SQSTM1及其在癌症疗法中的用途制造技术

本发明专利技术涉及SQSTM1/p62蛋白用于调节和预测对以下项的反应的用途：

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】SQSTM1及其在癌症疗法中的用途
[0001]本专利技术涉及蛋白质SQSTM1及其在疗法中的用途。
[0002]高等真核生物中的免疫系统对外来病原体和感染细胞的侵袭起着核心作用。在没有外部损伤的情况下，免疫系统还通过检测在细胞表面的异常抗原或异常过表达的蛋白质来仔细地调查并有效地识别新生的转化细胞。
[0003]经典地，先天免疫细胞(自然杀伤细胞(NK)、树突细胞(DC)、多形核白细胞和巨噬细胞)被募集作为通过细胞溶解杀伤来攻击转化细胞的第一道防线。然后，抗原呈递细胞(APC)(诸如DC)加工肿瘤抗原并迁移至淋巴结，以引发由B淋巴细胞和T淋巴细胞介导的更集中的适应性免疫反应。在抗原通过MHC
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II和MHC
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I受体分别呈递给幼稚CD4+和CD8+T细胞时，这些细胞经历克隆扩增和分化以发挥效应子功能或记忆功能。T细胞功能在分子水平上由TCR依赖性和细胞因子依赖性信号传导级联指挥，这些信号传导级联在细胞核中结束并激活谱系特异性转录因子。这导致产生了一大组发挥不同功能并且特征在于特定的表面标志物和核标志物以及分泌的效应分子的T淋巴细胞。
[0004]在T细胞亚群中，
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系列杀伤细胞
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明确地是CD8+细胞溶解T淋巴细胞(CTL)，这些细胞迁移至肿瘤位点并与Th1和Th2 CD4+辅助细胞协作以攻击和杀伤转化细胞。尽管CD4+细胞通过产生免疫刺激性环境而
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帮助
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，但CTL通过分泌Fas配体和促炎症肿瘤坏死因子(TNF)以及含有穿孔素(成孔蛋白)和粒酶(丝氨酸蛋白酶)的细胞毒性颗粒而在靶细胞中诱导凋亡性死亡。在趋化因子中，许多研究强调IFN
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γ在肿瘤根除中的重要性。该细胞因子由活化的CD4和CD8 T细胞释放，并且控制APC的发育和功能。凋亡的肿瘤细胞然后被快速检测并被专职吞噬细胞诸如巨噬细胞和树突细胞吞噬，以将肿瘤抗原呈递给CTL并避免过度的炎症。此外，CD4+调节性T细胞(Treg)分泌转化生长因子β(TGF
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β)、IL
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10和IL
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35，它们抑制促炎症反应，从而限制组织损伤。理想地，在细胞毒性和调节活性之间的调谐平衡允许肿瘤细胞去除并且保持周围健康组织的完整性。
[0005]理论上，有效的免疫监视将产生成功的T细胞启动和肿瘤根除。
[0006]然而，临床诊断的肿瘤证明肿瘤细胞能够逃避免疫监视。在免疫抑制策略中，肿瘤细胞操纵T细胞共抑制途径以规避抗肿瘤反应。在炎症期间，这些共抑制途径(也称为
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免疫检查点
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)在免疫和上皮细胞上表达，以平衡共刺激信号、抑制T细胞功能和避免过度的细胞毒性。
[0007]程序性死亡蛋白
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1(PD
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1)及其配体PD
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L1和PD
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L2形成到目前为止最著名的免疫抑制对。PD
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L1在以下多种癌症的细胞表面过表达：黑色素瘤、神经胶质瘤、肺癌、结肠癌、胰腺癌、乳腺癌、肠癌、肾癌、膀胱癌和卵巢癌，并且与差的总体存活期相关。当与其配体PD
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L1结合时，PD
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1信号传导降低T细胞活化(IFN
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γ产生)、糖酵解和细胞周期进展。尽管这种重新编程潜在的信号传导事件仍有待探索，但现在清楚的是，所产生的功能障碍的T细胞可通过阻断PD
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1/PD
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L1相互作用来恢复活力。
[0008]关于这些检查点的知识已导致科学家使用它们来开发针对肿瘤的新疗法：检查点抑制剂免疫疗法。
[0009]免疫检查点抑制剂(ICI)已经证明在治疗几种晚期癌症和延长总体存活期方面有
效，特别是PD
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1/PD
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L1阻断抗体，这些抗体恢复肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)并构成抵抗肿瘤发展的有价值的武器。
[0010]不幸的是，尽管在癌症患者中观察到最高的临床益处，在霍奇金病中具有接近87％的客观反应并且在结缔组织增生性黑色素瘤中具有70％的客观反应，但是绝大多数其他癌症诸如肺癌和黑色素瘤最多经历25％
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30％的检查点抑制剂免疫疗法功效。所得的80％的癌症患者遭受对ICI的先天性或获得性抗性。
[0011]因此，需要提供可帮助病理学家确定检查点抑制剂免疫疗法对确定的肿瘤是否有效的生物标志物。
[0012]因此，本专利技术的目的是避免现有技术的这种缺陷。
[0013]本专利技术的一个目的是提供已知的蛋白质作为检查点抑制剂免疫疗法的功效的预测性标志物的用途。
[0014]本专利技术的另一个目的是提供一种预测或有效地治疗可能对这类免疫疗法有抗性的肿瘤的方法。
[0015]本专利技术的另一个目的是提供一种简单的即用型试剂盒，以确定肿瘤将是否对单独或组合的免疫疗法有反应。
[0016]因此，本专利技术涉及SQSTM1(也称为p62或称为SQSTM1/p62蛋白)用于调节(优选在体外)肿瘤细胞对以下项的反应的用途：
[0017]‑
免疫疗法，优选针对免疫检查点抑制剂(也称为ICI)的免疫疗法；
[0018]‑
使用不是干扰DNA修复的药剂的化学疗法；或者
[0019]‑
免疫疗法(优选ICI)和化学疗法的组合。
[0020]本专利技术基于本专利技术人意想不到的观察结果，即SQSTM1/p62是对抗癌疗法有反应的中心标志物。因此，通过调节SQSTM1/p62蛋白的表达，有可能改变或调节肿瘤细胞对免疫疗法、使用不是干扰DNA修复的药剂的化学疗法、或免疫疗法和化学疗法的组合的反应。
[0021]这有利地意味着当SQSTM1存在或不存在或处于不同水平时，肿瘤细胞在体外对使用上述疗法的治疗可作出不同的反应。
[0022]本专利技术涉及一种包含SQSTM1/p62蛋白的组合物，其用于调节(优选在体外)肿瘤细胞的：
[0023]‑
免疫疗法，优选针对免疫检查点抑制剂(也称为ICI)的免疫疗法；
[0024]‑
使用不是干扰DNA修复的药剂的化学疗法；或者
[0025]‑
免疫疗法(优选ICI)和化学疗法的组合。
[0026]作为第一个自噬衔接蛋白而著名的死骨片(Sequestosome)1蛋白或SQSTM1/p62最重要地是控制包括细胞生长、细胞迁移和细胞存活在内的多种细胞功能的信号传导中枢。SQSTM1/p62不具有内在信号传导功能，但与激酶、泛素连接酶和其他蛋白质相互作用以驱动信号传导途径。
[0027]据报道SQSTM1/p62蛋白在癌症中失调，但从未教导或暗示SQSTM1/p62蛋白可能是用于评价对抗癌疗法的抗性或敏感性的中心标志物。
[0028]在本专利技术中，
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化学疗法
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意指使用化学治疗本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.SQSTM1/p62蛋白用于体外调节肿瘤细胞对以下项的反应的用途：
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针对免疫检查点抑制剂也称为ICI的免疫疗法；或者
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ICI和化学疗法的组合。2.根据权利要求1所述的用途，其中所述SQSTM1/p62蛋白包含如SEQID NO：1所示的氨基酸序列或基本上由所述氨基酸序列组成或由所述氨基酸序列组成。3.一种用于体外预测肿瘤对疗法的抗性的方法，所述疗法是ICI或者ICI和化学疗法的组合，所述方法包括：
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评价源自所述肿瘤的生物样品中SQSTM1/p62蛋白的存在或不存在或量，
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将所述SQSTM1/p62蛋白的存在、不存在或量与对照样品中所述SQSTM1/p62蛋白的量进行比较，
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结论是*当所述生物样品中SQSTM1/p62蛋白不存在或低于或等于在所述对照样品中获得的量时，所述肿瘤将可能对所述疗法有抗性，以及*当所述生物样品中SQSTM1/p62蛋白存在或高于对照水平时，所述肿瘤将可能对所述疗法敏感。4.根据权利要求3所述的方法，其中在所述生物样品中，优选地在组织活检或液体活检中，原位评价所述SQSTM1/p62蛋白的存在或不存在。5.一种用于体外预测患有肿瘤的患者的存活率的方法，所述方法包括：
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评价源自所述肿瘤的生物样品中SQSTM1/p62蛋白的存在或不存在或量，
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将所述SQSTM1/p62蛋白的存在、不存在或量与对照样品中评价的所述SQSTM1/p62蛋白的量进行比较，
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结论是*当所述生物样品中的SQSTM1/p62不存在或低于或等于在所述对照样品中获得的量时，则所述患者在5年后将具有高于80％的存活率，以及*当所述生物样品中的SQSTM1/p62存在或高于在所述对照样品中获得的量时，则所述患者在5年后将具有低于70％的存活率。6.根据权利要求5所述的方法，其中将以下项的存在、不存在或量：
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PD
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L1蛋白，和
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CD8+T淋巴细胞，与SQSTM1/p62蛋白的存在或不存在或量同时评价，并且与在对照样品中评价的相应PD
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L1蛋白和CD8+T淋巴细胞的存在、不存在或量进行比较，并且其中当所述生物样品中的SQSTM1/p62蛋白、PD
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L1蛋白和CD8+T淋巴细胞存在或高于在所述对照样品中获得...

【专利技术属性】
技术研发人员：B，
申请(专利权)人：国家医学研究和健康研究所蔚蓝海岸大学，
类型：发明
国别省市：