使用剂量响应曲线的递减信号部分来测量包括高浓度分析物在内的分析物的夹心式测定制造技术

本发明专利技术的名称是使用剂量响应曲线的递减信号部分来测量包括高浓度分析物在内的分析物的夹心式测定。本文所述的夹心式侧向流测定装置、系统和方法测量样品中感兴趣的分析物的浓度，并且当其以高浓度存在时，可以确定分析物的精确浓度。当样品中感兴趣的分析物的浓度为零时，将产生最大强度信号。对于低浓度的分析物，本文所述的侧向流测定产生与最大强度信号相同或基本上等同的信号。高浓度的感兴趣的分析物产生小于最大强度信号的信号。本公开的侧向流测定通过消除信号增大的剂量响应曲线的阶段而解决了与夹心式侧向流测定的钩状效应相关的缺点。应相关的缺点。应相关的缺点。

【技术实现步骤摘要】
使用剂量响应曲线的递减信号部分来测量包括高浓度分析物在内的分析物的夹心式测定
[0001]本申请是分案申请，原申请的申请日为2018年6月25日、申请号为2018800507224、专利技术名称为“使用剂量响应曲线的递减信号部分来测量包括高浓度分析物在内的分析物的夹心式测定”。
[0002]相关申请的交叉引用
[0003]本申请要求2017年6月28日提交的美国临时申请号62/526,051的权益，其因而通过引用以其全部并入。


[0004]本公开通常涉及侧向流测定装置、测试系统和方法。更具体地，本公开涉及侧向流测定装置以确定样品中分析物——包括当所关注的分析物以高浓度存在时——的浓度。

技术介绍

[0005]包括本文所述的侧向流测定的免疫测定系统提供了可靠、便宜、便携式、快速且简单的诊断测试。侧向流测定可以快速且准确地检测出样品中存在或不存在感兴趣的分析物，并且在一些情况下定量感兴趣的分析物。有利地，侧向流测定可以是微创的，并且可以用作即时测试系统。已经开发出侧向流测定以检测多种医学或环境分析物。在夹心形式的侧向流测定中，针对感兴趣的分析物的标记抗体沉积在样品接收区中或其附近的试条上。标记的抗体可以包括，例如，与抗体结合的检测分子或“标记”。当将样品施加至试条上时，样品中存在的分析物被标记的抗体结合，该标记的抗体沿着试条流动至捕获区，在捕获区，针对该分析物的固定抗体与标记的抗体
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分析物复合物结合。固定在捕获线上的抗体可能与沉积在样品接收区中或其附近的标记的抗体不同。检测捕获的复合物，并确定分析物的存在。在不存在分析物的情况下，标记的抗体沿着试条流动，但会经过捕获区。捕获区处的信号缺乏表明不存在分析物。然而，当感兴趣的分析物以高浓度存在于样品中时，夹心式侧向流测定具有许多缺点，包括假阴性、结果不准确以及缺乏分辨率。

技术实现思路

[0006]因此，本公开的一方面是提供改进的侧向流测定，其精确地测量样品中感兴趣的分析物——包括当分析物以高浓度存在于样品中时——的浓度。
[0007]本文公开的一些实施方式涉及测定试条，其包括配置为接收流体样品的流动路径；与流动路径偶联的样品接收区；捕获区；和复合物。捕获区与样品接收区下游的流动路径偶联，并包括对感兴趣的分析物具有特异性的固定化捕获剂。该复合物在第一阶段偶联至流动路径，并且配置为在第二阶段在流体样品的存在下在该流动路径中流动至捕获区。该复合物包括标记、与感兴趣的分析物特异性结合的抗体或抗体片段、以及感兴趣的分析物。在一些情况下，流动路径配置为接收包括未标记的感兴趣的分析物的流体样品，并且复合物在第一阶段或第二阶段不特异性地结合至未标记的感兴趣的分析物。在一些实例中，
该复合物被配置为在第二阶段与未标记的感兴趣的分析物一起在流动路径中流动至捕获区。在一些实例中，复合物配置为在第三阶段与未标记的感兴趣的分析物竞争以与捕获区中的固定化捕获剂结合。在一些情况下，随着流体样品中未标记的感兴趣的分析物的浓度增加，由与捕获区中固定化捕获剂结合的复合物发出的光信号减小。
[0008]在一些实例中，流动路径配置为接收包括或不包括感兴趣的分析物的流体样品。当流体样品不包括感兴趣的分析物时，在第二阶段在捕获区中复合物特异性地结合至所有或基本上所有固定化捕获剂。在一些实例中，当流体样品不包括感兴趣的分析物时，由在捕获区中结合的复合物发出的光信号是可以由测定试条发出的最大光信号。当流体样品确实包括感兴趣的分析物时，由在捕获区中结合的复合物发出的光信号小于最大光信号。
[0009]在一些情况下，固定化捕获剂包括与感兴趣的分析物特异性地结合的抗体或抗体片段。在一些实例中，复合物在第一阶段被整合到试条的表面上。在一些实例中，通过将包括复合物的溶液喷雾到试条的表面上并干燥溶液，将复合物整合到试条的表面上。流体样品可以包括血液、血浆、尿液、汗液或唾液样品。在一个非限制性实例中，感兴趣的分析物包括C反应蛋白(CRP)，并且复合物包括与CRP结合的抗CRP抗体或其片段。
[0010]本文公开的其他实施方式涉及诊断测试系统，其包括上述测定试条；包括光源和检测器的读取器，以及数据分析器。在一些情况下，当读取器检测到来自测定试条的光信号是试条的剂量响应曲线的最大光信号时，数据分析器输出流体样品中不存在感兴趣的分析物的指示。在一个实例中，当读取器检测到来自测定试条的光信号在最大光信号的1％以内时，数据分析器输出流体样品中存在低浓度的感兴趣的分析物的指示。在另一个实例中，当读取器检测到来自测定试条的光信号在最大光信号的5％以内时，数据分析器输出流体样品中存在低浓度的感兴趣的分析物的指示。在仍另一个实例中，当读取器检测到来自测定试条的光信号在最大光信号的10％以内时，数据分析器输出流体样品中存在低浓度的感兴趣的分析物的指示。在进一步的实例中，当读取器检测到来自测定试条的光信号为最大光信号的90％或小于90％时，数据分析器输出流体样品中存在高浓度的感兴趣的分析物的指示。在又另一个实例中，当读取器检测到来自测定试条的光信号低于最大光信号时，数据分析器输出样品中感兴趣的分析物的浓度的指示。
[0011]本文公开的进一步实施方式涉及确定流体样品中感兴趣的分析物的浓度的方法。该方法包括当复合物在第一阶段中偶联至流动路径时，将流体样品施加至上述测定试条；将复合物与流动路径解偶联；在第二阶段流体样品和复合物在流动路径中流动至捕获区；在捕获区将复合物结合到固定化捕获剂；并且检测来自捕获区中与固定化捕获剂结合的复合物的信号。该检测的信号可以是光信号、荧光信号或磁信号。在一些情况下，将复合物解偶联包括用流体样品溶解复合物。在一些情况下，流体样品包括未标记的感兴趣的分析物，并且复合物在第一阶段或第二阶段中未特异性地结合至未标记的感兴趣的分析物。在另一个实例中，流体样品包括未标记的感兴趣的分析物，并且该复合物配置为在第三阶段中与未标记的感兴趣的分析物竞争，以与捕获区中的固定化捕获剂结合。在一个实例中，流体样品不包括感兴趣的分析物，并且检测包括检测试条的剂量响应曲线的最大光信号。
[0012]在一些情况下，该方法包括确定流体样品中分析物的浓度为零。在一些实例中，该方法进一步包括显示流体样品中不存在感兴趣的分析物的指示。
[0013]在一个实例中，流体样品包括感兴趣的分析物，并且检测包括检测来自试条的信
号，该信号小于试条的剂量响应曲线的最大信号。在一些情况下，该方法进一步包括确定流体样品中分析物的浓度大于零。在一些情况下，该方法进一步包括显示流体样品中存在感兴趣的分析物的指示。在一个实例中，该方法进一步包括确定检测到的信号在最大光信号的10％以内；并显示感兴趣的分析物以低浓度存在于流体样品中的指示。在另一个实例中，该方法进一步包括确定检测到的信号为最大信号的90％或小于最大信号的90％；并显示感兴趣的分析物以高浓度存在于流体样品中的指示。
[0014]本文公开的另外的实施方式涉及制造测定试条的方法，该方法包括将样品接收区偶联至配置为接收流体样品的流动本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种测定试条，其包括：配置为接收流体样品的流动路径；偶联至所述流动路径的样品接收区；捕获区，其偶联至所述样品接收区下游的流动路径并且包括对感兴趣的分析物具有特异性的固定化捕获剂；和复合物，其在第一阶段偶联至所述流动路径并且被配置为在第二阶段在存在所述流体样品的情况下在所述流动路径中流动至所述捕获区，所述复合物包括标记，特异性地结合所述感兴趣的分析物的抗体或抗体片段，和所述感兴趣的分析物。2.根据权利要求1所述的测定试条，其中所述流动路径配置为接收包括未标记的感兴趣的分析物的流体样品，并且其中所述复合物在所述第一阶段或所述第二阶段未特异性结合至所述未标记的感兴趣的分析物。3.根据权利要求2所述的测定试条，其中所述复合物配置为在所述第二阶段在所述流动路径中与所述未标记的感兴趣的分析物一起流动至所述捕获区。4.根据权利要求3所述的测定试条，其中所述复合物配置为在第三阶段与所述未标记的感兴趣的分析物竞争以结合至所述捕获区中的所述固定化捕获剂。5.根据权利要求4...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨健，任汇淼，
申请(专利权)人：贝克顿，
类型：发明
国别省市：