标记试剂、免疫胶体金层析试纸条、其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及生物检测领域，尤其涉及标记试剂、免疫胶体金层析试纸条、其制备方法和应用。本发明专利技术提供了标记试剂，包括pH调节剂和捕获探针；所述捕获探针包括结合有胶体金的抗体。本发明专利技术提供的标记试剂，采用胶体金作为示踪标志物应用于免疫检测领域，在检测时，通过胶体金聚集产生的颜色变化作为检测结果判断的依据，避免了复杂的操作，无需特殊检测仪器，可以适应多种检测环境，以及多种检测需要。本发明专利技术提供的免疫胶体金层析试纸条避免了现有试纸条中过多的搭接结构导致样品溶液的迁移速度大幅降低的问题，可有效缩短样品溶液进入检测膜的时长，且该试纸条重复性和抗干扰能力良好，展现出良好的应用前景。展现出良好的应用前景。展现出良好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
标记试剂、免疫胶体金层析试纸条、其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及生物检测领域，尤其涉及标记试剂、免疫胶体金层析试纸条、其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]自20世纪以来，毒品问题一直是威胁人类健康和影响社会国家安定的重要因素。根据有关部门报告显示，当前我国毒品形势有以下特点：甲基苯丙胺、氯胺酮一类毒品滥用情况最为严重；毒品来源错综复杂管控难度大；毒品交易渠道方式八门。吸食毒品，不仅会对个人身体健康，家庭幸福造成巨大伤害，严重时还会酿成种种惨案，扰乱社会治安。一直以来，政府部门高度重视毒品问题，大力打击制毒、贩毒、吸毒行为，也要求执法部门能快速、有效检出毒品。
[0003]免疫层析检测是一种能有效检出毒品的检测方法。免疫层析技术(immuno chromatography assay，ICA)，起源于20世纪80年代，是一种结合了免疫技术和色谱层析技术的检测诊断方法。免疫层析一般发生于免疫层析试纸条上。试纸条通常依次由样品垫、结合垫、检测膜、吸水纸和底板五部分组成，基本结构如图1和图2所示。在检测膜上指定位置包被有相应抗原或抗体的检测线(T线)和控制线(C线)，滴加样品溶液测试时，溶液受毛细作用沿着试纸条往前迁移，在结合垫处与带标记的抗体探针发生特异性结合，随后继续往前移动，在T线和C线上出现结合、滞留，依据T/C线上的标记信号的有无多少进行结果判定。
[0004]目前现有的免疫层析试剂卡输出检测结果的时间较长，通常的检测时长在10分钟以上，因而导致其应用场景有限，难以满足毒品现场快速筛查的使用需求，尤其难以满足毒驾路检的使用需求，投入使用易出现交通堵塞，检测效率低等问题，无法满足应用需求，因此公安毒检部门亟需一种可用于现场快速筛查的检测试剂卡。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术提供了标记试剂、免疫胶体金层析试纸条及其制备方法和应用。本专利技术提供的标记试剂，采用胶体金作为示踪标志物应用于免疫检测领域，在检测时，通过胶体金聚集产生的颜色变化作为检测结果判断的依据，避免了复杂的操作，无需特殊检测仪器，可以适应多种检测环境，以及多种检测需要。本专利技术提供的免疫胶体金层析试纸条避免了现有试纸条中过多的搭接结构导致样品溶液的迁移速度大幅降低的问题，可有效缩短样品溶液进入检测膜的时长，且该试纸条重复性和抗干扰能力良好，展现出良好的应用前景。
[0006]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0007]本专利技术提供了标记试剂，包括pH调节剂和捕获探针；所述捕获探针包括结合有胶体金的抗体。
[0008]在一些实施方案中，上述标记试剂中所述捕获探针还包括吸附于所述胶体金上的标记蛋白。
[0009]在一些实施方案中，上述标记试剂中所述pH调节剂包括碳酸钾，根据技术发展情况，所述pH调节剂也可以选择其他适用的材料；和/或，所述抗体包括甲基苯丙胺抗体、吗啡抗体和氯胺酮抗体中的一种或多种；和/或，所述标记蛋白包括牛血清白蛋白。
[0010]本专利技术还提供了免疫胶体金层析试纸条，包括一体垫、检测膜和吸水垫；所述一体垫包括样品区和金标区；
[0011]所述检测膜的一端与所述金标区搭接，另一端与所述吸水垫搭接；所述检测膜上设有检测线和控制线；
[0012]所述金标区包括上述标记试剂；
[0013]所述检测线包被有抗原偶联蛋白溶液；
[0014]所述控制线包被有二抗溶液。
[0015]在一些实施方案中，所述检测线为一条或多条，所述多条检测线的任意相邻两条之间的间距为1～3mm。
[0016]在一些实施方案中，所述一体垫与距离其最近的所述检测线的距离为2～12mm，进一步优选2～4mm(该距离为一体垫靠近检测膜方向的末端至检测线靠近一体垫一侧边缘的距离)；所述控制线与距离其最近的所述检测线的距离为1～3mm(该距离为相互靠近的两个边缘之间的距离，下同)；所述金标区与所述检测膜的搭接长度为1～2mm；所述吸水垫与所述检测膜的搭接长度为5～15mm。
[0017]在一些实施方案中，所述抗原偶联蛋白溶液中的抗原包括甲基苯丙胺、吗啡或氯胺酮中的一种或多种；所述一种或多种抗原与所述一条或多条检测线对应，每条所述检测线上包被含单一抗原的抗原偶联蛋白溶液。
[0018]在一些实施方案中，所述检测线靠近所述一体垫；所述控制线靠近所述吸水垫。
[0019]在一些实施方案中，所述金标区远离所述样品区的一端延伸至所述检测膜的顶部；
[0020]所述吸水垫靠近一体垫的一端延伸至所述检测膜的顶部。
[0021]在一些实施方案中，上述免疫胶体金层析试纸条还包括底板，所述检测膜一面完全贴装于所述底板，所述一体垫和所述吸水垫的一端贴装于所述底板，另一端搭接于所述检测膜上。
[0022]在一些实施方案中，所述底板的长度为20～50mm，宽度为1～5.5mm。
[0023]在一些实施方案中，所述底板的长度为20～40mm，宽度为1～4mm；所述一体垫与所述检测线的距离为2～4mm。
[0024]在一些实施方案中，所述底板的长度为30mm，宽度为2.5mm；所述一体垫与所述检测线的距离为2mm。
[0025]在一些实施方案中，所述一体垫、所述吸水垫、所述检测膜的宽度与所述底板的宽度相同。
[0026]在一些实施方案中，所述检测线和所述控制线的距离为1.2mm。
[0027]在一些实施方案中，所述一体垫的长度为13mm。
[0028]在一些实施方案中，所述检测膜的长度为10～25mm；优选为20mm。
[0029]在一些实施方案中，所述吸水垫的长度为11～13mm；优选为12mm。
[0030]在一些实施方案中，所述吸水垫与所述检测膜的搭接长度为7mm。
[0031]在一些实施方案中，所述样品区的长度为4～12mm；优选为9mm。
[0032]在一些实施方案中，所述金标区的长度为1～4mm；优选为4mm。
[0033]在一些实施方案中，所述捕获探针包括甲基苯丙胺抗体金标探针、吗啡抗体金标探针和氯胺酮金标抗体探针中的一种或多种。
[0034]在一些实施方案中，所述检测线上包被有抗A抗体。
[0035]在一些实施方案中，所述检测线上包被包括甲基苯丙胺偶联牛血清白蛋白、吗啡偶联牛血清白蛋白或氯胺酮偶联牛血清白蛋白中的一种或多种。
[0036]在一些实施方案中，所述控制线上包被有羊抗鼠IgG。
[0037]在一些实施方案中，所述检测线的数量大于等于2，任意相邻所述检测线之间的间距为1.0～3.0mm。
[0038]在一些实施方案中，所述检测线的数量大于等于2，任意相邻所述检测线之间的间距为1.0～2.0mm。
[0039]在一些实施方案中，所述检测线的数量大于等于2，任意相邻所述检测线之间的间距为1.0mm。
[0040]本专利技术还提供了免疫胶体金层析试纸条的制备方法，包括以下步骤：
[004本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.标记试剂，其特征在于，包括pH调节剂和捕获探针；所述捕获探针包括结合有胶体金的抗体和吸附于所述胶体金上的标记蛋白。2.如权利要求1所述的标记试剂，其特征在于，所述pH调节剂包括碳酸钾；和/或，所述抗体包括甲基苯丙胺抗体、吗啡抗体和氯胺酮抗体中的一种或多种；和/或，所述标记蛋白包括牛血清白蛋白。3.免疫胶体金层析试纸条，其特征在于，包括一体垫、检测膜和吸水垫；所述一体垫包括样品区和金标区；所述检测膜的一端与所述金标区搭接，另一端与所述吸水垫搭接；所述检测膜上设有检测线和控制线；所述金标区包含有如权利要求1或2所述的标记试剂；所述检测线包被有抗原偶联蛋白溶液；所述控制线包被有二抗溶液。4.如权利要求3所述的免疫胶体金层析试纸条，其特征在于，所述检测线为一条或多条，所述多条检测线的任意相邻两条之间的间距为1～3mm。5.如权利要求4所述的免疫胶体金层析试纸条，其特征在于，所述一体垫与距离其最近的所述检测线的距离为2～12mm；所述控制线与距离其最近的所述检测线的距离为1～3mm；所述金标区与所述检测膜的搭接长度为1～2mm；所述吸水垫与所述检测膜的搭接长度为5～15mm。6.如权利要求3至5任一项所述的免疫胶体金层析试纸条，其特征在于，所述抗原偶联蛋白溶液中的抗原包括甲基苯丙胺、吗啡或氯胺酮中的一种或多种；所述一种或多种抗原与所述一条或多条检测线对应，每...

【专利技术属性】
技术研发人员：施月森，刘昕，杜明荦，杨达峰，金伟，吴柯，
申请(专利权)人：广东省毒品实验技术中心，
类型：发明
国别省市：