毕赤酵母表达犬重组白蛋白及其纯化方法技术

本发明专利技术涉及基因工程技术领域，具体涉及毕赤酵母表达犬重组白蛋白及其纯化方法。本发明专利技术提供了经密码子优化后的犬白蛋白基因、表达载体、宿主菌及其应用，所述犬白蛋白基因具备如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。本发明专利技术提供的宿主菌为包含所述犬白蛋白基因且能够高效表达犬白蛋白的毕赤酵母菌。本发明专利技术还提供了采用毕赤酵母经重组表达获得的犬白蛋白及经发酵生产的犬白蛋白的方法。本发明专利技术提供的犬白蛋白生产工艺简单、价格低廉、蛋白产率高、回收纯度高达97％以上，适用于工业化大规模生产重组犬白蛋白。白蛋白。

【技术实现步骤摘要】
毕赤酵母表达犬重组白蛋白及其纯化方法


[0001]本专利技术涉及基因工程
，具体涉及毕赤酵母表达犬重组白蛋白及其纯化方法。

技术介绍

[0002]犬血白蛋白(Canine serum albumin，CSA)的一级序列表明该蛋白是由584个氨基酸组成的单一多肽，CSA与HSA和BSA的成对序列同源性较高，整体结构与HSA和其他哺乳动物白蛋白的结构非常相似，由三个拓扑相同的结构域(I，残基1
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196；II，残基197
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383；和III，残基384
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584)组成，每个结构域都分为两个子结构域。尽管结构域I
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III具有对称的重复形态，但它们的不对称空间排列形成了独特的心形结构。CSA中共有35个Cys残基。结构域I中的Cys
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34是唯一具有不参与17个二硫键的游离巯基的Cys，这也是血管内还原性巯基的主要来源。Cys
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34使得白蛋白易于形成含半胱氨酸或谷胱甘肽的异型二硫化物。白蛋白部分变性后以Cys
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34硫本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.编码犬白蛋白的核酸，其具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。2.包含权利要求1所述核酸的表达载体。3.表达犬白蛋白的宿主菌，其特征在于，其表达如权利要求1所述的核酸。4.根据权利要求3所述的宿主菌，其特征在于，所述宿主菌包括毕赤酵母菌。5.权利要求3或4所述宿主菌的构建方法，其特征在于，取权利要求2所述的表达载体转化感受态菌株后获得所述宿主菌。6.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于，所述宿主菌经包含0.25～5mg/mL G418的YPD培养基筛选后获得。7.犬白蛋白的制备方法，其特征在于，包括培养如下
①
或
②
所述的宿主菌，诱导所述犬白蛋白的表达：
①...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙博，张世野，赵维昊，王泽辉，
申请(专利权)人：长春天和博为生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：