一种具有双层结构的口腔胶原膜及其制备方法技术

本发明专利技术属于医用生物材料领域，具体涉及一种具有双层结构的口腔胶原膜及其制备方法，制备方法包括取材、制备粗糙面、制备光滑面、光滑面干燥和双层复合干燥。本发明专利技术公开的口腔胶原膜为双层结构，光滑面采用经减压干燥复水后再真空冷冻干燥的方式，所得材料孔隙小且致密，机械强度和机械稳定性好；粗糙面采用真空冷冻干燥的方法制备，孔隙稍大且疏松，利于细胞粘附和再生。光滑面引入纳米银粒子，可缓慢向周围环境释放银粒子，有效抗菌消炎，降低膜暴露后感染的风险。粗糙面附着锌取代羟基磷灰石，可缓慢向周围环境释放锌离子，提高胶原膜的生物活性，加速骨再生的效率。本发明专利技术公开的口腔胶原膜延长了其降解周期，可更好得与骨再生周期相匹配。期相匹配。期相匹配。

【技术实现步骤摘要】
一种具有双层结构的口腔胶原膜及其制备方法


[0001]本专利技术属于医用生物材料领域，具体涉及一种具有双层结构的口腔胶原膜及其制备方法。

技术介绍

[0002]引导骨组织再生（GBR）是目前牙槽嵴保留或增高最常见的手段之一，已被认为是一种标准的治疗方式。而屏障膜在GBR中发挥着关键作用，它在软组织和骨缺损区域之间形成屏障，阻止了生长速度较快的上皮细胞向缺损区生长，保护骨缺损区并形成骨细胞再生的微环境，为骨细胞的再生提供空间条件。然而理想的屏障膜还应具备一些其他条件，如：生物相容性和细胞亲和性；降解周期与组织的再生时间匹配；降解产物在体内无不良反应，膜的降解过程不影响组织再生；具备一定的机械强度，柔韧性，亲水性和可操作性。
[0003]目前研究最多的两类屏障膜为不可吸收膜和可吸收性的膜。不可吸收屏障膜主要以钛膜和聚四氟乙烯膜为代表，此类膜可以起到优异的屏障作用，以其良好的机械稳定性、空间维持能力、生物相容性和促进骨再生的能力而被广泛应用，但其缺点也是显而易见的，一方面其硬度太高可能导致软组织裂开，使膜暴露于口腔微环境，引发感染和屏障功能失效；另一方面因其不可吸收，需二次手术取出，给患者造成多次伤害和严重的身心痛苦。可吸收性膜包括天然和合成的可吸收性膜，而其中胶原膜因其优异的生物相容性和生物活性，目前被研究最多应用最广，作为细胞外基质的主要成分，胶原由于其结构支持和再生特性而表现出优异的生物相容性和生物活性，除了一步手术的优点之外，胶原膜在临床上加速了早期伤口稳定和缺损的初始闭合，相比于不可吸收膜，胶原膜也表现出低的暴露率，且胶原是唯一的动物来源的屏障膜材料，其低免疫原性以及对成纤维细胞和成骨细胞的粘附和趋化可介导优异的组织整合和血管生成，目前全球使用最多的胶原膜是瑞士盖氏公司生产的胶原膜产品Bio
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Gide，由猪皮经一系列处理制备而成的天然胶原膜，其具备经典的双面结构，一面光滑，一面粗糙，光滑面面向软组织，阻止软组织侵入骨缺损区，粗糙面面向缺损区，利于细胞粘附和再生，但胶原膜本身也存在明显的不足之处，限制了其临床应用，如降解周期较短，无法匹配骨再生周期，机械强度和机械稳定性不足，难以稳定地维持骨再生环境的空间条件，增加了膜塌陷的风险，胶原膜在口腔环境暴露后也不具备抗菌消炎的作用，导致手术失败。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于克服现有技术的缺点，提供一种具有双层结构的口腔胶原膜及其制备方法。
[0005]本专利技术的目的通过以下技术方案来实现：一种具有双层结构的口腔胶原膜的制备方法，它包括以下步骤：S1. 取材：取小肠粘膜下层，进行脱细胞和脱脂处理，得脱细胞的SIS材料；S2. 制备粗糙面：将脱细胞的SIS材料浸泡在锌取代羟基磷灰石的分散液中，室温
震荡22～26 h，得锌取代羟基磷灰石的SIS材料；S3. 制备光滑面：将脱细胞的SIS材料浸没在纳米银溶液中，超声处理10～15 min，所述超声的频率为50～60 Hz，得纳米银附着的SIS材料；S4. 光滑面干燥：将纳米银附着的SIS材料平铺于一光滑平板上，横竖交叉铺层2～5层后用另一光滑平板覆盖并压实，常温下在0～2.5 KPa的压力下干燥10～15 h，去除光滑平板，得干燥后的纳米银附着的SIS材料；S5. 双层复合干燥：将干燥后的纳米银附着的SIS材料浸入水中4～7 min后平铺于一光滑平板上，在其上方平铺步骤S2制备的锌取代羟基磷灰石的SIS材料，所铺层数与步骤S3中纳米银附着的SIS材料横竖交叉铺层的层数相同，铺层结束后用另一平板覆盖并压实，并置于
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80～
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20℃的温度下预冻2～8 h，然后进行真空冷冻干燥，去除光滑平板，制得具有双层结构的口腔胶原膜。
[0006]进一步地，步骤S1中所述小肠粘膜下层的制备方法为：取新鲜猪小肠，清洗干净后去除小肠粘膜层、浆膜层和肌肉层，保留粘膜下层，用PBS缓冲液反复清洗8～10次。
[0007]进一步地，步骤S1中所述脱细胞和脱脂处理的具体操作为：取小肠粘膜下层用质量百分比浓度为0.1～0.5%的胰蛋白酶脱细胞4～12 h，再使用质量百分比浓度为0.1～0.5%的去垢剂，所述去垢剂为十二烷基硫酸钠、曲拉通X
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100或脱氧胆酸钠中的任意一种，室温摇床上震荡清洗7～9次，每次25～35 min，操作完成后再用PBS缓冲液清洗8～12次。
[0008]进一步地，步骤S2中所述锌取代羟基磷灰石的制备方法为：将(NH4)2HPO4溶于蒸馏水中制得浓度为0.1 mol/L的水溶液A，将Ca(CH3COO)2•
H2O和Zn(CH3COO)2•
H2O溶于蒸馏水中，制备成(Zn)/(Ca+Zn)摩尔比值为0.01～0.1的混合水溶液B，在剧烈搅拌下将B加入到A中，保持(Ca+Zn)/(P)的摩尔比值为1.67，用氨水溶液调节pH至8，在85～95℃下搅拌4.5～5.5 h，对所得悬浮液进行抽滤，所得粉末状产物在95～110℃下干燥9～11 h，即得锌取代羟基磷灰石。
[0009]进一步地，步骤S2中所述锌取代羟基磷灰石的分散液的浓度为15～25 mg/mL。
[0010]进一步地，步骤S3中所述纳米银溶液的浓度为0.5～1.5 mg/mL。
[0011]进一步地，步骤S5中所述真空冷冻干燥的温度为
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5～15℃，时间为20～40 h，压力为0.1～2 mbar。
[0012]上述的方法制备的具有双层结构的口腔胶原膜。
[0013]本专利技术中：1. 粗糙面采用脱细胞的SIS材料通过加入锌取代羟基磷灰石的分散液方式获得，保存了内部化学键和胶原纤维的完整性，提高了力学强度和延长了降解周期。
[0014]2. 光滑面采用了超声的方式使得纳米银粒子能够更加容易进入SIS材料的孔隙内部，有利于银粒子随着材料从外到内降解过程中的缓释。
[0015]3. SIS材料中无机物锌取代羟基磷灰石的加入增加了其力学强度和降解周期，在材料降解过程中可向周围组织缓慢释放锌离子和钙离子，锌离子可以调节新骨的生成，钙离子是骨生成不可或缺的元素之一。
[0016]本专利技术的有益效果：本专利技术公开了一种具有双层结构的口腔胶原膜，光滑面采用经减压干燥复水后再真空冷冻干燥的方式，所得材料孔隙小且致密，机械强度和机械稳定性好；粗糙面采用真空
冷冻干燥的方法进行制备，其孔隙稍大且疏松，利于细胞粘附和再生。光滑面引入了纳米银粒子，可缓慢向周围环境释放银粒子，可以有效抗菌消炎，降低膜暴露后感染的风险。粗糙面附着了锌取代羟基磷灰石，可以缓慢向周围环境释放锌离子，提高胶原膜的生物活性，可加速骨再生的效率。本专利技术公开的口腔胶原膜延长了其降解周期，可以更好得与骨再生周期相匹配。
附图说明
[0017]图1为本专利技术方法制备的具有双层结构的口腔胶原膜的粗糙面电镜图。
[0018]图2为本专利技术方法制备的具有双层结构的口腔胶原膜的光滑面电镜图。
具体实施方式本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有双层结构的口腔胶原膜的制备方法，其特征在于，它包括以下步骤：S1. 取材：取小肠粘膜下层，进行脱细胞和脱脂处理，得脱细胞的SIS材料；S2. 制备粗糙面：将脱细胞的SIS材料浸泡在锌取代羟基磷灰石的分散液中，室温震荡22～26 h，得锌取代羟基磷灰石的材料；S3. 制备光滑面：将脱细胞的SIS材料浸没在纳米银溶液中，超声处理10～15 min，所述超声的频率为50～60 Hz，得纳米银附着的SIS材料；S4. 光滑面干燥：将纳米银附着的SIS材料平铺于一光滑平板上，横竖交叉铺层2～5层后用另一光滑平板覆盖并压实，常温下在0～2.5 KPa的压力下干燥10～15 h，去除光滑平板，得干燥后的纳米银附着的SIS材料；S5. 双层复合干燥：将干燥后的纳米银附着的SIS材料浸入水中4～7 min后平铺于一光滑平板上，在其上方平铺步骤S2制备的锌取代羟基磷灰石的材料，所铺层数与步骤S3中纳米银附着的SIS材料横竖交叉铺层的层数相同，铺层结束后用另一平板覆盖并压实，并置于
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20℃的温度下预冻2～8 h，然后进行真空冷冻干燥，去除光滑平板，制得具有双层结构的口腔胶原膜。2.根据权利要求1所述的一种具有双层结构的口腔胶原膜的制备方法，其特征在于，步骤S1中所述小肠粘膜下层的制备方法为：取新鲜猪小肠，清洗干净后去除小肠粘膜层、浆膜层和肌肉层，保留粘膜下层，用PBS缓冲液反复清洗8～10次。3.根据权利要求1所述的一种具有双层结构的口腔胶原膜的制备方法，其特征在于，步骤S1中所述脱细胞和脱脂处理的具体操作为：取小肠粘膜下层用质量百分比浓度为0.1～0.5%的胰蛋白酶脱细胞...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵小龙，鄢新章，王昌健，
申请(专利权)人：成都贝施美医疗科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：