本发明专利技术提供了一种谷精草的特征图谱的构建方法及其应用，所述构建方法包括：将对照品、对照药材和供试品经高效液相色谱法检测，标定共有峰，得到所述谷精草的特征图谱；所述高效液相色谱法中，以乙腈为流动相A，以甲酸水溶液为流动相B；所述甲酸水溶液中甲酸的质量百分含量为0.25～0.45％。本发明专利技术中，所述构建方法的分离度好，能够比较全面的反应样品的特征峰信息，精密度高、重现性好，稳定性好，能够高效实现谷精草配方颗粒的质量控制。实现谷精草配方颗粒的质量控制。实现谷精草配方颗粒的质量控制。
【技术实现步骤摘要】
一种谷精草的特征图谱的构建方法及其应用
[0001]本专利技术属于药物分析
，具体涉及一种谷精草的特征图谱的构建方法及其应用。
技术介绍
[0002]谷精草药材来源于谷精草科植物谷精草的干燥带花茎的头状花序，又名戴星草、文星草、流星草等，为谷精草科一年生草本植物。功能主治：疏散风热，明目退翳；用于风热目赤，肿痛羞明，眼生翳膜，风热头痛等疾病。近代研究表明，谷精草具有抗菌、抗氧化、α
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葡萄糖苷酶抑制、6
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OHDA诱导神经损伤保护等作用。并且，谷精草还可以作为复方成分与其他中药配伍，广泛应用于眼科疾病，如病毒性角膜炎、色素膜炎白内障、黑翳性视神经炎、流行结膜炎等，疾病的治疗效率可达90％以上。因此它的药用价值日益受到人们重视。目前法定标准对谷精草药材以香草酸成分进行定量分析，指认成分较少，不利于药材的质量控制。
[0003]因此，开发一种能够全面地反应样品的特征峰信息，分离度好，稳定，精密度高，重现性较好，能够高效检测谷精草有效成分的含量，是本领域亟待解决的问题。
技术实现思路
[0004]针对现有技术存在的不足，本专利技术的目的在于提供一种谷精草的特征图谱的构建方法及其应用。所述构建方法的分离度好，能够比较全面的反应样品的特征峰信息，精密度高、重现性好，稳定性好，能够高效实现谷精草有效成分的质量控制。
[0005]为达此目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0006]第一方面，本专利技术提供一种谷精草的特征图谱的构建方法，所述构建方法包括：
[0007]将对照品、对照药材和供试品经高效液相色谱法检测，标定共有峰，得到所述谷精草的特征图谱；所述高效液相色谱法中，以乙腈为流动相A，以甲酸水溶液为流动相B；所述甲酸水溶液中甲酸的质量百分含量为0.25～0.45％(例如可以为0.25％、0.26％、0.27％、0.28％、0.29％、0.3％、0.31％、0.32％、0.33％、0.34％、0.35％、0.36％、0.37％、0.38％、0.39％、0.4％、0.41％、0.42％、0.43％、0.44％、0.45％等)。
[0008]本专利技术中，所述流动相选用乙腈和特定质量浓度的甲酸水溶液，对样品进行洗脱，分离度好，得到的图谱中特征峰个数较多，能够较为全面的反应样品特征峰的信息；且所述方法精密度高、重现性好，稳定性好，能够高效实现谷精草有效成分的质量控制。
[0009]优选地，所述谷精草包括谷精草药材、谷精草配方颗粒或谷精草饮片。
[0010]优选地，所述高效液相色谱法中，采用流动相对样品进行梯度洗脱。
[0011]优选地，所述高效液相色谱法中，洗脱梯度为：
[0012]0→
5min：流动相A的体积百分含量为1％，流动相B的体积百分含量为99％；5
→
32min：流动相A的体积百分含量为1～16％，流动相B的体积百分含量为99～84％；32
→
40min：流动相A的体积百分含量为16～17％，流动相B的体积百分含量为84～83％；40
→
45min：流动相A的体积百分含量为17～21％，流动相B的体积百分含量为83～79％；45
→
50min：流动相A的体积百分含量为21～23％，流动相B的体积百分含量为79～77％；50
→
55min：流动相A的体积百分含量为23～27％，流动相B的体积百分含量为77～73％。
[0013]本专利技术中，采用特定洗脱梯度对样品进行梯度洗脱，能够得到特征峰较多的供试品谱图，分离度高，检测效率高。
[0014]本专利技术中，示例性地，洗脱梯度，5
→
32min：流动相中乙腈的体积百分含量为1～16％，甲酸水溶液的体积百分含量为99～84％，指在32min时，流动相组成变为16％乙腈和84％的甲酸水溶液。
[0015]优选地，所述流动相的流速为0.25～0.35mL/min，例如可以为0.25mL/min、0.26mL/min、0.27mL/min、0.28mL/min、0.29mL/min、0.3mL/min、0.31mL/min、0.32mL/min、0.33mL/min、0.34mL/min、0.35mL/min等。
[0016]优选地，所述高效液相色谱法中，柱温为30～40℃，例如可以为30℃、32℃、34℃、36℃、38℃、40℃等。
[0017]优选地，所述高效液相色谱法中，固定相包括十八烷基硅烷键合硅胶。
[0018]优选地，所述固定相的粒径为1.8μm。
[0019]优选地，所述色谱柱的柱长为150mm；色谱柱的内径为2.1mm。
[0020]优选地，所述高效液相色谱法中，检测波长为250～280nm，例如可以为250nm、252nm、254nm、256nm、258nm、260nm、262nm、265nm、268nm、270nm、272nm、275nm、280nm等。
[0021]优选地，所述高效液相色谱法中，进样体积为1～3μL，例如可以为1μL、1.5μL、2μL、2.5μL、3μL等。
[0022]优选地，所述对照品、对照药材和供试品各自独立地以溶液的形式存在。
[0023]优选地，对照药材溶液和供试品溶液的制备方法各自独立地包括：
[0024]将对照药材或供试品与溶剂混合，超声，得到所述对照药材溶液或供试品溶液。
[0025]优选地，所述溶剂包括甲醇水溶液。
[0026]优选地，所述甲醇水溶液的质量浓度为40～60％，例如可以为40％、42％、44％、46％、48％、50％、52％、54％、56％、58％、60％等。
[0027]优选地，所述对照药材溶液和供试品溶液的浓度各自独立地为0.02～0.06g/mL，例如可以为0.02g/mL、0.025g/mL、0.03g/mL、0.035g/mL、0.04g/mL、0.045g/mL、0.05g/mL、0.055g/mL、0.06g/mL等。
[0028]优选地，所述超声的功率为200～300W，例如可以为200W、220W、240W、260W、280W、300W等；超声的时间为20～40min，例如可以为20min、25min、30min、35min、40min等。
[0029]本专利技术中，所述超声的频率为30～50kHz，例如可以为30kHz、35kHz、40kHz、45kHz、50kHz等。
[0030]本专利技术中，所述对照药材为谷精草对照药材。
[0031]本专利技术中，对照品溶液的制备方法包括：将对照品与质量浓度为40～60％的甲醇水溶液混合，得到所述对照品溶液；所述对照品溶液的浓度为10～30μg/mL，例如可以为10μg/mL、15μg/mL、20μg/mL、25μg/mL、30μg/mL等。
[0032]本专利技术中，所述对照品包括尿苷、鸟苷、腺苷、原儿茶酸、香草酸、咖啡酸本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种谷精草的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括：将对照品、对照药材和供试品经高效液相色谱法检测，标定共有峰，得到所述谷精草的特征图谱；所述高效液相色谱法中，以乙腈为流动相A，以甲酸水溶液为流动相B；所述甲酸水溶液中甲酸的质量百分含量为0.25～0.45％。2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述谷精草包括谷精草药材、谷精草配方颗粒或谷精草饮片；优选地，所述高效液相色谱法中，采用流动相对样品进行梯度洗脱。3.根据权利要求1或2所述的构建方法，其特征在于，所述高效液相色谱法中，洗脱梯度为：0
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5min：流动相A的体积百分含量为1％，流动相B的体积百分含量为99％；5
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32min：流动相A的体积百分含量为1～16％，流动相B的体积百分含量为99～84％；32
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40min：流动相A的体积百分含量为16～17％，流动相B的体积百分含量为84～83％；40
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45min：流动相A的体积百分含量为17～21％，流动相B的体积百分含量为83～79％；45
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50min：流动相A的体积百分含量为21～23％，流动相B的体积百分含量为79～77％；50
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55min：流动相A的体积百分含量为23～27％，流动相B的体积百分含量为77～73％。4.根据权利要求1～3任一项所述的构建方法，其特征在于，所述流动相的流速为0.25～0.35mL/min；优选地，所述高效液相色谱法中，柱温为30～40℃；优选地，所述高效液相色谱法中，固定相包括十八烷基硅烷键合硅胶；优选地，所述固定相的粒径为1.8μm；优选地，所述色谱柱的柱长为150mm，色谱柱的内径为2.1mm。5.根据权利要求1～4任一项所述的构建方法，其特征在于，所述高效液相色谱法中，检测波长为250～280nm；优选地，所述高效液相色谱法中，进样体积为1～3μL。6.根据权利要求1～5任一项所述的构建方法，其特征在于，所述对照品、对照药材和供试品各自独立地以溶液的形式存在；优选地，对照药材溶液...
【专利技术属性】
技术研发人员：张志强，李泽龙，孙海涛，周永康，张翔，蒋东钱，
申请(专利权)人：北京康仁堂药业有限公司，
类型：发明
国别省市：
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