一种热稳定性提高的植酸酶突变体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种热稳定性提高的植酸酶突变体及其制备方法和应用，属于基因工程和酶工程领域。所述植酸酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。编码所述植酸酶突变体的基因序列如SEQ ID NO.2所示。本发明专利技术采用USERecDNA重组技术将植酸酶YiAPPA中结构片段Val23～Thr67替换为植酸酶rPhyXT52中结构片段Val21～Thr65、以及将植酸酶YiAPPA中结构片段Leu381～Ile424替换为植酸酶rPhyXT52中结构片段Leu379～Asp423，获得了热稳定性显著提高并且植酸酶活性基本不变的植酸酶突变体Yr

【技术实现步骤摘要】
一种热稳定性提高的植酸酶突变体及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及基因工程和酶工程领域，特别是涉及一种热稳定性提高的植酸酶突变体及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]在动物饲料中大约有50～80％的磷是以植酸形式存在的。植酸不但不能被单胃动物所利用，而且还会与金属阳离子、氨基酸、蛋白质和淀粉等物质结合从而抑制这些物质的吸收、影响动物的生产性能，同时没有被动物消化吸收的植酸磷通过排泄物排到土壤和水体中造成严重的环境污染。
[0003]植酸酶又称肌醇六磷酸酶，可以降解植酸生成无机磷和磷酸肌醇。在饲料中添加植酸酶可以有效的提高植酸磷的利用率、减少磷资源的浪费，可以提高氨基酸、蛋白质和矿物质元素等营养物质的消化吸收，同时还可以通过降低单胃动物排泄物中植酸磷的水平而降低植酸所带来的环境污染。正是因为以上这些优点，植酸酶在世界很多国家得到了学术界和商业界的广泛关注。植酸酶作为动物饲料中的常用添加剂，在全球具有广阔的应用前景和巨大的商业价值。到2024年，全球植酸酶市场规模预计将从2019年的3.8亿美元增长至5.9亿美元。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种热稳定性提高的植酸酶Yr
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Mut，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。2.一种编码权利要求1所述的植酸酶Yr
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Mut的基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。3.一种如权利要求1所述的植酸酶Yr
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Mut的制备方法，其特征在于，采用USERec DNA重组技术将植酸酶YiAPPA中结构片段Y
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F2替换为植酸酶rPhyXT52中结构片段r
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F2，将植酸酶YiAPPA中结构片段Y
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F10替换为植酸酶rPhyXT52中结构片段r
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F10，构建植酸酶Yr
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Mut；所述结构片段Y
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F2的氨基酸序列如SEQ ID NO.33所示，所述结构片段r
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F2的氨基酸序列如SEQ ID NO.31所示，所述结构片段Y
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F10的氨基酸序列如SEQ ID NO.34所示，所述结构片段r
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F10的氨基酸序列如SEQ ID NO.32所示。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将植酸酶YiAPPA的基因序列克隆到质粒pBE
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S中，构建重组质粒pBE
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S
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yiappa，所述植酸酶YiAPPA的基因序列如SEQ ID NO.4所示；(2)将植酸酶rPhyXT52的基因序列克隆到质粒pBE
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S中，构建重组质粒pBE
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S
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rphyxt52，所述植酸酶rPhyXT52的基因序列如SEQ ID NO.6所示；(3)分别以重组质粒pBE
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S
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yiappa和重组质粒pBE
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S
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rphyxt52为模板，采用...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾静，何础阔，袁林，郭建军，王通，聂俊辉，
申请(专利权)人：江西省科学院微生物研究所江西省流域生态研究所，
类型：发明
国别省市：