试剂盒及其使用方法技术

本发明专利技术公开了一种试剂盒及其使用方法，该试剂盒包括：能特异性检测受试者样本中的第一组标记基因，和/或，第二组标记基因的甲基化水平的试剂；所述第一组标记基因包括SEQ ID No.1至SEQ ID No.10中的任意一种或多种的组合，所述第二组标记基因包括SEQ ID No.11至SEQ ID No.20中的任意一种或多种的组合；通过提供能特异性检测受试者样本中的第一组标记基因，和/或，第二组标记基因的甲基化水平的试剂，用于检测LGSIL，为检测LGSIL提供了一种新的思路，具有重要的临床应用意义。具有重要的临床应用意义。

【技术实现步骤摘要】
试剂盒及其使用方法


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种试剂盒及其使用方法。

技术介绍

[0002]宫颈癌(Cervical cancer,CC)是指发生在宫颈阴道部或移行带的鳞状上皮细胞及宫颈管内膜的柱状上皮细胞交界处的恶性肿瘤，通常起源于持续感染高危型人乳头瘤病毒(human papilloma virus，HPV)而导致的细胞转化。目前是全球范围内，特别是在中国，最常见的女性癌症疾病之一。
[0003]宫颈癌发生的早期一般先经历低等级鳞状上皮内病变(Low grade squamous intraepithelial lesion，简称LGSIL)和高等级鳞状上皮内病变(High grade squamous intraepithelial lesion，简称HGSIL)。如果不进行积极治疗，可能往往会发展为晚期癌症，如鳞状细胞癌(Squamous cell carcinoma，简称SCC)或者腺癌(Adenomatous carcinoma，简称ACC)。
[0004]然而，目前多数试剂盒仅针对直接检测SCC和ACC，一旦发现，往往便是癌症晚期，因此在这之前，提前鉴别出LGSIL，以进行干预治疗具有重要的临床意义。

技术实现思路

[0005]鉴于此，本专利技术提供一种用试剂盒及其使用方法，用于检测LGSIL，为医疗服务提供指导。
[0006]第一方面，本专利技术提供一种试剂盒，包括：能特异性检测受试者样本中的第一组标记基因，和/或，第二组标记基因的甲基化水平的试剂；所述第一组标记基因包括SEQ ID No.1至SEQ ID No.10中的任意一种或多种的组合，所述第二组标记基因包括SEQ ID No.11至SEQ ID No.20中的任意一种或多种的组合。
[0007]可选的，所述第一组标记基因包括SEQ ID No.1至SEQ ID No.10中的至少三种，所述第二组标记基因包括SEQ ID No.11至SEQ ID No.20中的至少三种。
[0008]可选的，所述第一组标记基因包括SEQ ID No.1至SEQ ID No.10中的至少五种，所述第二组标记基因包括SEQ ID No.11至SEQ ID No.20中的至少五种。
[0009]可选的，所述第一组标记基因包括SEQ ID No.1至SEQ ID No.10中的十种，所述第二组标记基因包括SEQ ID No.11至SEQ ID No.20中的十种。
[0010]可选的，所述甲基化水平是每一区域核苷酸序列中甲基化CpG位点的数量占该区域核苷酸序列中总CpG位点总数量的比例。
[0011]可选的，所述试剂包括可特异性扩增所述标记基因的引物和/或探针。
[0012]可选的，所述试剂还包括阳性对照试剂，所述阳性对照试剂包括SEQ ID No.1至SEQ ID No.20中的至少一种的核酸分子。
[0013]可选的，所述样本来自人类的离体宫颈细胞。
[0014]第二方面，本专利技术还提供一种离体宫颈细胞类型的的判定方法，所述方法包括
(a)：检测受试者离体宫颈细胞样本中的所述第一组标记基因，和/或，所述第二组标记基因的甲基化水平；以及(b)：根据步骤(a)所述的甲基化水平评估所述样本是否为LGSIL细胞；
[0015]其中，所述第一组标记基因包括SEQ ID No.1至SEQ ID No.10中的任意一种或多种的组合，所述第二组标记基因包括SEQ ID No.11至SEQ ID No.20中的任意一种或多种的组合。
[0016]可选的，所述(a)包括：检测样本中的所述第一组标记基因的甲基化水平，和/或，所述第二组标记基因的甲基化水平。
[0017]可选的，所述(b)包括：
[0018]根据所述第一组标记基因的甲基化水平判断是否为高于第一阈值，若高于第一阈值，则指示所述样本是LGSIL细胞，若不高于第一阈值，则指示所述样本不是LGSIL细胞；
[0019]所述第一阈值为健康受试者的样本中的所述第一组标记基因的甲基化水平。
[0020]可选的，所述(b)包括：
[0021]根据所述第二组标记基因的甲基化水平判断是否低于第二阈值，若低于第二阈值，则指示所述样本是LGSIL细胞，若不低于第二阈值，则指示所述样本不是LGSIL细胞；
[0022]所述第二阈值为健康受试者的样本中的所述第二组标记基因的甲基化水平。
[0023]可选的，所述(b)包括：
[0024]根据所述第一组标记基因的甲基化水平判断是否为高于第一阈值，若高于第一阈值，则指示所述样本是LGSIL细胞，若不高于第一阈值，则指示所述样本不是LGSIL细胞；和/或
[0025]根据所述第二组标记基因的甲基化水平判断是否低于第二阈值，若低于第二阈值，则指示所述样本是LGSIL细胞，若不低于第二阈值，则指示所述样本不是LGSIL细胞；
[0026]所述第一阈值为正常受试者的所述第一组标记基因的甲基化水平；所述第二阈值为正常受试者的所述第二组标记基因的甲基化水平。
[0027]可选的，所述样本是离体血液样本或者宫颈穿刺活检样本。
[0028]本专利技术提供一种试剂盒及其使用方法，通过提供能特异性检测受试者样本中的第一组标记基因，和/或，第二组标记基因的甲基化水平的试剂，用于检测LGSIL，为检测LGSIL提供了一种新的思路，具有重要的临床应用意义。
具体实施方式
[0029]本专利技术提供一种试剂盒及其使用方法，旨在通过提供能特异性检测受试者样本中的第一组标记基因，和/或，第二组标记基因的甲基化水平的试剂，用于检测LGSIL，为检测LGSIL提供了一种新的思路，具有重要的临床应用意义。
[0030]术语定义：
[0031]术语“受试者”和“患者”包括人类受试者和其它哺乳类动物，或者希望使用本专利技术方法进行分析或治疗的任何个体。落入本专利技术范围内的合适的哺乳类动物包括但不限于：灵长类、家畜(例如绵羊、牛、马、猴、猪)、实验室试验动物(例如兔、小鼠、大鼠、豚鼠、仓鼠)、宠物(例如猫、狗)和圈养野生动物(例如狐狸、鹿、澳洲野狗)。优选地，为人类。
[0032]术语“健康受试者”和“健康组”，的具体定义可参看临床实验指导原则，尤其是指未患有低等级宫颈上皮内瘤变(low grade squamous intraepithelial lesion，LGSIL)，
HGSIL(高等级宫颈上皮内瘤变，high grade squamous intraepithelial lesion)，宫颈腺癌(Adenocarcinoma of Cervix，CCA)和CCS(Squamous Cell Carcinoma，宫颈鳞状细胞癌)人类受试者和其它哺乳类动物。
[0033]术语“样本”可以包括：来源于手术切除术或活组织检查(例如来自患者活组织检查的细胞)的肿瘤、组织、体液、血液或者活组织。组织可以以任本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种试剂盒，其特征在于，包括：能特异性检测受试者样本中的第一组标记基因，和/或，第二组标记基因的甲基化水平的试剂；所述第一组标记基因包括SEQ ID No.1至SEQ ID No.10中的任意一种或多种的组合，所述第二组标记基因包括SEQ ID No.11至SEQ ID No.20中的任意一种或多种的组合。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述第一组标记基因包括SEQ ID No.1至SEQ ID No.10中的至少三种，所述第二组标记基因包括SEQ ID No.11至SEQ ID No.20中的至少三种。3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述第一组标记基因包括SEQ ID No.1至SEQ ID No.10中的至少五种，所述第二组标记基因包括SEQ ID No.11至SEQ ID No.20中的至少五种。4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述第一组标记基因包括SEQ ID No.1至SEQ ID No.10中的十种，所述第二组标记基因包括SEQ IDNo.11至SEQ ID No.20中的十种。5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述甲基化水平是每一区域核苷酸序列中甲基化CpG位点的数量占该区域核苷酸序列中总CpG位点总数量的比例。6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂包括可特异性扩增所述标记基因的引物和/或探针。7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂还包括阳性对照试剂，所述阳性对照试剂包括SEQ ID No.1至SEQ ID No.20中的至少一种的核酸分子。8.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述样本来自人类的离体宫颈细胞。9.一种离体宫颈细胞类型的的判定方法，其特征在于，所述方法包括(a)：检测受试者离体宫颈细胞样本中的所述第一组标记基因，和/或，所述第二组标记基因的甲基化水平；以及(...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙德强，
申请(专利权)人：浙江高美生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：