外泌体心脏靶向递送系统及其制备方法和应用技术方案

本发明专利技术涉及递送系统，公开了一种外泌体心脏靶向递送系统及其制备方法和应用。所述外泌体心脏靶向递送系统包括外泌体以及修饰在所述外泌体表面的脂肪酸转位酶配体。该外泌体心脏靶向递送系统具有较好的靶向效果，能够提高静脉给药后外泌体在心脏部位的蓄积，有利于提高药效。高药效。高药效。

【技术实现步骤摘要】
外泌体心脏靶向递送系统及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及一种递送系统，具体涉及一种外泌体心脏靶向递送系统。此外，本专利技术还涉及一种外泌体心脏靶向递送系统的制备方法及该递送系统作为治疗心肌缺血再灌注损伤递药系统的应用。

技术介绍

[0002]心肌缺血再灌注损伤可导致心肌损伤加重、心力衰竭甚至死亡，已成为心梗患者从缺血后复流获益的严重障碍，但目前临床上尚缺乏有效的预防和治疗措施。干细胞外泌体具有抑制炎症及细胞凋亡、促进组织修复等作用，已应用于多种疾病的治疗，但其心肌靶向性差、药效不足、心脏原位给药困难的缺陷限制了它在缺血性心脏疾病中的临床应用。如何设计适当的给药策略，增加外泌体在心肌中的蓄积是目前亟需解决的问题。
[0003]现有研究大多针对损伤心肌细胞进行靶向设计，虽在一定程度上增加了药物的靶向性，但靶向效果依然有限，从而导致药效不足。
[0004]基于现有技术，亟需提供一种能够提高靶向效果的外泌体心脏靶向递送系统。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是为了克服现有技术存在的药物靶向效果有限的问题，提供一种外泌体心脏靶向递送系统及其制备方法和应用，该外泌体心脏靶向递送系统能够提高静脉给药后外泌体在心脏部位的蓄积，具有较高的靶向效果，有利于提高药效。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术一方面提供一种外泌体心脏靶向递送系统，该系统包括外泌体以及修饰在所述外泌体表面的脂肪酸转位酶配体。
[0007]优选地，所述脂肪酸转位酶配体为1
‑
>棕榈酰基
‑2‑
(5
‑
酮基
‑6‑
辛烯
‑
二酰氯基)磷脂酰胆碱。
[0008]进一步优选地，相对于1个所述外泌体，所述脂肪酸转位酶配体的修饰量为2500
‑
45000个。
[0009]优选地，所述外泌体为植物来源的外泌体和/或动物来源的外泌体。
[0010]进一步优选地，所述动物来源的外泌体选自HEK293T细胞的外泌体、骨髓间充质干细胞的外泌体、脐带间充质干细胞的外泌体、脂肪间充质干细胞的外泌体、心肌球来源细胞的外泌体、内皮祖细胞的外泌体、造血干细胞的外泌体、巨噬细胞的外泌体、单核细胞的外泌体、血浆的外泌体和血小板的外泌体中的至少一种。
[0011]优选地，该系统还包括修饰在所述外泌体表面的缺血心肌靶向肽。
[0012]进一步优选地，相对于1个所述外泌体，所述缺血心肌靶向肽的修饰量为2000
‑
8000个。
[0013]优选地，所述缺血心肌靶向肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0014]本专利技术第二方面提供一种外泌体心脏靶向递送系统的制备方法，包括如下步骤：
[0015]将外泌体和/或偶联二苯基环辛炔的外泌体与待修饰的物质进行接触反应后进行
分离处理；
[0016]所述待修饰的物质含有脂肪酸转位酶配体。
[0017]优选地，所述脂肪酸转位酶配体为1
‑
棕榈酰基
‑2‑
(5
‑
酮基
‑6‑
辛烯
‑
二酰氯基)磷脂酰胆碱；
[0018]所述外泌体为植物来源的外泌体和/或动物来源的外泌体。
[0019]进一步优选地，所述动物来源的外泌体选自HEK293T细胞的外泌体、骨髓间充质干细胞的外泌体、脐带间充质干细胞的外泌体、脂肪间充质干细胞的外泌体、心肌球来源细胞的外泌体、内皮祖细胞的外泌体、造血干细胞的外泌体、巨噬细胞的外泌体、单核细胞的外泌体、血浆的外泌体和血小板的外泌体中的至少一种。
[0020]优选地，所述方法包括如下步骤：将偶联二苯基环辛炔的外泌体和待修饰的物质进行接触反应后进行分离处理；所述待修饰的物质还包括N端修饰了叠氮的缺血心肌靶向肽。
[0021]进一步优选地，所述缺血心肌靶向肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0022]优选地，相对于1mg的以蛋白计的所述外泌体，所述脂肪酸转位酶配体的添加量为0.002
‑
0.02mg，所述N端修饰了叠氮的缺血心肌靶向肽为0.001
‑
0.01mg。
[0023]优选地，所述接触反应的条件至少包括：转速50
‑
200rpm，时间为1
‑
24h。
[0024]优选地，所述偶联二苯基环辛炔的外泌体的制备方法包括：将外泌体和二苯基环辛炔
‑
磺基
‑
琥珀酰亚胺酯进行接触反应后进行分离处理；
[0025]进一步优选地，相对于1mg的以蛋白计的所述外泌体，所述二苯基环辛炔
‑
磺基
‑
琥珀酰亚胺酯的添加量为0.002
‑
0.02mg。
[0026]优选地，所述接触反应的条件至少包括：在溶剂中进行，时间为1
‑
6h。
[0027]本专利技术第三方面提供一种第一方面所述的外泌体心脏靶向递送系统或第二方面所述的制备方法制备得到的外泌体心脏靶向递送系统作为治疗心肌缺血再灌注损伤递药系统的应用。
[0028]通过上述技术方案，本专利技术提供的外泌体心脏靶向递送系统，通过在外泌体表面修饰脂肪酸转位酶配体，能够促进外泌体跨心脏血管内皮屏障，靶向缺血心肌组织，提高静脉给药后外泌体在心脏部位的蓄积，有效提高该外泌体递药系统的靶向效果，从而有效提高药物的生物利用度和药效，为心肌缺血再灌注损伤的治疗提供更有效的途径。
附图说明
[0029]图1为流式细胞术表征外泌体修饰效率结果图；
[0030]图2为靶向修饰的外泌体在常氧及缺氧诱导损伤心肌细胞HL
‑
1中的摄取荧光图(A)及其荧光定量分析结果(B)；
[0031]图3为KOdiA
‑
PC修饰的外泌体在不同内皮细胞中的摄取情况；其中，A和C为不同内皮细胞对KOdiA
‑
PC修饰的外泌体的摄取荧光图及其荧光定量分析结果，B和D为CMEC细胞对外泌体以及KOdiA
‑
PC修饰的外泌体的摄取荧光图及其荧光定量分析结果；
[0032]图4为装载siRNA药物的KOdiA
‑
PC修饰的外泌体的跨内皮转运情况；A为跨内皮转运模型示意图，B和C为上室接种不同内皮细胞，下室HL
‑
1细胞对内皮细胞所转运药物的摄取荧光图及其荧光定量分析结果，D和E为上室接种CMEC细胞，下室HL
‑
1细胞对外泌体以及
KOdiA
‑
PC修饰的外泌体所载siRNA药物的摄取荧光图及其荧光定量分析结果；
[0033]图5为DiR标记的外泌体心脏靶向递送系统在小鼠缺血再灌注心脏中的蓄积图片(A)及其荧光定量分析结果(B)。
具体实施方式
[0034]在本文中所披本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种外泌体心脏靶向递送系统，其特征在于，该系统包括外泌体以及修饰在所述外泌体表面的脂肪酸转位酶配体。2.根据权利要求1所述的外泌体心脏靶向递送系统，其特征在于，所述脂肪酸转位酶配体为1
‑
棕榈酰基
‑2‑
(5
‑
酮基
‑6‑
辛烯
‑
二酰氯基)磷脂酰胆碱；优选地，相对于1个所述外泌体，所述脂肪酸转位酶配体的修饰量为2500
‑
45000个。3.根据权利要求1或2所述的外泌体心脏靶向递送系统，其特征在于，所述外泌体为植物来源的外泌体和/或动物来源的外泌体；优选地，所述外泌体为动物来源的外泌体；优选地，所述动物来源的外泌体选自HEK293T细胞的外泌体、骨髓间充质干细胞的外泌体、脐带间充质干细胞的外泌体、脂肪间充质干细胞的外泌体、心肌球来源细胞的外泌体、内皮祖细胞的外泌体、造血干细胞的外泌体、巨噬细胞的外泌体、单核细胞的外泌体、血浆的外泌体和血小板的外泌体中的至少一种。4.根据权利要求1或2所述的外泌体心脏靶向递送系统，其特征在于，该系统还包括修饰在所述外泌体表面的缺血心肌靶向肽；优选地，相对于1个所述外泌体，所述缺血心肌靶向肽的修饰量为2000
‑
8000个；优选地，所述缺血心肌靶向肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。5.一种外泌体心脏靶向递送系统的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将外泌体和/或偶联二苯基环辛炔的外泌体与待修饰的物质进行接触反应后进行分离处理；所述待修饰的物质含有脂肪酸转位酶配体。6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述脂肪酸转位酶配体为1
‑
棕榈酰基
‑2‑
(5
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酮基
‑6‑
辛烯
‑
二酰氯基)磷脂酰胆碱；所述外泌体为植物来源的外泌体和/...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈雄文，裴醒，贺慧宁，李睿，
申请(专利权)人：天津医科大学，
类型：发明
国别省市：