一种富血小板纤维蛋白复合膜及其制备方法与应用技术

本发明专利技术属于富血小板纤维蛋白复合膜制备技术领域，公开了一种富血小板纤维蛋白复合膜及其制备方法与应用。本发明专利技术通过壳聚糖制备方法可以制备高质量壳聚糖，从而大大提高复合膜质量；同时，通过氯化钙制备方法采用配制氯化铵溶液和氯化钙溶液的混合溶液；加入石灰粉进行复分解反应将反应器中第一步制得的氯化铵溶液和氯化钙溶液混合溶液的温度维持在86℃，向该混合溶液中加入石灰粉；蒸氨在第二步加入石灰粉进行复分解反应后进行蒸氨；母液处理，制得高纯度氯化钙，有利于复合膜的制备。有利于复合膜的制备。有利于复合膜的制备。

【技术实现步骤摘要】
一种富血小板纤维蛋白复合膜及其制备方法与应用


[0001]本专利技术属于富血小板纤维蛋白复合膜制备
，尤其涉及一种富血小板纤维蛋白复合膜及其制备方法与应用。

技术介绍

[0002]PRF即富血小板纤维蛋白，是platelet
‑
richfibrin的简写。在2001年由法国科学家Choukroun等人发现，是继富血小板血浆后第二代血小板浓缩制品，被定义为一个自体的白细胞和富血小板纤维生物材料。已广泛应用于口腔科、颌面外科、骨科、整形外科等，以往主要制备成膜状，用于创面的修复，现有学者研究将制备出的PRF凝胶与自体脂肪颗粒按一定比例混合，应用于自体脂肪隆胸等自体脂肪移植术中，提高自体脂肪的成活率；然而，现有富血小板纤维蛋白复合膜制备方法采用的原料壳聚糖质量差，影响复合膜质量；同时，采用的原料氯化钙纯度低，不利于复合膜的制备。
[0003]通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：
[0004](1)现有富血小板纤维蛋白复合膜制备方法采用的原料壳聚糖质量差，影响复合膜质量。
[0005](2)采用的原料氯化钙纯度低，不利于复合膜的制备。

技术实现思路

[0006]针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种富血小板纤维蛋白复合膜及其制备方法与应用。
[0007]本专利技术是这样实现的，一种富血小板纤维蛋白复合膜制备方法包括：
[0008]步骤一，从身体脂肪堆积较多的部位吸取脂肪；将获取的脂肪切割，再过滤；将获得的脂肪负压离心，所述负压范围是19kPa，包括将两个螺旋注射器通过注射器转换器连接，每个注射器里面平均放置获得的脂肪；
[0009]步骤二，同时将两个注射器拉至最大刻度，然后恢复原脂肪所在刻度；将获得的脂肪离心，中层即是纳米脂肪；按各配方原料的体积比例将纳米脂肪与富血小板纤维蛋白混合均匀，获得混合物，放置于5℃条件下备用；
[0010]所述富血小板纤维蛋白制备方法：
[0011]在目标对象局部穿刺皮肤用碘伏消毒；
[0012]再用无菌注射器的针头穿刺血管，成功之后抽取相对应的静脉血；
[0013]穿刺完毕以及拔针之后必须用棉签或者用棉球，用力按压穿刺针口的部位，防止其继续出血；
[0014]从静脉抽取血液后，迅速加入灭菌离心管，立即3000r/min离心15分钟；
[0015]在5℃冰箱静置35分钟，待血液凝固后，将血液凝固物取出；
[0016]将底部的血凝块切除，保留淡黄色凝胶状物质，即富血小板纤维蛋白；
[0017]步骤三，在常温条件下，将季铵化壳聚糖、抗氧化剂和医用氯化钙溶液按比例搅拌
形成均匀的混合液；在5℃条件下，把混合物与混合液搅拌均匀，转移到培养皿中静止成富血小板纤维蛋白复合膜。
[0018]进一步，所述壳聚糖制备方法如下：
[0019](1)将蛋白质、葡萄糖、琼脂粉混合制备培养基；将酵母细胞放入培养基进行培养；其中经培养的酵母细胞形成酵母细胞的生物质；
[0020](2)诱导所述经培养的酵母细胞进行减数分裂，其中经诱导的酵母细胞形成具有子囊孢子的子囊，并且其中每个子囊孢子在子囊孢子壁中含有壳聚糖保护层；
[0021](3)从所述子囊孢子壁提取壳聚糖；纯化所述壳聚糖以形成纯化的壳聚糖；以及沉淀并且干燥所述纯化的壳聚糖以形成壳聚糖产品。
[0022]进一步，所述方法还包括在诱导所述经培养的酵母细胞进行减数分裂之后破坏子囊壁或者破坏所述子囊壁和所述子囊孢子壁。
[0023]进一步，所述方法还包括在诱导所述经培养的酵母细胞进行减数分裂之后破坏子囊壁并且将所述子囊孢子与残渣分离。
[0024]进一步，所述方法还包括在将所述子囊孢子与所述残渣分离之后破坏所述子囊孢子壁。
[0025]进一步，所述氯化钙制备方法如下：
[0026]1)配制氯化铵溶液和氯化钙溶液的混合溶液；加入石灰粉进行复分解反应，将反应器中制得的氯化铵溶液和氯化钙溶液混合溶液的温度维持在86℃，向该混合溶液中加入石灰粉；
[0027]2)蒸氨在上步中加入石灰粉进行复分解反应后进行蒸氨；母液处理，制得氯化钙固体产品；
[0028]将蒸氨后得到的母液进行澄清净化，制得质量百分比浓度为50.25％～53.98％的氯化钙溶液，然后经过压滤去除滤渣，再通过降温直接析出氯化钙固体，冷却制得氯化钙固体产品。
[0029]进一步，所述石灰粉中有效氧化钙的含量≥76％。
[0030]进一步，所述配制氯化铵溶液和氯化钙溶液的混合溶液：
[0031]取所需量的联碱厂副产的氯化铵固体配成33℃的氯化铵饱和溶液，按该氯化铵溶液质量∶氯化钙溶液质量＝1∶4加入到在33℃以上溶解得到的质量百分比浓度为50％的氯化钙溶液中，将配制成的氯化铵溶液和氯化钙溶液的混合溶液置于反应器中。
[0032]进一步，所述加入石灰粉进行复分解反应，将反应器中制得的氯化铵溶液和氯化钙溶液混合溶液的温度维持在86℃，向该混合溶液中加入石灰粉，具体方法如下：
[0033]石灰粉的用量按摩尔数比为：石灰粉中有效氧化钙摩尔数∶氯化铵固体总摩尔数＝2∶1，其中，氯化铵固体总摩尔数为第一步中所配氯化铵饱和溶液中的氯化铵摩尔数的2倍；石灰粉分2次加入，初次加入上述石灰粉总量的2/3，30min后加入其总量剩余的1/3，共反应4小时，加入石灰粉后反应器中溶液的温度维持在106℃，反应过程中保持系统密闭，防止空气漏入，所述氯化铵固体总摩尔数是指第一步中配制氯化铵饱和溶液时所需氯化铵固体摩尔数与下面第三步蒸氨中分二次向氯化铵溶液和氯化钙溶液的混合溶液中补充加入的氯化铵固体摩尔数的总和。
[0034]进一步，所述蒸氨过程中反应温度维持在130℃，蒸氨冷凝器出气温度维持在66
℃，蒸出氨气将被回收利用；在蒸氨进行16min后，向上述氯化铵溶液和氯化钙溶液的混合溶液中补充加入氯化铵固体，加入量为氯化铵固体总摩尔数的1/4；蒸氨进行44min后，第二次向氯化铵溶液和氯化钙溶液的混合溶液中补充加入氯化铵固体，加入量仍为氯化铵固体总摩尔数的1/4，蒸氨反应继续进行，总反应时间为4h。
[0035]结合上述的技术方案和解决的技术问题，本专利技术所要保护的技术方案所具备的优点及积极效果为：
[0036]第一、本专利技术通过壳聚糖制备方法可以制备高质量壳聚糖，从而大大提高复合膜质量；同时，通过氯化钙制备方法采用配制氯化铵溶液和氯化钙溶液的混合溶液；加入石灰粉进行复分解反应将反应器中第一步制得的氯化铵溶液和氯化钙溶液混合溶液的温度维持在86℃，向该混合溶液中加入石灰粉；蒸氨在第二步加入石灰粉进行复分解反应后进行蒸氨；母液处理，制得高纯度氯化钙，有利于复合膜的制备。
[0037]第二，本专利技术通过壳聚糖制备方法可以制备高质量壳聚糖，从而大大提高复合膜质量；同时，通过氯化钙制备方法采用配制氯化铵溶液和氯化钙溶液的混合溶液；加入石灰粉进行复分解反应将反应器中第一步制得的氯化本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种富血小板纤维蛋白复合膜制备方法，其特征在于，所述富血小板纤维蛋白复合膜制备方法包括以下步骤：步骤一，从身体脂肪堆积较多的部位吸取脂肪；将获取的脂肪切割，再过滤；将获得的脂肪负压离心，所述负压范围是19kPa，包括将两个螺旋注射器通过注射器转换器连接，每个注射器里面平均放置获得的脂肪；步骤二，同时将两个注射器拉至最大刻度，然后恢复原脂肪所在刻度；将获得的脂肪离心，中层即是纳米脂肪；按各配方原料的体积比例将纳米脂肪与富血小板纤维蛋白混合均匀，获得混合物，放置于5℃条件下备用；所述富血小板纤维蛋白制备方法：在目标对象局部穿刺皮肤用碘伏消毒；再用无菌注射器的针头穿刺血管，成功之后抽取相对应的静脉血；穿刺完毕以及拔针之后必须用棉签或者用棉球，用力按压穿刺针口的部位，防止其继续出血；从静脉抽取血液后，迅速加入灭菌离心管，立即3000r/min离心15分钟；在5℃冰箱静置35分钟，待血液凝固后，将血液凝固物取出；将底部的血凝块切除，保留淡黄色凝胶状物质，即富血小板纤维蛋白；步骤三，在常温条件下，将季铵化壳聚糖、抗氧化剂和医用氯化钙溶液按比例搅拌形成均匀的混合液；在5℃条件下，把混合物与混合液搅拌均匀，转移到培养皿中静止成富血小板纤维蛋白复合膜。2.如权利要求1所述富血小板纤维蛋白复合膜制备方法，其特征在于，所述壳聚糖制备方法如下：(1)将蛋白质、葡萄糖、琼脂粉混合制备培养基；将酵母细胞放入培养基进行培养；其中经培养的酵母细胞形成酵母细胞的生物质；(2)诱导所述经培养的酵母细胞进行减数分裂，其中经诱导的酵母细胞形成具有子囊孢子的子囊，并且其中每个子囊孢子在子囊孢子壁中含有壳聚糖保护层；(3)从所述子囊孢子壁提取壳聚糖；纯化所述壳聚糖以形成纯化的壳聚糖；以及沉淀并且干燥所述纯化的壳聚糖以形成壳聚糖产品。3.如权利要求2所述富血小板纤维蛋白复合膜制备方法，其特征在于，所述方法还包括在诱导所述经培养的酵母细胞进行减数分裂之后破坏子囊壁或者破坏所述子囊壁和所述子囊孢子壁。4.如权利要求2所述富血小板纤维蛋白复合膜制备方法，其特征在于，所述方法还包括在诱导所述经培养的酵母细胞进行减数分裂之后破坏子囊壁并且将所述子囊孢子与残渣分离。5.如权利要求2所述富血小板纤维蛋白复合膜制备方法，其特征在于，所述方法还包括在将所述子囊孢子与所述残渣分离之后破坏所述子囊孢子壁。6.如权利要求1所述富血小板纤维蛋白复合膜制备方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈铁楼，徐晓刚，许兵，王世锋，任昊天，韩煦，唐震，朱强，邱晓倩，田刚，高建勇，蔚一博，
申请(专利权)人：中国人民解放军海军军医大学第一附属医院，
类型：发明
国别省市：