用于检测针对因子XI和/或因子XIA抗体的抗药抗体的方法技术

本公开涉及用于在例如正利用因子XI和/或因子XIa治疗性抗体治疗的受试者中检测及测量针对所述因子XI和/或因子XIa治疗性抗体的抗药抗体(ADA)的方法。药抗体(ADA)的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于检测针对因子XI和/或因子XIA抗体的抗药抗体的方法
[0001]对相关申请的交叉引用
[0002]本申请主张对2020年12月18日提交的美国临时专利申请号63/127,536的权益及优先权，其公开出于所有目的通过引用整体并入本文。
[0003]序列表
[0004]本申请含有序列表，该序列表已经以ASCII格式以电子方式提交并通过引用整体并入本文。该ASCII副本创建于2021年12月14日，名为ATD
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010WO_ST25.txt，且大小为39,185字节。


[0005]本专利技术一般涉及用于在例如利用因子XI和/或因子XIa治疗性抗体治疗的受试者中检测及测量针对所述因子XI和/或因子XIa治疗性抗体的抗药抗体(ADA)的方法。

技术介绍

[0006]对于减少血栓栓塞性并发症(例如中风、全身性栓塞、认知下降及死亡)的更安全疗法存在高度未满足的医疗需求，该疗法具有与现有疗法所展现相当或经改善的功效且具有较低的出血风险。
[0007]因子XI(FXI)是在固有及外在凝血途径中均发挥作用的丝氨酸蛋白酶。因子XI以酶原形式作为同二聚体存在；在R369
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I370处的肽键断裂后，因子XI被活化(因子XIa、FXIa)。FXI在高组织因子环境中的正常止血中起次要作用，但在血栓形成中起关键作用。遗传因子XI缺乏与缺血性中风及静脉血栓栓塞性事件的降低发病率降低有关(Salomon等人2008；Salomon等人(2011)Thromb Haemost.；105:269
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73)。因子XI缺乏的患者的出血表现不常见，通常是轻微的，由损伤或创伤引起，且极少影响关键器官(Salomon等人2011)。
[0008]已研究结合因子XI和/或因子XIa的抗体。举例而言，WO 2016/207858阐述一种此类抗因子XI和/或因子XIa抗体，其在本申请的表1中作为抗体1公开。本公开补充这些发展并提供进一步临床方法(包括剂量方案)，以便以期望安全性及功效治疗患有特定血栓栓塞性病症的患者。此外，本公开通过提供包含足够稳定且适于施用于患者的此类FXI和/或FXIa抗体的配制剂而补充此领域的早期发展。

技术实现思路

[0009]本专利技术涉及用于检测及测量抗因子XI和/或活化因子XI(因子XIa)抗体或其抗原结合片段的方法。
[0010]因此，在一个方面中，本文提供检测针对抗因子XI和/或抗因子XIa抗体或其抗原结合片段的抗药抗体(ADA)的方法，其中该方法包括：(a)将样品与酸一起温育以解离该样品中存在的抗因子XI和/或抗因子XIa抗体
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抗原复合物和/或解离抗因子XI和/或抗因子XIa抗体
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ADA复合物，以产生酸消化物，(b)将该酸消化物在包被有抗因子XI和/或抗因子XIa抗体或其抗原结合片段的板上温育，(c)中和该酸消化物，及(d)使用钌化检测剂混合物
检测该ADA的存在。
[0011]在一些实施方案中，样品是来自受试者的样品。在一些实施方案中，样品选自由来自受试者的血液、血浆或血清组成的组。在一些实施方案中，方法包括制备样品的初始步骤。
[0012]在一些实施方案中，酸选自下组：乙酸、柠檬酸、磷酸及其混合物。在一些实施方案中，酸是乙酸。在一些实施方案中，乙酸的浓度为约300mM。
[0013]在一些实施方案中，抗原是因子XI和/或因子XIa。在一些实施方案中，板包被有链霉抗生物素蛋白。在一些实施方案中，板上的抗因子XI和/或抗因子XIa抗体或其抗原结合片段的浓度选自下组：约0.1μg/ml、约0.25μg/ml、约0.5μg/ml、约0.75μg/ml及约1μg/ml。在一些实施方案中，板上的抗因子XI和/或抗因子XIa抗体或其抗原结合片段的浓度为约0.25μg/ml。
[0014]在一些实施方案中，中和允许ADA结合经包被板上的抗因子XI和/或抗因子XIa抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，中和使用pH为约8.0的碱。在一些实施方案中，中和使用选自下组的碱：Tris、磷酸盐、HEPES、三乙醇胺及其混合物。在一些实施方案中，碱是Tris。
[0015]在一些实施方案中，钌化检测剂混合物包含抗体。在一些实施方案中，抗体选自下组：抗人IgG、抗人IgM、抗人IgE、抗兔Ig及其任何组合。在一些实施方案中，检测特异性地检测ADA而不检测因子XI和/或因子XIa。
[0016]在一些实施方案中，方法进一步包含在温育后洗涤。
[0017]在一些实施方案中，抗因子XI和/或抗因子XIa抗体或其抗原结合片段的浓度为约0.25μg/ml。
[0018]在一些实施方案中，抗因子XI和/或抗因子XIa抗体或其抗原结合片段包含重链可变区(VH)，其包含SEQ ID NO:9或29中的互补决定区HCDR1、HCDR2及HCDR3；以及轻链可变区(VL)，其包含SEQ ID NO:19或39中的互补决定区LCDR1、LCDR2、LCDR3。
[0019]在一些实施方案中，抗因子XI和/或抗因子XIa抗体或其抗原结合片段包含：i.SEQ ID NO:23的重链可变区CDR1；SEQ ID NO:24的重链可变区CDR2；SEQ ID NO:25的重链可变区CDR3；SEQ ID NO:33的轻链可变区CDR1；SEQ ID NO:34的轻链可变区CDR2；以及SEQ ID NO:35的轻链可变区CDR3；ii.SEQ ID NO:26的重链可变区CDR1；SEQ ID NO:27的重链可变区CDR2；SEQ ID NO:28的重链可变区CDR3；SEQ ID NO:36的轻链可变区CDR1；SEQ ID NO:37的轻链可变区CDR2；以及SEQ ID NO:38的轻链可变区CDR3；iii.SEQ ID NO:43的重链可变区CDR1；SEQ ID NO:44的重链可变区CDR2；SEQ ID NO:45的重链可变区CDR3；SEQ ID NO:47的轻链可变区CDR1；SEQ ID NO:37的轻链可变区CDR2；以及SEQ ID NO:15的轻链可变区CDR3；或iv.SEQ ID NO:46的重链可变区CDR1；SEQ ID NO:4的重链可变区CDR2；SEQ ID NO:5的重链可变区CDR3；SEQ ID NO:33的轻链可变区CDR1；SEQ ID NO:14的轻链可变区CDR2；以及SEQ ID NO:15的轻链可变区CDR3。
[0020]在一些实施方案中，抗因子XI和/或抗因子XIa抗体或其抗原结合片段包含选自由SEQ ID NO:9、29及与其具有90％同一性的VH组成的组的重链可变区(VH)；以及选自由SEQ ID NO:19、39及与其具有90％同一性的VL组成的组的轻链可变区(VL)。在某些实施方案中，抗因子XI和/或抗因子XIa抗体或其抗原结合片段包含选自由SEQ ID NO:9及29组成的组的
重链可变区(本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.检测针对抗因子XI和/或抗因子XIa抗体或其抗原结合片段的抗药抗体(ADA)的方法，其中所述方法包括：a.将样品与酸一起温育以解离所述样品中存在的抗因子XI和/或抗因子XIa抗体
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抗原复合物和/或解离抗因子XI和/或抗因子XIa抗体
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ADA复合物，以产生酸消化物，b.将所述酸消化物在包被有所述抗因子XI和/或抗因子XIa抗体或其抗原结合片段的板上温育，c.中和所述酸消化物，及d.使用钌化检测剂混合物检测所述ADA的存在。2.如权利要求1的方法，其中所述样品是来自受试者的样品。3.如权利要求1或2的方法，其中所述样品选自下组：来自受试者的血液、血浆或血清。4.如权利要求1的方法，其中所述方法包含制备所述样品的初始步骤。5.如权利要求1至4中任一项的方法，其中所述酸选自下组：乙酸、柠檬酸、磷酸及其混合物。6.如权利要求5的方法，其中所述酸是乙酸。7.如权利要求6的方法，其中所述乙酸的浓度为约300mM。8.如权利要求1至7中任一项的方法，其中所述抗原是因子XI和/或因子XIa。9.如权利要求1至8中任一项的方法，其中所述板包被有链霉抗生物素蛋白。10.如权利要求1至9中任一项的方法，其中所述板上的所述抗因子XI和/或抗因子XIa抗体或其抗原结合片段的浓度选自下组：约0.1μg/ml、约0.25μg/ml、约0.5μg/ml、约0.75μg/ml及约1μg/ml。11.如权利要求10的方法，其中所述板上的所述抗因子XI和/或抗因子XIa抗体或其抗原结合片段的浓度为约0.25μg/ml。12.如权利要求1至11中任一项的方法，其中所述中和允许所述ADA结合所述经包被板上的所述抗因子XI和/或抗因子XIa抗体或其抗原结合片段。13.如权利要求1至12中任一项的方法，其中所述中和使用pH为约8.0的碱。14.如权利要求1至13中任一项的方法，其中所述中和使用选自下组的碱：Tris、磷酸盐、HEPES、三乙醇胺及其混合物。15.如权利要求14的方法，其中所述碱是Tris。16.如权利要求1至14中任一项的方法，其中所述钌化检测剂混合物包含抗体。17.如权利要求16的方法，其中所述抗体选自下组：抗人IgG、抗人IgM、抗人IgE、抗兔Ig及其任何组合。18.如权利要求1至17中任一项的方法，其中所述检测特异性地检测所述ADA而不检测因子XI和/或因子XIa。19.如权利要求1至18中任一项的方法，其进一步包括在所述温育后洗涤。20.如权利要求1至19中任一项的方法，其中所述抗因子XI和/或抗因子XIa抗体或其抗原结合片段的浓度为约0.25μg/ml。21.如权利要求1至20中任一项的方法，其中所述抗因子XI和/或抗因子XIa抗体或其抗原结合片段包含重链可变区(VH)，其包含SEQ ID NO:9或29中的互补决定区HCDR1、HCDR2及HCDR3；以及轻链可变区(VL)，其包含SEQ ID NO:19或39中的互补决定区LCDR1、LCDR2、
LCDR3。22.如权利要求1至21中任一项的方法，其中所述抗因子XI和/或抗因子XIa抗体或其抗原结合片段包含：i.SEQ ID NO:23的重链可变区CDR1；SEQ ID NO:24的重链可变区CDR2；SEQ ID NO:25的重链可变区CDR3；SEQ ID NO:33的轻链可变区CDR1；SEQ ID NO:34的轻链可变区CDR2；以及SEQ ID NO:35的轻链可变区CDR3；ii.SEQ ID NO:26的重链可变区CDR1；SEQ ID NO:27的重链可变区CDR2；SEQ ID NO:28的重链可变区CDR3；SEQ ID NO:36的轻链可变区CDR1；SEQ ID NO:37的轻链可变区CDR2；以及SEQ ID NO:38的轻链可变区CDR3；iii.SEQ ID NO:43的重链可变区CDR1；SEQ ID NO:44的重链可变区CDR2；SEQ ID NO:45的重链可变区CDR3；SEQ ID NO:47的轻链可变区CDR1；SEQ ID NO:37的轻链可变区CDR2；以及SEQ ID NO:15的轻链可变区CDR3；或iv.SEQ ID NO:46的重链可变区CDR1；SEQ ID NO:4的重链可变区CDR2；SEQ ID NO:5的重链可变区CDR3；SEQ ID NO:33的轻链可变区CDR1；SEQ ID NO:14的轻链可变区CDR2；以及SEQ ID NO:15的轻链可变区CDR3。23.如权利要求1至22中任一项的方法，其中所述抗因子XI和/或抗因子XIa抗体或其抗原结合片段包含选自由SEQ ID NO:9、29及与其具有90％同一性的VH组成的组的重链可变区(VH)；以及选自由SEQ ID NO:19、39及与其具有90％同一性的VL组成的组的轻链可变区(VL)。24.如权利要求1至23中任一项的方法，其中所述抗因子XI和/或抗因子XIa抗体或其抗原结合片段包含选自由SEQ ID NO:9及29组成的组的重链可变区(VH)；以及选自由SEQ ID NO:19及39组成的组的轻链可变区(VL)。25.如权利要求1至24中任一项的方法，其中所述抗因子XI和/或抗因子XIa抗体包含含有SEQ ID NO:31、11的氨基酸序列的重链及与其具有90％同一性的重链；以及含有SEQ ID NO:41、21的氨基酸序列的轻链及与其具有90％同一性的轻链。26.如权利要求1至25中任一项的方法，其中所述抗因子XI和/或抗因子XIa抗体包含含有SEQ ID NO:31的氨基酸序列的重链及含有SEQ ID NO:41的氨基酸序列的轻链。27.如权利要求1至26中任一项的方法，其中所述抗因子XI和/或抗因子XIa抗体是人单克隆抗体。28.如权利要求27的方法，其中所述抗因子XI和/或抗因子XI...

【专利技术属性】
技术研发人员：D，
申请(专利权)人：安托斯治疗股份有限公司，
类型：发明
国别省市：