黑曲霉脂肪酶、编码基因及应用制造技术

本发明专利技术属于生物技术领域，具体涉及黑曲霉脂肪酶、编码基因及应用。针对在水相体系中酶促酯化反应研究较少的问题，本发明专利技术提供一种黑曲霉脂肪酶、编码基因及应用。其黑曲霉脂肪酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1或SEQ ID No.2所示。本发明专利技术的脂肪酶在含有乙醇、丁酸、戊酸、己酸、庚酸和辛酸的水相体系中能合成丁酸乙酯、戊酸乙酯、己酸乙酯、庚酸乙酯和辛酸乙酯。本发明专利技术的脂肪酶用于白酒酿造的水相体系中催化合成重要风味酯己酸乙酯和辛酸乙酯，具有较好的工业化应用前景。工业化应用前景。工业化应用前景。

【技术实现步骤摘要】
黑曲霉脂肪酶、编码基因及应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及黑曲霉脂肪酶、编码基因及应用。

技术介绍

[0002]众所周知，传统白酒中含有数千种风味化合物，其决定了白酒的品质，这些风味物质主要包括酯类、醇类、酸类和其它挥发物。其中，短链脂肪酸酯是白酒重要的香气物质，乙酸乙酯是清香型白酒主体香，而己酸乙酯已被鉴定为浓香型白酒中重要特征香气物质。己酸乙酯赋予浓香型白酒一种地窖的香味，类似于菠萝、泥巴、酸菜和植物灰的混合气味，含量的高低是决定浓香型白酒品质的重要参数。然而，在传统白酒酿造过程中产酯生香较慢，发酵周期长，粮耗高、出酒率低。因此，探究高效的己酸乙酯等短链脂肪酸酯的合成对于缩短传统白酒发酵周期以及提高白酒品质具有重要作用和应用价值。
[0003]白酒中的酯来源于原料、自发的化学酯化和微生物合成酯这三个主要途径，其中，微生物合成和基于酯化酶的酶促反应是白酒中短链脂肪酸酯的主要来源，尤其对于浓香型白酒而言，酒醅中的乙醇和窖泥中的己酸通过酶促反应是己酸乙酯最为主要的来源。酯化反应主要由羧酸水解酶家族的酶催化，其中报道最多的酶是脂肪酶、酯酶和角质酶。据文献报道，有机相体系适合大部分的酶促酯化反应，有少部分的酶促酯化反应发生在水相。然而，在白酒生产中，原料中有53
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58％的水分，可视为水相体系。白酒发酵过程中的某些微生物所具有的酶可以在水相体系中进行酯合成反应，但是关于白酒酯化酶的挖掘及其在水相条件下合成酯的催化机理研究报道很少。因此，脂肪酶在水相体系中催化合成酯的发现及其催化性能的分析，不仅有助于丰富对白酒酯化酶催化机制的了解，也为白酒风味绿色生物制造和工艺优化提供了新的素材和思路。

技术实现思路

[0004]针对在水相体系中酶促酯化反应研究较少的问题，本专利技术提供一种在水相体系中合成丁酸乙酯、戊酸乙酯、己酸乙酯、庚酸乙酯和辛酸乙酯的脂肪酶、编码基因及应用，其来源于黑曲霉(Aspergillus niger)。
[0005]本专利技术提供黑曲霉脂肪酶，分别定义为黑曲霉脂肪酶ANI_1_236084、黑曲霉脂肪酶ANI_1_266144，其对照组黑曲霉脂肪酶定义为ANI_1_58064。
[0006]本专利技术首先提供黑曲霉脂肪酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。
[0007]黑曲霉脂肪酶ANI_1_236084氨基酸序列SEQ ID NO.1：
[0008]MFLRREFGAVAALSVLAHAAPAPAPMQRRDISSTVLDNIDLFAQYSAAAYCSSNIESTGTTLTCDVGNCPLVEAAGATTIDEFDDSSSYGDPTGFIAVDPTNELIVLSFRGSSDLSNWIADLDFGLTSVSSICDGCEMHKGFYEAWEVIADTITSKVEAAVSSYPDYTLVFTGHSYGAALAAVAATVLRNAGYTLDLYNFGQPRIGNLALADYITDQNMGSNYRVTHTDDIVPKLPPELLGYHHFSPEYWITSGNDVTVTTSDVTEVVGVDSTAGNDGTLLDSTTAHRWYTIYISECS。
[0009]黑曲霉脂肪酶ANI_1_266144氨基酸序列SEQ ID NO.2：
[0010]MFSGRFGVLLTALAALSAAAPTPLDVRSVSTSTLDELQLFSQWSAAAYCSNNIDSDDSNVTCTADACPSVEEASTKMLLEFDLTNNFGGTAGFLAADNTNKRLVVAFRGSSTIKNWIADLDFILQDNDDLCTGCKVHTGFWKAWEAAADNLTSKIKSAMSTYSGYTLYFTGHSLGGALATLGATVLRNDGYSVELYTYGCPRVGNYALAEHITSQGSGANFRVTHLNDIVPRLPPMDFGFSQPSPEYWITSGTGASVTASDIELIEGINSTAGNAGEATVDVLAHLWYFFAISECLL。
[0011]本专利技术还提供了编码所述黑曲霉脂肪酶的编码基因，分别如SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4所示。
[0012]黑曲霉脂肪酶ANI_1_236084的编码基因SEQ ID NO.3：
[0013]ATGTTTCTCCGCAGGGAATTTGGGGCTGTTGCAGCCCTATCTGTGCTGGCCCATGCTGCTCCCGCACCTGCTCCGATGCAGCGTAGAGACATCTCCTCTACCGTCTTGGACAATATCGACCTCTTCGCCCAATACAGTGCAGCAGCTTACTGCTCCTCCAACATCGAGTCCACCGGCACGACTCTGACCTGCGACGTAGGCAATTGCCCTCTCGTCGAGGCAGCCGGTGCCACGACCATCGATGAGTTTGACGACAGCAGCAGCTACGGCGACCCGACGGGGTTCATCGCCGTTGACCCGACGAACGAGTTAATCGTTCTGTCTTTCCGGGGCAGTTCCGACCTCTCGAACTGGATTGCCGACCTAGACTTCGGCCTCACATCCGTAAGCAGCATCTGTGATGGCTGTGAGATGCACAAGGGCTTCTACGAGGCCTGGGAAGTCATTGCCGACACCATCACATCCAAGGTGGAGGCCGCCGTCTCCAGCTATCCGGACTACACCCTCGTGTTCACCGGACACAGCTACGGCGCTGCATTGGCGGCTGTCGCGGCCACCGTGCTCCGCAACGCCGGATACACTCTTGACCTGTACAACTTCGGCCAGCCCCGTATTGGCAACCTCGCCTTAGCCGACTACATCACCGACCAAAACATGGGCAGCAACTACCGCGTCACGCACACCGATGACATCGTGCCTAAGCTGCCTCCGGAGCTGCTGGGCTACCACCACTTCAGTCCGGAGTACTGGATCACCAGCGGCAATGATGTGACGGTGACAACGTCGGACGTCACCGAGGTCGTGGGGGTGGATTCGACGGCTGGGAATGACGGCACGCTGCTTGACAGTACGACTGCCCATCGGTGGTACACGATCTACATTAGTGAATGCTCGTAG。
[0014]黑曲霉脂肪酶ANI_1_266144的编码基因SEQ ID NO.4：
[0015]ATGTTCTCTGGACGGTTTGGAGTGCTTTTGACGGCGCTCGCTGCGCTGAGTGCTGCGGCACCGACACCACTTGATGTGCGGAGTGTCTCGACTTCCACGTTGGATGAGCTGCAATTGTTCTCGCAATGGTCTGCCGCAGCTTATTGCTCGAACAATATCGACTCGGACGACTCTAACGTGACATGCACGGCCGACGCCTG本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.黑曲霉(Aspergillus niger)脂肪酶，其特征在于：其氨基酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。2.根据权利要求1所述的黑曲霉脂肪酶，其特征在于：编码所述黑曲霉脂肪酶的编码基因如SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4所示。3.权利要求1或2所述的黑曲霉脂肪酶在水相体系中催化合成酯类物质的应用。4.权利要求1或2所述的黑曲霉脂肪酶在制备含酯类物质的酒用酯香液或白酒中的应用。5.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：张翠英，赵东，林良才，郑佳，梁梦帆，王洪，肖冬婷，
申请(专利权)人：宜宾五粮液股份有限公司，
类型：发明
国别省市：