一种DNA聚合酶IIIα亚基突变体及其应用制造技术

本公开涉及一种DNA聚合酶IIIα亚基突变体及其应用。具体来说，本公开涉及一种DNA聚合酶IIIα亚基突变体，编码前述突变体的分离的多核苷酸，包含前述多核苷酸的载体、突变器，以及相应的重组宿主细胞，以及前述产品的用途。前述DNA聚合酶IIIα亚基突变体，编码前述突变体的分离的多核苷酸，包含前述多核苷酸的载体、突变器，以及相应的重组宿主细胞均可以提高棒杆菌属的菌株，特别是源自谷氨酸棒杆菌的菌株的随机突变频率，或者降低前述菌株的DNA复制保真率。复制保真率。

【技术实现步骤摘要】
一种DNA聚合酶III
α
亚基突变体及其应用
[0001]优先权和相关申请
[0002]本公开要求2022年02月16日提交的名称为“一种DNA聚合酶IIIα亚基突变体及其应用”的中国专利申请202210141981.6的优先权，该申请包括附录在内的全部内容作为参考并入本公开。


[0003]本公开涉及分子生物学和生物工程领域。特别的，本公开涉及一种能够提高菌株随机突变频率的突变器。具体来说，本公开涉及一种通过针对棒杆菌属的菌株，特别是谷氨酸棒杆菌的DNA聚合酶III的α亚基基因及蛋白序列的分析和突变，构建的一种能够提高棒杆菌，特别是谷氨酸棒杆菌的随机突变频率或者降低的DNA复制保真率的突变器。

技术介绍

[0004]谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)是从土壤中分离得到的一种非致病性革兰氏阳性细菌，也是目前生产氨基酸、有机酸等大宗化学品的重要工业菌株，在食品、医药等领域应用广泛。自Kinoshita等(Journal of General&Applied Micr本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种DNA聚合酶IIIα亚基突变体，其中，所述突变体选自如下(i)
‑
(iii)组成的组中的任一项：(i)所述突变体的氨基酸序列对应于SEQ ID NO：13所示的序列，具有如下一个或多个位置处的突变的氨基酸：第20位突变为半胱氨酸、组氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、精氨酸、缬氨酸或酪氨酸，和/或第223位突变为丙氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸或天冬酰胺；(ii)与(i)所示的氨基酸序列具有至少90％，可选至少95％，优选至少97％，更优选至少98％，最优选至少99％的序列同一性的多肽；并且，含有所述突变体的突变体菌株相对于野生型菌株，具有提高的随机突变频率或降低的DNA复制保真率；(iii)如(i)或(ii)所示氨基酸序列的多肽在N端和C端的至少一端添加或缺失一个或多个氨基酸的多肽；并且，含有所述多肽的突变体菌株相对于野生型菌株，具有提高的随机突变频率或降低的DNA复制保真率。2.一种分离的多核苷酸，其中，所述多核苷酸编码如权利要求1所述的突变体。3.一种重组表达载体，其中，所述载体包含如权利要求2所述的多核苷酸。4.一种重组宿主细胞，其中，所述重组宿主细胞包含如权利要求1所述的突变体、如权利要求2所述的多核苷酸或如权利要求3所述的重组表达载体。5.根据权利要求4所述的重组宿主细胞，其中，所述宿主细胞来源于棒状杆菌属(Corynebacterium)；优选的，所述宿主细胞来源于谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)。6.根据权利要求1所述的突变...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙际宾，陈久洲，郑平，蔡柠匀，周文娟，王钰，
申请(专利权)人：中国科学院天津工业生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：