非酒精性脂肪性肝炎生物标志物组合物及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种非酒精性脂肪性肝炎生物标志物组合物及其应用，生物标志物组合物包括诊断非酒精性脂肪性肝病和/或非酒精性脂肪性肝炎的相关蛋白标志物和/或临床生化标志物，相关蛋白标志物选自CXCL10、CK

【技术实现步骤摘要】
非酒精性脂肪性肝炎生物标志物组合物及其应用


[0001]本专利技术涉及生物检测领域，具体涉及一种非酒精性脂肪性肝炎生物标志物组合物及其应用。

技术介绍

[0002]非酒精性脂肪性肝病(Non
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alcoholic fatty liver disease,NAFLD)，与肥胖、2型糖尿病、代谢综合征密切相关。由于久坐少动的生活方式和高热量饮食结构的流行，NAFLD的发病率呈现逐年上升趋势，已成为目前世界上最常见的肝脏疾病，其在亚洲地区的平均人群发病率为15％
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40％，在我国城市发病率高达43.3％。NAFLD的病理进展过程为从单纯性脂肪变性到非酒精性脂肪性肝炎(Non
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alcoholic steatohepatitis,NASH)，进而导致进展性肝纤维化/肝硬化，最终发展成肝癌。12％
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40％的NAFLD患者会进展为NASH，15％
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33％的NASH患者可发展为肝硬化，而15％
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27％的肝硬化患者会进展成为肝癌。由于肥胖和2型糖尿病患病率的升高，NASH的发病率将在未来十年增加56％。NASH患者进展为肝硬化和肝癌的比例明显高于单纯性脂肪变患者。近期研究表明NASH相关肝癌与其他原因导致的肝癌相比，无有效治疗方法。如何区分单纯性脂肪变性和NASH，对预防疾病的进展至关重要。
[0003]单纯性脂肪变性
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NASH
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肝纤维化/肝硬化
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肝癌的疾病进程多呈隐匿性，肝脏活检一直被认为是NASH诊断的金标准，但是由于肝脏活检穿刺是侵入性检查，花费较高，患者的接受度低，限制了其在临床方面的应用。因此迫切需要建立高敏感特异的非侵入性诊断方法以减少肝脏活检的依赖性，并区分需要进一步治疗的患者。然而，NASH诊断标志物的研发严重滞后，至今尚无临床可用的NASH非侵入性诊断以及预后监测的方法。一些诊断标志物被用于非侵入性诊断NASH，然而诊断准确性较低。例如凋亡标志物细胞角蛋白18(CK
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18)片段是最常被验证的血液标志物，然而单独应用敏感性仅66％，特异性82％；脂肪细胞因子脂联素、瘦素和纤维原细胞生长因子(FGF21)等只与机体代谢异常相关，并且多数只在做减肥手术的人群中得到验证，对NASH诊断的准确度较低；溶酶体酶(Cathepsin D)等在不同人群中的差异较大，未能得到验证。由于单因子在NASH诊断中的准确度有限，急需建立标志物组合物以提高诊断的准确度。
[0004]在NASH中，肝纤维化为肝脏不良临床结局最重要的预测指标，为高危NASH。FDA建议将药物研发的重点放在NASH伴有肝纤维化这一类对健康有着重大需求和潜在效益的领域。开发可以诊断NASH伴有肝纤维化的高危患者的无创诊断标志物和试剂盒对寻找需要药物干预的患者和监测临床药物疗效意义重大。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一种生物标志物组合物，该生物标志组合物在区分非酒精性脂肪性肝炎与单纯性脂肪变性方面显示出高灵敏度、高特异性、高阳性预测值和高阴性预测值。
[0006]本专利技术中所述的非酒精性脂肪性肝炎可采用三种不同的划分标准，包括：
[0007]第一种：肝脏脂肪变评分>＝1，炎症评分>＝1，气球样变评分>＝1。
[0008]第二种：肝脏脂肪变评分>＝1，炎症评分>＝1，气球样变评分>＝1或根据Nonalcoholic Steatohepatitis Research Network(NASH CRN)定义的NAS评分>＝4。采用第二种划分标准能够确定更多的非酒精性脂肪性肝炎，因此可定义为广义非酒精性脂肪性肝炎。
[0009]第三种：广义非酒精性脂肪性肝炎中肝纤维化>＝2，为高危非酒精性脂肪性肝炎，即划分标准为：肝脏脂肪变评分>＝1，炎症评分>＝1，气球样变评分>＝1或根据Nonalcoholic Steatohepatitis Research Network(NASH CRN)定义的NAS评分>＝4，且肝纤维化>＝2。
[0010]本专利技术的另一目的是提供非酒精性脂肪性肝病诊断模型和/或非酒精性脂肪性肝炎诊断模型。本专利技术的非酒精性脂肪性肝炎诊断模型还能够比较非酒精性脂肪性肝炎风险高低。
[0011]本专利技术的另一目的是提供能够根据生物标志物组合物在待测样本中的水平来诊断非酒精性脂肪性肝病和/或非酒精性脂肪性肝炎的人工智能模型。
[0012]本专利技术的另一目的是提供一种用于诊断非酒精性脂肪性肝炎的试剂盒。
[0013]为解决上述技术问题，本专利技术采用如下技术方案：
[0014]一种生物标志物组合物，所述的生物标志物组合物包括诊断非酒精性脂肪性肝病和/或非酒精性脂肪性肝炎的相关蛋白标志物和/或临床生化标志物，所述的诊断非酒精性脂肪性肝病和/或非酒精性脂肪性肝炎的相关蛋白标志物选自CXC趋化因子配体10(CXCL10)、细胞角蛋白18(CK
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18)、选择性自噬接头蛋白(P62/SQSTM1)、碳酸酐酶III(CA3)、角鲨烯环氧化酶(SQLE)、III/IV型胶原蛋白前体(Pro
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C3)或纤维原细胞生长因子(FGF21)中一种或多种；所述的临床生化标志物选自身高体重指数(BMI)、糖化血红蛋白(HbA1c)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL
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C)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、血清碱性磷酸酶(ALP)或血小板(PLT)中的一种或多种。
[0015]优选地，所述的生物标志物组合物至少包括两种所述的诊断非酒精性脂肪性肝病和/或非酒精性脂肪性肝炎和/或高危非酒精性脂肪性肝炎的相关蛋白标志物。
[0016]优选地，分别测量来自检测对象的所述的诊断非酒精性脂肪性肝病和/或非酒精性脂肪性肝炎和/或高危非酒精性脂肪性肝炎的相关蛋白标志物的水平和所述的临床生化标志物的水平，然后使用支持向量机、逻辑回归、朴素贝叶斯和10折交叉验证建立最佳标志物组合物。
[0017]进一步优选地，所述的生物标志物组合物由5种蛋白标志物和4种临床生化标志物组成(称为N9
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NASH)，包含CXCL10、CK
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18、P62/SQSTM1、ALT、SQLE、HbA1c、FGF21、PLT和LDL
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C。
[0018]N9
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NASH能够将非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者与健康者区分开，还能够进一步将非酒精性脂肪性肝病患者中的非酒精性脂肪性肝炎(肝脏脂肪变评分>＝1，炎症评分>＝1，气球样变评分>＝1)和单纯性脂肪变性区分开。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种生物标志物组合物，其特征在于，所述的生物标志物组合物包括诊断非酒精性脂肪性肝病和/或非酒精性脂肪性肝炎的相关蛋白标志物和/或临床生化标志物，所述的诊断非酒精性脂肪性肝病和/或非酒精性脂肪性肝炎的相关蛋白标志物选自CXCL10、CK
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18、P62/SQSTM1、SQLE、CA3、Pro
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C3或FGF21中一种或多种；所述的临床生化标志物选自BMI、HDL
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C、HbA1c、ALT、AST、LDL
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C、TG、TC、ALP或PLT中的一种或多种。2.根据权利要求1所述的生物标志物组合物，其特征在于，所述的生物标志物组合物包括CXCL10、CK
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18、AST、P62/SQSTM1、SQLE、Pro
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C3、FGF21、BMI、HbA1c、ALT、LDL
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C和PLT，或所述的生物标志物组合物由CXCL10、CK
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18、P62/SQSTM1、ALT、SQLE、HbA1c、FGF21、PLT和LDL
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C组成，或所述的生物标志物组合物由CXCL10，CK
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18，Pro
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C3，AST和BMI组成，或所述的生物标志物组合物由CXCL10，CK
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18和BMI组成，或所述的生物标志物组合物由CXCL10和Pro
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C3组成。3.一种非酒精性脂肪性肝病和/或非酒精性脂肪性肝炎诊断模型，其特征在于，收集非酒精性脂肪性肝病和/或非酒精性脂肪性肝炎患者的血液样本，分别测量所述的非酒精性脂肪性肝炎相关蛋白标志物的水平和/或所述的临床生化标志物的水平，使用神经网络(Neural Network)、朴素贝叶斯逻辑回归(Logistic Regression)和10折交叉验证建立所述的非酒精性脂肪性肝病和/或非酒精性脂肪性肝炎诊断模型，所述的非酒精性脂肪性肝炎相关蛋白标志物选自CXCL10、CK
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18、P62/SQSTM1、SQLE、CA3、Pro
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C3或FGF21中一种或多种；所述的临床生化标志物选自BMI、HDL
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C、HbA1c、ALT、AST、LDL
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C、TG、TC、ALP或PLT中的一种或多种。4.根据权利要求3所述的非酒精性脂肪性肝病和/或非酒精性脂肪性肝炎诊断模型，其特征在于，其构建方法具体为：收集非酒精性脂肪性肝病患者(包括非酒精性脂肪性肝炎患者和单纯性脂肪变性患者)的血液样本，分别测量所述的诊断非酒精性脂肪性肝病和/或非酒精性脂肪性肝炎的相关蛋白标志物的水平和/或所述的临床生化标志物的水平，将非酒精性脂肪性肝病患者和健康者的标志物的水...

【专利技术属性】
技术研发人员：于君，黄炜燊，张翔，赵贵君，
申请(专利权)人：香港中文大学深圳研究院，
类型：发明
国别省市：