一种生物素化碱性磷酸酶的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种生物素化碱性磷酸酶的制备方法，包括采用生物素琥珀酰亚胺与碱性磷酸酶在碱性条件下进行偶联反应；将偶联反应后的混合物进行纯化，以得到生物素化碱性磷酸酶。本发明专利技术采用生物素琥珀酰亚胺与氨基偶联，只需进行一步反应，极大的简化了修饰工艺，且修饰产物与采用糖基化修饰，活性相当。所用原料对比，糖基化修饰所用的原料生物素酰肼的价格大约是氨基修饰所用原料生物素琥珀酰亚胺的6

【技术实现步骤摘要】
一种生物素化碱性磷酸酶的制备方法


[0001]本专利技术涉及生物医药
，尤其涉及一种生物素化碱性磷酸酶的制备方法。

技术介绍

[0002]碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,AP)是一种膜结合糖蛋白，分子量约140KDa。在pH值呈碱性的环境下可催化磷酸单酯水解，AP是免疫诊断试剂中最常见的标记酶之一。与辣根过氧化物酶(HRP)相比，碱性磷酸酶具有稳定性和高敏感性的优势。AP在生物学尤其是分子生物学和免疫学领域有着广泛的应用，然而，AP的标记是昂贵和费力的。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的是提供一种生物素化碱性磷酸酶的制备方法，以解决现有技术中所存在的一个或多个技术问题，至少提供一种有益的选择或创造条件。
[0004]本专利技术为实现上述专利技术目的采用如下技术方案：
[0005]本专利技术提供了一种生物素化碱性磷酸酶的制备方法，包括：
[0006]采用生物素琥珀酰亚胺与碱性磷酸酶在碱性条件下进行偶联反应；
[0007]将偶联反应后的混合物进行纯化，以得到生物素本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种生物素化碱性磷酸酶的制备方法，其特征在于，包括：采用生物素琥珀酰亚胺与碱性磷酸酶在碱性条件下进行偶联反应；将偶联反应后的混合物进行纯化，以得到生物素化碱性磷酸酶。2.根据权利要求1所述的一种生物素化碱性磷酸酶的制备方法，其特征在于，所述碱性磷酸酶与生物素琥珀酰亚胺的投料摩尔比为1：(5～100)。3.根据权利要求1所述的一种生物素化碱性磷酸酶的制备方法，其特征在于，所述碱性磷酸酶与生物素琥珀酰亚胺的偶联反应pH为7.5～9.0。4.根据权利要求1所述的一种生物素化碱性磷酸酶的制备方法，其特征在于，所述碱性磷酸酶与生物素琥珀酰亚胺的偶联反应温度为2～25℃。5.根据权利要求1所述的一种生物素化碱性磷酸酶的制备方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：钟达，钱永常，来灿钢，山依莎，
申请(专利权)人：杭州纽龙生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：