柔弱斑种草提取物在制备抗肿瘤药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种柔弱斑种草提取物在制备抗肿瘤药物中的应用，制备方法为取柔弱斑种草的干燥全草，水洗、干燥后剪成小段，5

【技术实现步骤摘要】
柔弱斑种草提取物在制备抗肿瘤药物中的应用


[0001]本专利技术涉及抗肿瘤药物制备
，更具体地说是涉及柔弱斑种草提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。

技术介绍

[0002]肿瘤的治疗方法主要有手术治疗、药物化疗、放疗、免疫治疗、中医治疗等，而化疗是目前针对恶性肿瘤治疗的主要方法。化疗药物的主要类型包括细胞凋亡诱导剂、肿瘤细胞毒制剂、细胞衰老诱导剂、肿瘤耐药逆转剂、细胞分化诱导剂、肿瘤化学预防剂以及肿瘤转移抑制剂等。抗肿瘤治疗之所以困难是由于化疗的疗效不确定，且不良反应显著，因此寻找新的治疗靶点、抗癌活性药物及研究方法显得尤为重要。
[0003]抗肿瘤新药筛选的主要来源包括天然产物有效成分、新化学物质的合成、生物治疗药物以及老药新用。中医药在肿瘤防治中的突出疗效使其越来越受患者欢迎，中医药正在用其特色理论努力改变肿瘤防治的现状。中药作为中医发挥疗效的主要物质基础，是目前抗肿瘤新药筛选天然产物的主要来源之一。
[0004]柔弱斑种草，又名细叠子草，雀灵草，小马耳朵，为紫草科植物柔弱斑种草的全草，以全草入药，味微苦、涩，性平，有小毒，归肺经，具有止咳、止血的功效。民间应用历史悠久，疗效确切。走访收集资料期间发现有许多民老中医在临床治疗中给予应用，且疗效显著，还有一些有经验的老人也会经常自己采摘用作不时之需。另外，江苏省扬州市以及关中等多地区进行麦田杂草危害调查，结果显示均具有柔弱斑种草，其本身并无大害且具有一定的药用价值，却被视为杂草危害农田，严重颠覆了柔弱斑种草的药用价值。柔弱斑种草作为《民间常用草药汇编》及《中华本草》收录药材，如今却沦落为杂草行列，有失其用途。
[0005]因此，如何将柔弱斑种草的药用价值发挥出来，并制备提取物将其应用于肿瘤治疗中是本领域技术人员亟需解决的技术问题。

技术实现思路

[0006]有鉴于此，本专利技术提供了一种柔弱斑种草提取物的制备方法，并将提取到的提取物应用于制备抗肿瘤的药物中，开发了柔弱斑种草的药用价值，同时为肿瘤的治疗和新药的研发提供了理论基础。
[0007]为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0008]柔弱斑种草提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。
[0009]优选地，所述肿瘤包括白血病细胞HL
‑
60、肺癌细胞A549、肝癌细胞SMMC
‑
7721、乳腺癌细胞MCF
‑
7和结肠癌细胞SW480。
[0010]作为与上述技术方案相同的专利技术构思，本专利技术还请求保护一种柔弱斑种草提取物的制备方法，过程包括：
[0011](1)提取：取柔弱斑种草的干燥全草，水洗、干燥后剪成小段，5
‑
10倍量溶剂恒温回流提取2
‑
4次，每次1
‑
2.5h，合并提取液，减压浓缩，得总提物；
[0012](2)萃取：向步骤(1)所得总提物中加入1
‑
3倍质量的蒸馏水混悬，超声振荡器助悬，得混悬液，然后加入混悬液2
‑
5倍体积的石油醚萃取2
‑
4次，合并石油醚萃取液；所得水层用2
‑
5倍体积的乙酸乙酯萃取2
‑
4次，合并乙酸乙酯萃取液，减压回收溶剂，得到柔弱斑种草提取物。
[0013]优选地，步骤(1)中，所述小段的长度为0
‑
3cm。
[0014]优选地，步骤1)中，所述干燥为50℃恒温干燥箱干燥。
[0015]优选地，步骤(1)中，所述溶剂为95％乙醇、75％乙醇、甲醇中的一种。
[0016]优选地，步骤(1)中，1kg柔弱斑种草全草药材加入提取溶剂10L，恒温回流提取3次，每次回流2h。
[0017]优选地，步骤1)中，恒温回流的温度为80℃。
[0018]经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本专利技术的柔弱斑种草提取物是以单味干燥的柔弱斑种草全草为原料(江苏省宿迁市宿豫区曹集乡田间，经广西中医药研究黄云峰副研究员鉴定为为紫草科植物柔弱斑种草)，通过回流、提取、浓缩等步骤制备得到，其提取工艺简单，成本低廉。抗肿瘤活性筛选实验结果显示，本专利技术的柔弱斑种草提取物对5种筛选肿瘤细胞毒株均具有明显的抑制作用，其中对肺癌A459及肝癌SMMC
‑
7721肿瘤细胞菌株的抑制作用较强，具备较大开发潜力。不但可以解决“杂草问题”，利于环境保护，还能带动地方经济发展，为临床提供大量更加廉价且作用效果显著的中药材。
附图说明
[0019]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。
[0020]图1附图为不同浓度萃取物溶液对肿瘤细胞的抑制情况图；
[0021]图2附图为乙酸乙酯部总离子流色谱图；
[0022]图3附图为Calycosin的裂解途径(黄酮类)；
[0023]图4附图为5,7
‑
Dihydroxy
‑4‑
methylcoumarin的裂解途径(香豆素类)；
[0024]图5附图为Caffeic Acid的裂解途径(有机酸类)；
[0025]图6附图为Vitexin2"
‑
O
‑
β
‑
D
‑
Glucoside的裂解途径(苷类)。
具体实施方式
[0026]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0027]实施例1
[0028]一种柔弱斑种草提取物的制备方法，过程为：取柔弱斑种草的干燥全草2kg，水轻洗去沙，50℃恒温干燥箱干燥后剪成小段，长度控制在3cm以内，每千克药材加入10倍量的95％乙醇提取溶剂，80℃恒温回流提取3次，每次2h，得95％乙醇溶剂提取液；合并提取液，
Muench法)计算化合物的IC
50
值。
[0043]实验结果
[0044]体外抗肿瘤活性筛选结果显示其对5种肿瘤细胞毒株增殖均具有较明显的抑制作用，对肺癌及肝癌细胞抑制作用最强，所有抑制作用均为微克级别。如表1，本专利技术萃取物抑制HL
‑
60细胞毒株增殖IC
50
为56.72μg/mL，A549为41.13μg/mL，SMMC
‑
7721为36.69μg/mL，MDA
‑
MB
‑
231为48.63μg/mL，SW480为44.48μg/mL。如图2所示，当萃本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.柔弱斑种草提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肿瘤包括白血病细胞HL
‑
60、肺癌细胞A549、肝癌细胞SMMC
‑
7721、乳腺癌细胞MCF
‑
7和结肠癌细胞SW480。3.一种柔弱斑种草提取物的制备方法，其特征在于，过程包括：(1)提取：取柔弱斑种草的干燥全草，水洗、干燥后剪成小段，5
‑
10倍量溶剂恒温回流提取2
‑
4次，每次1
‑
2.5h，合并提取液，减压浓缩，得总提物；(2)萃取：向步骤(1)所得总提物中加入1
‑
3倍质量的蒸馏水混悬，超声振荡器助悬，得混悬液，然后加入混悬液2
‑
5倍体积的石油醚萃取2
‑
4次，合并石油醚萃...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵小超，纪利，廖承谱，周燕萍，商勋，万广闻，
申请(专利权)人：宿迁市中医院，
类型：发明
国别省市：