中所述溶剂为甲醇、乙酸乙酯、石油醚、丙酮、二氯甲烷或水中至少一种；步骤S2中所述有机溶剂为石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇的一种或多种。
[0019]进一步的，步骤S3中所述有机溶剂体系为石油醚/乙酸乙酯、石油醚/氯仿或石油醚/正丁醇中至少一种；有机溶剂体系中两种组分的体积比为1:4～6。
[0020]进一步的，步骤S4中所述凝胶柱采用羟丙基葡聚糖凝胶柱；所述洗脱剂为甲醇、乙醇或二氯甲烷中至少一种；所述洗脱剂的体积浓度为90％～100％。
[0021]进一步的，步骤S5中所述流动相为甲醇和水，流动相中甲醇和水的体积比为55～65：33～45，流动相流速为4～6mL/min。
[0022]与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
[0023](1)本专利技术首次报道了喜光花提取物乙萘酚的杀线虫活性，为开发具有新的杀线虫机理的绿色杀线虫剂提供了新的资源。
[0024](2)本专利技术的喜光花的提取物杀线虫剂不仅具有优异的离体杀线虫活性，而且对线虫卵孵化也有明显的抑制作用，具有高效、毒性低、持续性好的优点，有效防治辣椒苗和番茄苗中南方根结线虫病害。
[0025](3)本专利技术提供了喜光花叶粗提物的提取方法和活性成分的分离方法，有效提升活性化合物的纯度，提高喜光花提取物的杀线虫效果。
具体实施方式
[0026]为了更好理解本专利技术
技术实现思路
，下面提供具体实施例，对本专利技术做进一步的说明。
[0027]本专利技术实施例所用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
[0028]本专利技术实施例所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0029]实施例1
‑
喜光花提取物杀线虫剂的制备方法
[0030]S1.将5kg喜光花叶在45℃下干燥5d、粉碎，加入500g甲醇溶液中，制得400g甲醇粗提物；
[0031]S2.将步骤S1中制得的400g甲醇粗提物溶于2L水中，制得甲醇粗提物水溶液，再用2L石油醚分别萃取5次制得有机相，将有机相在40℃真空条件下浓缩，制得20g石油醚萃取物；
[0032]S3.用体积比为1:5的石油醚/乙酸乙酯溶剂体系对步骤S2中制得的20g石油醚萃取物进行柱色谱分离，制得2.1g分离物；
[0033]S4.将步骤S3中制得的2.1g分离物加入Sephadex LH
‑
20凝胶柱中，加入体积分数为100％的甲醇洗脱剂等度洗脱，流速3mL/min，洗脱150min，制得400mg馏分；
[0034]S5.将步骤S4中制得的400mg馏分加入半制备液相色谱仪，流动相为体积分数60:40的甲醇和水，流速5mL/min，洗脱时间9min，进一步纯化，制得20mg喜光花提取物；所述喜光花提取物包含活性成分乙萘酚。
[0035]实施例2
‑
喜光花提取物杀线虫剂的制备方法
[0036]S1.将5kg喜光花叶在50℃下干燥4d、粉碎，加入500g甲醇溶液中，制得400g甲醇粗提物；
[0037]S2.将步骤S1中制得的400g甲醇粗提物溶于2L水中，制得甲醇粗提物水溶液，再用2L石油醚分别萃取4次制得有机相，将有机相在45℃真空条件下浓缩，制得20g石油醚萃取物；
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.喜光花提取物或者乙萘酚在制备杀线虫剂中的应用。2.如权利要求1中所述的应用，其特征在于，所述乙萘酚的施用浓度为100μg
·
mL
‑
1以上。3.如权利要求1或2中所述的应用，其特征在于，喜光花提取物或者乙萘酚在制备植物杀线虫剂中的应用。4.如权利要求1或2中所述的应用，其特征在于，喜光花提取物或者乙萘酚在制备辣椒苗和番茄苗杀线虫剂中的应用。5.如权利要求1中所述的应用，其特征在于，所述线虫为南方根结线虫(Meloidogyne incognita)。6.一种喜光花提取物杀线虫剂的制备方法，其特征在于，所述喜光花提取物按照以下方法制备：S1.将喜光花叶在45
‑
55℃下干燥3
‑
5d、粉碎，加入溶剂中，制得粗提物；喜光花叶与溶剂的质量比为10～15:1；S2.将步骤S1中制得的粗提物溶于水中，制得粗提物水溶液，再用有机溶剂分别萃取3～5次制得有机相，将有机相在40～50℃真空条件下浓缩，制得有机溶剂萃取物；S3.用有机溶剂体系对步骤S2中制得的有机溶剂萃取物进行柱色谱分离，制得分离物...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙然锋，张羲，王帅，胡展，谢佳，
申请(专利权)人：海南大学，
类型：发明
国别省市：