具有抗皮肤衰老功效的化妆品活性成分制造技术

本发明专利技术公开了具有抗皮肤衰老功效的化妆品活性成分，为一种均一性较高的纯化多糖，通过提取、脱蛋白、DEAE

【技术实现步骤摘要】
具有抗皮肤衰老功效的化妆品活性成分


[0001]本专利技术属于化妆品领域，涉及一种具有抗皮肤衰老功效的化妆品活性成分。

技术介绍

[0002]衰老是任何生物生命活动进程中的必经阶段，是生物体发育成熟后，随年龄增长而发生的渐进的、受遗传因素影响的、全身复杂的形态结构与生理功能不可逆的衰退过程。皮肤是人体最大的器官，担负着保护、感觉、调节体温、分泌、排泄和免疫等诸多方面的作用，随着年龄的增长，皮肤也会像人体的其他器官一样逐渐老化，功能减弱、丧失，产生各种病变。
[0003]皮肤衰老会松弛和出现皱纹，变得粗糙、皱纹加深加粗；表皮结构异常、色素沉着、出现老年斑；肌肤弹性不再、变得松弛。在衰老的皮肤中表皮细胞更新减慢、屏障功能减弱，角质形成细胞活力下降，表皮受伤后修复能力减弱，其中屏障功能的减弱导致皮肤干燥、脱屑、皱纹等。衰老皮肤的真皮层中成纤维细胞数量逐渐减少、合成胶原蛋白和弹性蛋白的能力下降，且I型胶原和III型胶原的比例变小，胶原纤维变粗，出现异常交链。
[0004]总之，皮肤衰老最核心的问题就是表皮成纤维细胞和真皮成纤维细胞的增殖变缓、更新缓慢且易于衰老。因此，针对性地提高表皮成纤维细胞和真皮成纤维细胞的增殖活性同时抑制这些细胞衰老就可以极大缓解皮肤衰老。
[0005]钟花报春(Primulasikkimensis Hook.f.)为报春花科、报春花属多年生草本植物。根状茎粗短，多数纤维状须根。叶片椭圆形至矩圆形或倒披针形，先端圆形或有时稍锐尖，上面深绿色，下面淡绿色，中肋宽扁，网脉极纤细；叶柄甚短。花葶稍粗壮，顶端被黄粉；伞形花序，多花，苞片披针形或线状披针形，花萼钟状或狭钟状，裂片披针形或三角状披针形，花冠黄色，乳白色，蒴果长圆体状，6月开花，9
‑
10月结果。
[0006]钟花报春的花中含有多种成分，且生物活性丰富。多糖是其中研究较少一类成分。

技术实现思路

[0007]为了克服现有技术的不足，本专利技术提供一种具有抗皮肤衰老功效的化妆品活性成分。
[0008]技术方案如下：
[0009]一种具有抗皮肤衰老功效的化妆品活性成分，为一种纯化多糖。
[0010]进一步地，纯化多糖的制备步骤包括：
[0011]步骤1、总多糖的提取
[0012]取钟花报春花，先用石油醚脱脂，再用蒸馏水加热提取，过滤，滤液减压浓缩，加入4倍体积无水乙醇混合均匀，静置醇沉，离心收集沉淀，得到总多糖；
[0013]步骤2、三氯乙酸脱蛋白
[0014]取总多糖，用三氯乙酸脱蛋白，得到脱蛋白总多糖；
[0015]步骤3、DEAE
‑
52纤维素柱层析
[0016]取脱蛋白总多糖，溶解于蒸馏水中，离心取上清上样于DEAE
‑
52纤维素层析柱，依次用蒸馏水、0.05、0.1、0.2mol/LNaCl溶液梯度洗脱，苯酚
‑
硫酸法测定每管洗脱液的吸光度值，以管数为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制洗脱曲线；根据洗脱曲线，合并0.1mol/LNaCl溶液洗脱液，透析脱盐，浓缩、冷冻干燥得到分级多糖。
[0017]步骤4、Sephadex G
‑
100柱层析
[0018]称取分级多糖，溶解于蒸馏水中，过滤，取滤液上样于Sephadex G
‑
100层析柱，用蒸馏水洗脱，苯酚
‑
硫酸法测定每管洗脱液的吸光度值，以管数为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制洗脱曲线；根据洗脱曲线，将洗脱峰对应管号的洗脱液合并，浓缩、冷冻干燥，即得。
[0019]更进一步地，制备步骤中石油醚沸程为60～90℃。
[0020]更进一步地，制备步骤中蒸馏水加热提取温度为50～60℃。
[0021]更进一步地，制备步骤中三氯乙酸脱蛋白具体步骤为：取总多糖，用蒸馏水配制成多糖水溶液，缓慢滴加质量分数10％的三氯乙酸水溶液，多糖水溶液与三氯乙酸水溶液的体积比为20:1；4℃静置24h，4℃、5000rpm离心15分钟去除沉淀，上清液加入4倍体积无水乙醇混合均匀，静置醇沉24h，5000rpm离心15分钟，收集沉淀，冷冻干燥，得到脱蛋白总多糖。
[0022]更进一步地，制备步骤中DEAE
‑
52纤维素柱层析洗脱流速为2mL/min。
[0023]更进一步地，制备步骤中Sephadex G
‑
100柱层析洗脱流速为1mL/min。
[0024]上述任一化妆品活性成分用于制备抗皮肤衰老化妆品的用途。
[0025]技术效果如下：
[0026]本专利技术提供了一种均一性较高的钟花报春花纯化多糖，人皮肤细胞活性试验证明该纯化多糖可以有效对抗衰老造成的人皮肤细胞增殖变缓，有效改善衰老造成的人皮肤细胞中MMP
‑
1/TIMP
‑
1失衡，延缓皮肤衰老的进程，可用作抗皮肤衰老化妆品的活性成分。
附图说明
[0027]图1为DEAE
‑
52纤维素柱层析洗脱曲线。
[0028]图2为Sephadex G
‑
100柱层析洗脱曲线。
[0029]图3为纯化多糖的扫描电镜图。
[0030]图4为各组人表皮成纤维细胞中衰老标志蛋白表达。
[0031]图5为各组人真皮成纤维细胞中衰老标志蛋白表达。
具体实施方式
[0032]实施例1：多糖制备
[0033]一、材料和试剂
[0034]钟花报春花收集自四川阿坝小金县，经鉴定为报春花科、报春花属多年生草本植物钟花报春(Primula sikkimensis Hook.f.)的干燥花。
[0035]石油醚、无水乙醇、三氯乙酸为普通分析纯。
[0036]二、方法
[0037]1、总多糖的提取
[0038]取钟花报春花1kg，用10L沸程为60～90℃的石油醚脱脂，脱脂后加入到10L蒸馏水中，50～60℃加热提取3h，过滤，滤渣用10L蒸馏水50～60℃加热提取2h，合并两次提取液，
冷却，过滤，滤液用旋转蒸发仪减压浓缩至3L，加入12L无水乙醇混合均匀，静置醇沉24h，5000rpm离心15分钟，收集沉淀，得到总多糖15.6g。
[0039]2、三氯乙酸脱蛋白
[0040]取15g总多糖，用蒸馏水配制成浓度为20mg/mL的多糖水溶液，缓慢滴加质量分数10％的三氯乙酸水溶液，多糖水溶液与三氯乙酸水溶液的体积比为20:1。4℃静置24h，4℃、5000rpm离心15分钟去除沉淀，上清液加入4倍体积无水乙醇混合均匀，静置醇沉24h，5000rpm离心15分钟，收集沉淀，冷冻干燥，得到脱蛋白总多糖。
[0041]3、DEAE
‑
52纤维素柱层析
[0042]称取5g脱蛋白总多糖，溶解于10mL蒸馏水中，4000rpm离心10分钟，取上清上样于DEAE<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有抗皮肤衰老功效的化妆品活性成分，其特征在于：为一种纯化多糖。2.根据权利要求1所述的化妆品活性成分，其特征在于，纯化多糖的制备步骤包括：步骤1、总多糖的提取取钟花报春花，先用石油醚脱脂，再用蒸馏水加热提取，过滤，滤液减压浓缩，加入4倍体积无水乙醇混合均匀，静置醇沉，离心收集沉淀，得到总多糖；步骤2、三氯乙酸脱蛋白取总多糖，用三氯乙酸脱蛋白，得到脱蛋白总多糖；步骤3、DEAE
‑
52纤维素柱层析取脱蛋白总多糖，溶解于蒸馏水中，离心取上清上样于DEAE
‑
52纤维素层析柱，依次用蒸馏水、0.05、0.1、0.2mol/LNaCl溶液梯度洗脱，苯酚
‑
硫酸法测定每管洗脱液的吸光度值，以管数为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制洗脱曲线；根据洗脱曲线，合并0.1mol/LNaCl溶液洗脱液，透析脱盐，浓缩、冷冻干燥得到分级多糖。步骤4、SephadexG
‑
100柱层析称取分级多糖，溶解于蒸馏水中，过滤，取滤液上样于SephadexG
‑
100层析柱，用蒸馏水洗脱，苯酚
‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：请求不公布姓名，
申请(专利权)人：溯玄上海生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：