WARS中和抗体及其用途制造技术

本发明专利技术涉及与色氨酰tRNA合成酶(Tryptophanyl

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】WARS中和抗体及其用途


[0001]本专利技术涉及与WARS蛋白特异性结合的抗体及其用途。

技术介绍

[0002]氨基酰tRNA合成酶(Aminoacyl
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tRNA Synthetase，ARS)为介导氨基酸特异性地与tRNA(tRNA)结合的反应的酶，在蛋白质生成中起到中枢性作用。近来，已知ARS除其本质功能以外，还与细胞凋亡(Apoptosis)、血管生成(Angiogenesis)、炎症反应等多种生命现象相关。尤其，人色氨酰tRNA合成酶1(Tryptophanyl
‑
tRNA Synthetase1，WARS1)的通常功能为与识别色氨酸的tRNA(tRNA)连接来合成蛋白质的氨基酰tRNA合成酶，近来的关注点是WARS1在宿主对感染的防御机制方面所起的作用。过去，本专利技术人报告了在感染后几分钟内单核细胞在不从头(de novo)合成的情况下立刻向细胞外空间分泌WARS1(Young Ha Ahn.et al.Secreted Tryptophanyl
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tRNA Synth etase as a primary defence system against infection.Nature Microbio logy 2:16191(2016))。
[0003]TLR4和TLR2通过作为耐性配体的功能来分泌的WARS1通过激活巨噬细胞来诱导先天性的免疫激活。并且，WARS1启动包括肿瘤坏死因子α(TNF
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α)、白细胞介素6(IL
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6)、巨噬细胞炎性蛋白1α(MI P
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1α)、白细胞介素8(IL
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8)及γ干扰素(IFN
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γ)在内的前炎症细胞因子及趋化因子的生成，诱发中性粒细胞的浸润。然后，WARS1基因表达被γ干扰素激活而保持WARS1的持续分泌。与该发现一致的是，WARS1在败血症患者的血液中升得很高，但在无菌慢性炎症障碍中却非如此，确认到无关乎革兰氏阳性及阴性细菌、病毒及霉菌等抗原体类型地分泌。
[0004]为了治疗由上述细菌、病毒和/或霉菌引起的感染性炎症疾病，可以考虑开发对它们的抗体的战略，但包括WARS1在内的ARS在蛋白质结构上有太多的相似点，通过免疫反应获得的抗体对其他ARS也显出交叉反应，因此无法生产高敏感度的抗体的情况很多。
[0005]因此，切实需要开发可以在不与其他ARS发生交叉反应的情况下只与WARS1特异性结合来有效中和WARS1的抗体。
[0006]上述
技术介绍
中说明的事项仅用于增进对本专利技术的背景的理解，但不应认为上述事项相当于本专利技术所属
的普通技术人员已知的现有技术。

技术实现思路

[0007]技术问题
[0008]本专利技术人多次致力于发掘在败血症等感染性疾病患者中显著增加表达量的与WARS特异性结合的抗体或其片段，结果发掘出与WARS特异性结合且不与其他ARS类发生交叉反应的WARS检测及表达抑制能力突出的抗体，从而完成本专利技术。
[0009]因此本专利技术的目的在于，提供与色氨酰tRNA合成酶(Tryptopha nyl
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tRNA Synthetase，WARS)特异性结合的抗体或其片段。
[0010]本专利技术的再一目的在于，提供编码上述抗体或其片段的多核苷酸。
[0011]本专利技术的另一目的在于，提供包含上述多核苷酸的载体。
[0012]本专利技术的还有一目的在于，提供由上述载体转化的细胞。
[0013]本专利技术的又一目的在于，提供与WARS特异性结合的抗体或其片段的制备方法，包括在表达多核苷酸的条件下培养细胞来回收多肽的步骤。
[0014]本专利技术的又一目的在于，提供WARS的特异性检测方法，包括使上述抗体或其片段、多核苷酸、载体或细胞与试样接触的步骤。
[0015]本专利技术的又一目的在于，提供WARS的特异性检测用组合物，包含上述抗体或其片段、多核苷酸、载体或细胞。
[0016]本专利技术的又一目的在于，提供用于诊断感染性疾病的组合物，包含上述抗体或其片段、多核苷酸、载体或细胞。
[0017]本专利技术的又一目的在于，提供用于预防或治疗感染性疾病的药物组合物，包含上述抗体或其片段、多核苷酸、载体或细胞。
[0018]本专利技术的又一目的在于，提供用于预防或治疗感染性疾病的药物组合物，包含上述抗体或其片段、多核苷酸、载体或细胞以及额外的抗生素。
[0019]本专利技术的其他目的及优点将通过下述详细说明、专利技术要求保护范围以及附图得到进一步明确。
[0020]技术方案
[0021]根据本专利技术的一实施方式，本专利技术提供与色氨酰tRNA合成酶特异性结合的抗体或其片段。
[0022]本专利技术人多次致力于发掘在败血症等感染性疾病患者中显著增加表达量的与WARS特异性结合的抗体或其片段，结果发掘出与WARS特异性结合且不与其他ARS类发生交叉反应的WARS检测及活性抑制能力突出的抗体。
[0023]本说明书中的术语“WARS”是指色氨酰tRNA合成酶(Tryptoph anyl
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tRNA Synthetase)，也称为色氨酸tRNA连接酶(Tryptophan
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tRN A Ligase)、TrpRS、WRS等。WARS为介导氨基酸色氨酸与tRNA的氨酰化(aminoacylation)反应的酶。WARS在人体中通过WARS基因来编码，蛋白质的氨基酸序列与信使核糖核酸(mRNA)碱基序列公知为国际基因库登陆号(Genbank accession Number)NP_004175.2(蛋白质)、国际基因库登陆号NM_004184.3(信使核糖核酸(mRNA)碱基序列)等。WARS具有细胞质形式(Cytoplasmic form)(WARS1或色氨酰tRNA合成酶1(Tryptophanyl
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tRNA Synthetase 1)，细胞质(C ytoplasmic))与线粒体形式(Mitochondrial form)(WARS2或色氨酰t RNA合成酶2(Tryptophanyl
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tRNA Synthetase 2)，线粒体(Mitochon drial))的两种同型(Isoform)。
[0024]根据本专利技术的优选实例，本专利技术的WARS为WARS1。
[0025]本说明书中的术语“抗体”只要是本专利技术所属
的术语就可以在本说明书中交换来使用，是指具有与抗原特异性结合的抗原结合部位的分子。本说明书中使用的术语包括所有抗体以及任意片段(即，“抗原结合部分”)或其单链。根据本专利技术的一实例，“抗体”是指包含通过二硫键相结合的至少两个重链(H)与两个轻链(L)的糖蛋白或其抗原结合部分。根据本专利技术的再一实例，“抗体”是指包含单一可变区(结构域)，例如包含VH结构域的单链抗体。各重链由重链可变区(VH)与重链恒定区组成。通常，重链恒本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种与色氨酰tRNA合成酶特异性结合的抗体或其片段，其特征在于，包含序列表中序列1的重链可变区及序列表中序列2的轻链可变区。2.一种与色氨酰tRNA合成酶特异性结合的抗体或其片段，其特征在于，包含：重链可变区，包含序列表中序列3的重链CDR1、序列表中序列4的重链CDR2及序列表中序列5的重链CDR3；以及轻链可变区，包含序列表中序列6的轻链CDR1、序列表中序列7的轻链CDR2及序列表中序列8的轻链CDR3。3.根据权利要求1或2所述的与色氨酰tRNA合成酶特异性结合的抗体或其片段，其特征在于，上述抗体或其片段包含选自由序列表中序列21的CL序列、序列表中序列22的CH1序列、序列表中序列23的铰链序列、序列表中序列24的CH2序列及序列表中序列25的CH 3序列组成的组中的一种以上序列。4.根据权利要求1或2所述的与色氨酰tRNA合成酶特异性结合的抗体或其片段，其特征在于，上述片段为选自由Fab、F(ab')2、Fd、sdFv、Fv、dAb、scFv、sdAb及四聚体组成的组中的片段或者为上述片段与Fc的结合形式。5.一种多核苷酸，其特征在于，编码权利要求1或2所述的与色氨酰tRNA合成酶特异性结合的抗体或其片段。6.一种载体，其特征在于，包含权利要求5所述的多核苷酸。7.一种细胞，其特征在于，由权利要求6所述的载体转化。8.一种与色氨酰tRNA合成酶特异性结合的抗体或其片段的制备方法，其特征在于，包括在表达多核苷酸的条件下培养权利要求7所述的细胞来回收多肽的步骤。9.一种色氨酰tRNA合成酶的特异性检测方法，其特征在于，包括使权利要求1或2所述的与色氨酰tRNA合成酶特异性结合的抗体或其片段、编码上述抗体或其片段的多核苷酸、包含上述多核苷酸的载体或由上述载体转化的细胞与试样接触的步骤。10.一种色氨酰tRNA合成酶的特异性检测用组合物，其特征在于，包含权利要求1或2所述的与色氨酰tRNA合成酶特异性结合的抗体或其片段、编码上述抗体或其片段的多核苷酸、包含上述多核苷酸的载体或由上述载体转化的细胞。11.一种用于诊断感染性疾病的组合物，其特征在于，包含权利要求1或2所述的与色氨酰tRNA合成酶特异性结合的抗体或其片段、编码上述抗体或其片段的多核苷酸、包含上述多核苷酸的载体或由上述载体转化的细胞。12.根据权利要求11所述的用于诊断感染性疾病的组合物，其特征在于，上述感染性疾病为感染性炎症疾病。13.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈美琳，崔閠姬，
申请(专利权)人：株式会社美琳基因，
类型：发明
国别省市：