化学发光雄烯二酮缀合物制造技术

公开了化学发光雄烯二酮缀合物。这些化学发光雄烯二酮缀合物可用作免疫测定中的化学发光示踪剂，用于定量和鉴定某些分析物。用于定量和鉴定某些分析物。用于定量和鉴定某些分析物。

【技术实现步骤摘要】
化学发光雄烯二酮缀合物
[0001]本专利申请是中国专利申请号为201880026848.8，申请日为2018年2月23日、同题的专利申请的分案申请。
[0002]1.本申请对2017年2月23日提交的美国临时申请No.62/462,904(通过引用以其整体并入本文)要求优先权。


[0003]2.本专利技术涉及化学发光雄烯二酮缀合物。这些化学发光雄烯二酮缀合物用作免疫测定中的化学发光示踪剂，用于定量和鉴定样品中的特定分析物。

技术介绍

[0004]3.循环血清中各种雄激素的浓度与各种各样的生理和行为系统直接相关。具体而言，频繁测量血清中雄激素雄烯二酮的浓度，用以检测卵巢和肾上腺来源的雄激素分泌肿瘤，评估性
‑
类固醇代谢的先天缺陷或青春期障碍。升高的雄烯二酮水平与诸如男性化肾上腺增生和多囊卵巢综合征之类的疾病相关联。此外，样品中雄烯二酮的测量提供了比其它雄激素如17
‑
羟基孕酮提高的疾病检测准确性。另外，雄烯二酮被世界反兴奋剂组织(World Anti
‑
Doping Agency)和奥林匹克运动会禁止。因此，血清雄激素的测量在包括成人患者、老年患者、儿科内分泌患者和肿瘤患者在内的各种各样患者中是重要的。
[0005]4.以下例示内源性4
‑
雄烯二酮(
″
A4
″
)激素的结构，其中它的19个碳中的每一个被标记。
[0006][0007]5.其它雄烯二酮包括激素原5
‑/>雄烯二酮和1
‑
雄烯二酮，它们也被包括在世界反兴奋剂组织的禁用物质名单中。应理解，雄烯二酮的指称包括雄烯二酮，其包括A4、5
‑
雄烯二酮和1
‑
雄烯二酮。
[0008]6.已经开发了各种技术用于检测样品中的雄烯二酮浓度。分析方法可以使用与气相层析(GC)或液相层析(LC)联用的质谱(MS)。例如，Kushnir，M.等，Clin.Chem.56，1138(2010)(通过引用以其整体并入本文)中描述了雄烯二酮和其它类固醇的液相层析
‑
串联质谱(
″
LC
‑
MS/MS
″
)测定。然而，由于这些方法需要昂贵的设备和较长的运行时间，它们用于测量多个样品的效用是有限的。雄烯二酮浓度也已用免疫测定来测量，免疫测定提供了针对基于MS的分析的成本有效、过于简单化且快速的的替代方法。这些测定，像IMMULITE2000雄烯二酮测定或其它酶联免疫吸附测定(“ELISA”)，以竞争性结合形式操作，其中待测量样品中的雄烯二酮与酶缀合的雄烯二酮竞争结合到有限数量的抗体上。通常，雄烯二酮与碱性
磷酸酶或辣根过氧化物酶缀合。在与包含有限数量的能够与雄烯二酮或酶联雄烯二酮缀合的位点的固相形成结合复合物之后，结合复合物可以被分离并经历给出可测量的变化(例如颜色)。一旦去除固相并观察到可测量的变化，即可推断样品中雄烯二酮的浓度。然而，如Fanelli，F.等，Steroids 76，244(2011)(通过引用以其整体并入本文)中显示的，LC
‑
MS/MS测定与ELISA测定的比较表明，与LC
‑
MS/MS相比，通过ELISA方法测量的雄烯二酮浓度导致测量的雄烯二酮浓度几乎增加2.5倍。此类过高估计归因于免疫测定中所用的酶联雄烯二酮缀合物的校准误差和交叉反应性，导致ELISA测定的低灵敏度和准确性。
[0009]7.本领域中对于改进的雄烯二酮免疫测定存在着持续需求。因此本专利技术的一个目的是提供能够在免疫测定中使用的与雄烯二酮缀合的化学发光化合物，其提供样品中雄烯二酮的浓度的准确且精确的测量。

技术实现思路

[0010]8.已发现，化学发光吖啶鎓化合物可与雄烯二酮缀合，以在免疫测定中提供比ELISA测量更准确的结果。本文提供雄烯二酮的可检测缀合物和使用雄烯二酮的可检测缀合物的方法。
[0011]9.在本专利技术的一方面中，提供具有以下结构的雄烯二酮的可检测缀合物，其包含与化学发光部分缀合的雄烯二酮部分：
[0012]A
………
L
………
Ψ
ꢀꢀꢀ
(I)
[0013]其中A是雄烯二酮(例如A4、5
‑
雄烯二酮、1
‑
雄烯二酮等)；
[0014]L是连接基；以及
[0015]Ψ是包含吖啶鎓的化学发光部分。在一些实施方案中，Ψ可以是吖啶鎓酯或吖啶鎓磺酰胺。在一些实施方案中，A是一价雄烯二酮基团。在优选的实施方案中，A可以是4
‑
雄烯二酮(“A4”)的基团。在大多数实施方案中，A、L和Ψ彼此共价键合。
[0016]在大多数实施方案中，L具有结构
‑
L
C
‑
(Z
L
)
z
‑
，其中
[0017]“z”是0或1；
[0018]L
C
是二价C1‑
35
烷基、烯基、炔基、芳基或芳基烷基，其任选被1至20个杂原子取代；以及
[0019]Z
L
是具有以下结构的两性离子连接基团：
[0020][0021]“m”是0(即，它是键)或1；
[0022]“n”和“p”在每次出现时独立为0(即，它是键)至10的整数；
[0023]X
a
是阴离子基团；
[0024]R
L
是C1‑
20
二价烃基(例如烷基、烯基、芳基、炔基、芳基烷基等)，其任选被1
‑
10个杂原子(例如N、O、S、Cl、F、Br等)取代；以及
[0025]R
’
是氢或C1‑
10
烷基。
[0026]10.通常，Ψ具有式(II)的结构：
[0027][0028]其中Ω是CH、O或N；
[0029]Y选自
‑
R或
‑
R
L
‑
Z，或者在其中Ω是O的情况下，则Y不存在；
[0030]Y
’
或者不存在(即，它是键)，或者选自
‑
L1‑
、
‑
R
L
_、
‑
R
L
‑
L1‑
、
‑
L1‑
L1‑
、
‑
L1‑
R
L
‑
、
‑
L1‑
R
L
‑
L1或
‑
R
L_
L1‑
R
L
‑
；且Y
’
包含一个或更多个与L
C
或Z
L...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.具有以下结构的化合物：2.权利要求1的化合物，具有以下结构的化合物：3....

【专利技术属性】
技术研发人员：郑一枫，L帕克，J德里斯科尔，赵志坚，P多诺万，
申请(专利权)人：美国西门子医学诊断股份有限公司，
类型：发明
国别省市：